קו תאים HT-29
HT-29 הוא קו תאים של סרטן המעי הגס האנושי עם מגוון רחב של יישומים במחקר הסרטן והטוקסיקולוגיה. תאים אלה רגישים לטיפולים כימותרפיים סטנדרטיים נגד סרטן המעי הגס. בנוסף, קו התאים HT-29 הוא מודל מאפיין היטב במבחנה לחקר התגובה של אפיתל המעי לזיהום חיידקי. תאי HT-29 מחקים את המאפיינים של תאי מעי בוגרים, כלומר אנטרוציטים, ולכן הם מתאימים למחקרים על היצמדות ומכניזם.
מאמר זה יסקור את כל ההיבטים של קו התאים HT-29 שעליכם לדעת לפני שתעבדו איתו. הוא יכלול בעיקר:
- תאי HT-29: מקור ומידע כללי
- מידע על תרבית תאים של קו התאים HT-29
- תאי HT-29: יתרונות ומגבלות
- תאי HT-29: יישומים
- פרסומים מחקריים על תאי HT-29
- תאי HT-29 משאבים: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
1. תאי HT-29: מקור ומידע כללי
לפני השימוש בכל קו תאים, עליך להכיר את המאפיינים הכלליים ואת מקורו של קו התאים. סעיף זה יסייע לך ללמוד: מהן תאי HT-29? האם HT-29 הוא קו תאים של סרטן המעי הגס? מהו המורפולוגיה של תאי HT-29?
מהו קו התאים HT-29? HT-29 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה של המעי הגס שהוקם בשנת 1964 על ידי Trempe ו-Fogh. התאים נגזרו במקור מגידול ראשוני של אישה לבנה (בת 44) עם אדנוקרצינומה של המעי הגס [1]. מאז הקמתו, קו תאים זה שימש לחקר הביולוגיה של סוגי סרטן.
מורפולוגיה של תאי HT-29: קו תאיםHT-29 הוא בעל מורפולוגיה דמוית אפיתל. תאים מובחנים גדלים בשכבה אחת, יוצרים חיבורים הדוקים בין תאים ובעלי גבול מברשת אפיטי. אם תאים אלה גדלים בסביבה דלת גלוקוז או מקבלים חומרים משרים כמו בוטיראט או חומצה, הם מפגינים תכונות דמויות אנטרוציטים.
גודל התא: קוטר קו התאים HT-29 של סרטן המעי הגס הוא 11 מיקרומטר.
גנום ופלואידיות: המספר המודאלי של כרומוזומים בקו התאים HT-29 הוא 71. הוא עשוי לנוע בין 68 ל-72. יתר על כן, מספר הכרומוזומים הממוזג של תאי HT-29 הוא היפר-טריפלואידי, עם רכיב 2S המופיע בשיעור של 2.4%.
מהו HT29 MTX? HT29 MTX הוא קו תאים עמיד למתוטריקסט, המבודד מקו התאים המקורי HT-29 של סרטן המעי הגס האנושי, באמצעות התאמה ל-10 µM מתוטריקסט. תאים אלה מציגים מאפיינים של תאי גביע בוגרים המפרישים ריר.
2. מידע על תרבית תאים של קו תאים HT-29
היכרות עם דרישות התרבית הבסיסיות של קו תאים יכולה להקל על העבודה איתו. כדאי לדעת: מהו זמן הכפלה של קו התאים HT-29? מהו צפיפות הזריעה של תאי HT-29? איזה מצע מתאים לתאי HT-29?
