תאי B16 - מדריך בסיסי לתאי מלנומה B16 במחקר אונקולוגי

B16 הוא קו תאים של סרטן העור (מלנומה) שמקורו בעכברים. קו תאים זה הוא מודל יעיל במבחנה לחקר סוגי סרטן העור בבני אדם. הוא משמש לעתים קרובות לחקר היווצרות גידולים מוצקים וגרורות של תאי סרטן.

מאמר זה יסייע לכם להבין את היסודות של קו תאי מלנומה B16. באופן ספציפי, הוא יעסוק בנושאים הבאים:

1.      מאפיינים כלליים ומקור קו התאים B16

חלק זה של המאמר יסקור את המאפיינים של קו תאי המלנומה B16. תוכלו למצוא תשובות לשאלות נפוצות כגון: מהו קו תאי הסרטן B16? מהו מקורם של תאי B16? מהו גודלם של תאי B16?

  • קו התאים B16 הוקם בשנת 1954. תאים אלה נגזרו מעכברי C57BL/6J שסבלו מגידול ספונטני בעור במעבדות ג'קסון במיין.
  • אלה הם תאים אפיתל המייצרים מלנין, בעלי יכולת גרורות בטחול, בכבד ובריאות.
  • תאי המלנומה B16 גדלים כשכבה אחת ומציגים מורפולוגיה של תאים דמויי אפיתל וצורת ציר.
  • גודל קו התאים B16 הוא כ-15.4 מיקרומטר.
  • ישנם תת-שיבוטים מובחנים של תאי B16, כולל B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 ו-B16F10. תת-קווים אלה שונים מתאי B16 ההוריים ושומרים על כמה תכונות ספציפיות. למשל, הם בעלי הבדלים במורפולוגיה, בגודל התאים ובמאפיינים אחרים. ל-B16F10 יכולת גרורתית גבוהה בריאות, ו-B164A5 הוא קו התאים האגרסיבי ביותר לסרטן העור בהשוואה ל-B16F10, B16-GMCSF ו-B16FLT3 [1].

אנימציה תלת-ממדית של תקריב של סרטן עור מתפשט, כגון מלנומה ממאירה, המדלקת את הרקמה הסובבת.

2.      מידע על תרבית תאי B16

לפני תחזוקת או תרבית קו תאים, ייתכן שתחפשו מידע מרכזי אודות זמן הכפלה, סוג התא, מצע גידול, תנאי תרבית וכו'. סעיף זה מכיל את כל המידע הדרוש לגידול תאי B16.

נקודות מרכזיות לגידול תאי B16

זמן הכפלת האוכלוסייה:

זמן הכפלת האוכלוסייה הממוצע של תאי B16 מוערך ב-24 שעות.

הידבקות או תסיסה:

תאי B16 הם דבקים וגדלים בשכבות חד-תאיות.

צפיפות זריעה:

מומלץ לזרוע תאי B16 בצפיפות של 1 עד 2 x104תאים/סמ"ר. תאי B16 דבקים נשטפים ב-1 x PBS ומופרדים מהמשטח באמצעות תמיסת Accutase. התאים נצנטריפוגים, והמשקע התאי מושעה מחדש במדיום הגידול. לאחר מכן, תאים אלה מועברים לבקבוק חדש לצורך גידול.

מדיום גידול:

תאי B16 מושרשים במדיום EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium) המכיל 10% סרום עגלי (FBS). יש לחדש את מדיום הגידול 2-3 פעמים בשבוע.

תנאי גידול:

לגידול קו התאים B16 משתמשים באינקובטור לח עם אספקתCO2 של 5% וטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס.

אחסון:

תאים אלה מאוחסנים בטמפרטורה נמוכה מ-150 מעלות צלזיוס או בשלב האדים של חנקן נוזלי כדי להגן על חיוניות התאים.

תהליך הקפאה ומדיום:

מדיום הקפאה CM-1 או CM-ACF משמש להקפאת תאי B16 בתהליך הקפאה איטי.

תהליך ההפשרה:

תאי B16 קפואים מופשרים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באמבט מים המכיל חומר אנטי-מיקרוביאלי. תאים מופשרים ניתן לתרבת ישירות על ידי הזלפתם לתוך בקבוקים המכילים מצע גידול. בנוסף, תאים אלה ניתן לסובב בצנטריפוגה כדי להסיר מרכיבי מצע ההקפאה ולאחר מכן לתרבת אותם במצע חדש.