|
זמן הכפלה |
זמן הכפלה ממוצע של קו התאים HT-29 הוא 24 שעות. |
|
דבקות/תלייה |
HT-29 הוא קו תאים דבקים. |
|
צפיפות זריעה |
צפיפות הזריעה המומלצת לתאי HT-29 היא 3 x104תאים/סמ"ר. התאים שגודלו נשטפים ב-1 X PBS ומופרדים לאחר דגירה עם Accutase במשך 8-10 דקות. מתווסף מדיום טרי, והתאים נצנטריפוגים. משקע התאים מושעה מחדש, והתאים מועברים לבקבוקים חדשים בצפיפות התאים המומלצת. |
|
מדיום גידול |
Eagle's Minimum Essential Medium (EMEM) בתוספת 2.5 mM L-glutamine ו-10% FBS משמש לגידול אופטימלי של תאי HT-29. יש להחליף את התווך 2-3 פעמים בשבוע. |
|
תנאי גידול |
תאי HT-29 דורשים אינקובטור לח עם טמפרטורה של 37°C ואספקתCO2 של 5% לצורך גדילה. |
|
אחסון |
תאים אלה מאוחסנים בשלב האדים של חנקן נוזלי בטמפרטורה נמוכה מ-195°C. |
|
מדיום הקפאה ותהליך |
מדיום ההקפאה המשמש לקו התאים HT-29 הוא CM-1 או CM-ACF. התאים מוקפאים בתהליך הקפאה איטי הגורם לירידה של 1°C בטמפרטורה ומגן ביעילות על חיוניות התאים. |
|
תהליך ההפשרה |
תאי HT-29 קפואים מופשרים באמבט מים בטמפרטורה של 37°C. תאים אלה יכולים להיות מושרים מחדש ומוזרקים ישירות לתוך צלוחית עם מצע גידול טרי. לחלופין, התאים המופשרים יכולים להיות מסוננים כדי להסיר את מרכיבי חומר ההקפאה, מושרים מחדש במצע טרי ומגודלים בצלוחיות. |
|
רמת בטיחות ביולוגית |
רמת בטיחות ביולוגית 1 משמשת לטיפול ולתחזוקה של קו התאים HT-29. |
3. תאי HT-29: יתרונות ומגבלות
לכל קו תאים יש יתרונות וחסרונות ייחודיים המבדילים אותו מקווי תאים אחרים. סעיף זה יסקור את היתרונות והמגבלות העיקריים הקשורים לתאי HT-29.
יתרונות
היתרונות העיקריים של תאי HT-29 הם:
-
קלים לגידול
קו תאי HT-29 קל לטיפול ולתחזוקה, ללא דרישות מורכבות לגידול. הוא מגודל באופן נרחב במעבדות מחקר.
-
מודל תאים מעיים במבחנה
תאי HT-29 יכולים להתמיין לתאי מעי בוגרים (אנטרוציטים ותאים המייצרים ריר) בתנאי תרבית ספציפיים. הם משמשים כמודל תאי לחקר עיכול המזון וזמינות ביולוגית.
-
יעילות טרנספקציה גבוהה
תאי סרטן המעי הגס HT-29 מציעים יעילות טרנספקציה גבוהה, מה שהופך אותם למתאימים למחקרים על ביטוי גנים ורגולציה. ניתן לבצע ניסויי טרנספקציה זמניים ויציבים באמצעות שיטות שונות.
-
רגישות לתרופות
תאי HT-29 רגישים לתרופות כימותרפיות כגון פלואורואורציל ואוקסליפלטין, הנפוצות בטיפול בסרטן המעי הגס. הם משמשים לחקר עמידות לתרופות ולסינון תרופות פוטנציאליות לטיפול בקרצינומה של המעי הגס.
מגבלות
-
הטרוגניות
תאי HT-29, כמו קווי תאים סרטניים אחרים, מציגים הטרוגניות ועשויים שלא ליצור אוכלוסיית תאים אחידה. הדבר עלול להשפיע על השחזור של תוצאות בבדיקות מסוימות ולהוביל לשינויים קלים בתוצאות הניסוי.
-
הבדלה מוגבלת
לתאי HT-29 פוטנציאל הבחנה מוגבל. הם אינם מבחינים באופן מלא לתאי מעי או תאי קולון, אלא מציגים רק כמה מאפיינים בודדים. מגבלה זו עשויה להגביל את השימוש בהם בחקר תהליכים ביולוגיים מורכבים יותר.
4. תאי HT-29 : יישומים
קו תאי HT-29 מתורבת בהרחבה במעבדות מחקר בשל מגוון היישומים הרחב שלו. סעיף זה יסקור רק כמה יישומים משמעותיים של תאי HT-29.
מחקר סרטן: HT-29 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה של המעי הגס, ולכן הוא משמש לחקר התקדמות הסרטן, התפתחותו והמנגנונים המולקולריים הבסיסיים. במחקר שנערך בשנת 2018 נעשה שימוש בקו תאים HT-29 כדי לחקור את המולקולות התאיות האחראיות לגרורות. במחקר זה נצפה כי הגנים vimentin ו-CXCR4 מווסתים את גרורות התאים. לעומת זאת, טרנספקציה של חיקוי microRNA-193a-5p יכולה להפחית את רמות ה-mRNA של גנים אלה ולהפחית בהצלחה את גרורות תאי הסרטן [2].
מחקר טוקסיקולוגי: קו התאיםHT-29 נמצא בשימוש נרחב במחקר טוקסיקולוגי. תאי קרצינומה קולורקטלית אלה משמשים להערכת הרעילות של תרופות שונות באמצעות בדיקות שונות. לדוגמה, מחקר בחן את הפוטנציאל הרעיל של תמצית אתנולית מצמח Syzygium cumini על קו התאים HT-29. התוצאות הראו דיכוי משמעותי של צמיחת תאי HT-29, מה שמעיד על תכונות אנטי-סרטניות מבטיחות של התמצית [3].
מיקרוביולוגיה: HT-29 יכול לשמש כמערכת תאים מארחת לחקר הפתוגנזה של חיידקים פוטנציאליים, כלומר חיידקים ונגיפים. חוקרים יכולים להדביק תאי HT-29 בחיידקים כדי לחקור את האלימות שלהם ואת תגובת המארח. מחקר כזה השתמש בתאי HT-29 כדי לחקור את התכונות הפרוביוטיות של חיידקי חומצת חלב [4]. במחקר אחר נעשה שימוש בתאי HT-29 כדי להעריך את היעילות והבטיחות של טיפולים בבקטריופאג'ים [5].
5. פרסומים מחקריים על תאי HT-29
סעיף זה יציג כמה פרסומים בולטים על תאי HT-29 שיעזרו לכם לתכנן את מחקרכם.
הערכת ההשפעה האנטי-סרטנית של תמצית אתנולית של Syzygium cumini על קו תאים קולורקטלית HT-29
מחקר זה הציע את תמצית האתנול Syzygium cumini כגורם אנטי-סרטני פוטנציאלי נגד קו תאי סרטן המעי הגס HT-29. התמצית עיכבה באופן משמעותי את צמיחת תאי הסרטן.
פרסום זה ב-Bioscience Reports בדק את הפעילות האנטי-סרטנית של תרכובת בשם Tetradrine על תאי HT-29. התוצאות הראו ש-tetrandrine מעכב את התרבותם וצמיחתם של תאי הסרטן באמצעות ויסות מסלולי איתות התאים.
microRNA‐193a‐5p מעכב את הנדידה של תאי סרטן המעי הגס האנושיים HT‐29 באמצעות דיכוי מסלול הגרורות
מחקר זה הציע כי miRNA-193a-5p עשוי לווסת את גרורות תאי HT-29 באמצעות ויסות גנים הקשורים לגרורות.
בקטריופאגים הם אגרסיביים יותר כלפי חיידקים בתאים אנושיים מאשר בתרבית חיידקים; תובנות מתאי HT-29
מאמר זה פורסם ב-Nature Scientific Reports בשנת 2018. מחקר זה השתמש בקו תאים סרטניים HT-29 כמודל תאי מעי כדי להעריך את היעילות של הטיפול בבקטריופאג'ים המוצע.