רמת בטיחות ביולוגית:

יש לטפל בקו התאים B16 או לשמור אותו במעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 1.

שכבה חצי-ממוזגת של תאי מלנומה B16 בהגדלה של 10x ו-20x.

3.      קו תאים B16: יתרונות וחסרונות

כמו קווי תאים אחרים, גם ל-B16 יש שילוב ייחודי של יתרונות וחסרונות. בסעיף זה מפורטים כמה מהיתרונות והחסרונות המשמעותיים של קו תאים זה של מלנומה.

יתרונות

B16 הוא הכלי העכברי היעיל הראשון שנמצא בשימוש נרחב במחקר גרורות בשל היתרונות שהוא מציע. כמה מהיתרונות של קו תאים זה של סרטן העור הם:

קל לגידול

קו התאים B16 קל לגידול במעבדות מחקר. הוא נמצא בשימוש נרחב לחקר ביולוגיה של תאי סרטן, מסלולי איתות ועוד.

צמיחה מהירה

קו תאי המלנומה B16 מציג קצב התרבות גבוה, מה שהופך אותו מתאים לחקר תהליכי חלוקת תאים וצמיחה.

תumorigenicity

B16 הוא קו תאים ממאיר בעל תכונות דמויות גידול כגון פלישה, נדידה והתפשטות. הוא בעל ערך רב לחקר היווצרות גידולים, התקדמותם וגרורותיהם.

 

חסרונות

החסרונות הקשורים לקו התאים B16 הם:

חוסר רלוונטיות לבני אדם

מכיוון ש-B16 הוא קו תאים של מלנומה בעכברים, הוא עשוי שלא לייצג במדויק את הביולוגיה של סרטן העור בבני אדם, מה שמגביל את היכולת לתרגם את ממצאי המחקר.

הטרוגניות

תאי B16 הם הטרוגניים, ומציגים תכונות גנטיות ופנוטיפיות מגוונות בתוך אותה תרבות. דבר זה עלול להשפיע על אמינות התוצאות ועל יכולת השחזור שלהן.

 

4.      יישומים של תאי B16

קו התאים B16 נמצא בשימוש נרחב במחקרים. כמה יישומים מבטיחים של קו תאים זה הם:

  • ביולוגיה של גידולים: קו תאיםזה של סרטן עור בעכברים הוא טומורגני ומשמש רבות להבנת הביולוגיה של גידולים. מספר מחקרים נערכו כדי לחקור את המנגנונים התאיים העומדים מאחורי צמיחת תאי הגידול, התפשטותם וגרורותיהם באמצעות תאי B16. מחקר שנערך בשנת 2020 השתמש בתאי B16 כדי לחקור את תפקידו של RNA ארוך לא מקודד, LncRNA MEG3, בהיווצרות, צמיחה וגרורות של מלנומה. מחקר זה מצא כי ה-RNA הלא מקודד מווסת את ציר miRNA-21/E-Cadherin כדי לעורר אירועים תאיים אלה [2]. באופן דומה, נערך מחקר לבחינת התפקיד הפוטנציאלי של איתות Notch1 בדיכוי חיסוני הנגרם על ידי גידולים באמצעות תאי B16 [3].
  • גילוי תרופות: תאיB16 משמשים לאימות ולבדיקת ההשפעות הטיפוליות הפוטנציאליות של תרופות מועמדות. מחקר העריך את ההשפעה האנטי-גידולית של חומצה נאו-גמבוגית, תרכובת טבעית, באמצעות קו תאים B16. תוצאות המחקר גילו כי תרכובת זו מווסתת את מסלול האיתות PI3K/Akt/mTOR כדי לגרום למוות של תאי סרטן [4]. מחקר אחר בחן את ההשפעה האנטי-מלנומית של Ginsenoside Rg3, ספונין, באמצעות קו תאים B16. המחקר הציע כי תרכובת טבעית זו גורמת לפעילות אנטי-גידולית על ידי ויסות מסלולי ERK ו-Akt [5].

 

5.      פרסומי מחקר העוסקים בתאי B16

להלן כמה פרסומים מחקריים חשובים העוסקים בקו תאי מלנומה B16.