במחקר זה, החוקרים השתמשו בתאי HT-29 כדי לחקור את הפעילות הפרוביוטית של חיידקי חומצת חלב. מעניין לציין כי המחקר הצביע על כך שחיידקי לקטובצילי מונעים הידבקות של חיידקים פתוגניים לתאי המעי הגס.
6. תאי HT-29 משאבים: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
סעיף זה יסקור כמה משאבים מקוונים הזמינים על תאי HT-29 שיעזרו ללמוד את פרוטוקולי התחזוקה, התרבית והטרנספקציה שלהם.
פרוטוקולים לגידול תאים
המשאבים הבאים ינחו אתכם בנוגע לתרבית משנה של תאי HT-29.
- תרבית תאי HT-29: קישורזה יספק ידע בסיסי על מצע הגידול, ההפשרה והתרבות המשנית של תאי HT-29.
- תחזוקת תרבויות HT-29: מאמרזה מכיל את כל המידע השימושי על תרבית ותחזוקת תאי HT-29.
פרוטוקולי טרנספקציה
קו תאי HT-29 הוא בעל יעילות טרנספקציה גבוהה, והוא משמש לעתים קרובות במחקרים על ביטוי גנים. המשאבים הבאים מתארים את פרוטוקולי הטרנספקציה האפשריים עבור תאים אלה.
- טרנספקציה של HT-29: קישור זה לאתר מכיל פרוטוקול מפורט לטרנספקציה של תאי HT-29.
- טרנספקציה של קו תאים HT-29: מסמך זה מתאר את פרוטוקול הטרנספקציה של קו תאים HT-29 עם DNA פלסמיד.
סרטונים הקשורים לקו תאים HT-29
להלן מספר סרטונים על תרבית ותחזוקה של קו תאים סרטני זה.
- העברת תאים: סרטוןזה מציג פרוטוקול העברת תאים עבור קווי תאים אדירנטיים.
- טרנספקציה של תאי HT-29: סרטוןזה ינחה אתכם לגבי שיטת הטרנספקציה המשמשת לתאי HT-29.
אנו מקווים שהמידע במאמר זה יהיה מועיל ומספיק עבורכם לטיפול בקו תאים HT-29. אם אתם מתכננים להשתמש בתאי HT-29 במחקר שלכם, הזמינו אותם מאיתנו.
מקורות
- Martínez-Maqueda, D., B. Miralles, and I. Recio, HT29 cell line. The Impact of Food Bioactives on Health: in vitro and ex vivo models, 2015: p. 113-124.
- Shirafkan, N., et al., microRNA‐193a‐5p מעכב הגירה של תאי סרטן המעי הגס האנושיים HT‐29 באמצעות דיכוי מסלול הגרורות. Journal of cellular biochemistry, 2019. 120(5): עמ' 8775-8783.
- Khodavirdipour, A., R. Zarean, and R. Safaralizadeh, הערכת ההשפעה האנטי-סרטנית של תמצית אתנולית של Syzygium cumini על קו תאים של המעי הגס HT-29. Journal of gastrointestinal cancer, 2021. 52: עמ' 575-581.
- Fonseca, H.C., et al., תכונות פרוביוטיות של לקטובציליוס ויכולתם לעכב את ההידבקות של חיידקים פתוגניים למעיים לתאי Caco-2 ו-HT-29. פרוביוטיקה וחלבונים אנטי-מיקרוביאליים, 2021. 13: עמ' 102-112.
- Shan, J., et al., בקטריופאגים הם אליםים יותר כלפי חיידקים בתאי אדם מאשר בתרבית חיידקים; תובנות מתאי HT-29. דוחות מדעיים, 2018. 8(1): עמ' 5091.