LncRNA MEG3 מקדם את צמיחת המלנומה, את הגרורות ואת היווצרותן באמצעות ויסות ציר miR-21/E-cadherin

פרסום זה בכתב העת Cancer Cell International (2020) הציע כי RNA ארוך לא מקודד MEG3 משפר את היווצרותם, צמיחתם וגרורותיהם של תאי מלנומה B16 באמצעות ויסות ציר miRNA-21/E-Cadherin.

נגזרת פסורלן חדשה - MPFC - משפרת את ייצור המלנין באמצעות הפעלת מסלולי איתות p38 MAPK ו-PKA בתאי B16

מאמר זה פורסם בכתב העת International Journal of Molecular Medicine בשנת 2018. מחקר זה בחן את ההשפעה והמנגנונים המלנוגניים של נגזרת פסורלן - 4-methyl-6-phenyl-2H-furo[3,2-g] chromen-2-one (MPFC) בתאי B16. המחקר הציע כי נגזרת זו מקדמת מלנוגנזה על ידי גירוי מסלולי האיתות התאיים PKA ו-p38 MAPK.

איתות Notch1 בתאי מלנומה קידם דיכוי חיסוני הנגרם על ידי הגידול באמצעות ויסות יתר של TGF-β1

מחקר זה פורסם בשנת 2018 בכתב העת Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. ממצאי המחקר מצביעים על כך שהפעלת איתות Notch1 בתאי B16 עשויה למנוע חסינות אנטי-סרטנית באמצעות העלאת הביטוי של הגן TGF-β1.

חומצה נאו-גמבוגית גורמת לאפופטוזיס של תאי מלנומה B16 באמצעות מסלול האיתות PI3K/Akt/mTOR

מחקר זה נערך על ידי Chunlan Wu ועמיתיו בשנת 2020 ופורסם בכתב העת Acta Biochimica Polonica. מחקר זה קובע כי חומצה נאו-גמבוגית, תרכובת טבעית, יכולה לגרום למוות של תאי מלנומה B16 על ידי ויסות שרשרת האיתות PI3K/Akt/mTOR.

קומפלקס אירידיום (III) כגורם אנטי-סרטני חזק גורם לאפופטוזיס ואוטופגיה בתאי B16 באמצעות עיכוב מסלול AKT/mTOR

מאמר מחקר זה פורסם ב-European Journal of Medicinal Chemistry בשנת 2018. במחקר זה, החוקרים בדקו את הפעילות האנטי-סרטנית של תרכובת, קומפלקס אירידיום (III), באמצעות תאי מלנומה B16.

Ailanthone גורם לעצירת מחזור התא ואפופטוזיס בתאי מלנומה B16 ו-A375

מחקר זה הציע כי חומר ביו-פעיל צמחי, איילנתון, בעל פוטנציאל אנטי-סרטני מכיוון שהוא יכול לגרום לאפופטוזיס ולעצירת מחזור התא בתאי מלנומה B16 ו-A375. מאמר זה פורסם ב-Biomolecules בשנת 2019.

6.      משאבים עבור קו תאים B16: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

ישנם משאבים מוגבלים על קו התאים B16 המסבירים את פרוטוקולי התרבית והטרנספקציה שלו.

להלן כמה פרוטוקולים לגידול תאים עבור תאי B16.

  • תרביות תאי B16: אתר זה מכיל את כל המידע הדרוש לגידול תאי B16, כולל מצעי גידול, תרבית משנה, הפשרה והקפאה של תאים.

מקורות

  1. Danciu, C., et al., התנהגות של ארבעה תת-קווי תאים מלנומה עכבריים B 16 שונים: עור C57 BL/6J. כתב העת הבינלאומי לפתולוגיה ניסויית, 2015. 96(2): עמ' 73-80.
  2. Wu, L., et al., LncRNA MEG3 מקדם צמיחה, גרורות והיווצרות של מלנומה באמצעות ויסות ציר miR-21/E-cadherin. Cancer cell international, 2020. 20: עמ' 1-14.
  3. Yang, Z., et al., איתות Notch1 בתאי מלנומה קידם דיכוי חיסוני הנגרם על ידי הגידול באמצעות ויסות יתר של TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): עמ' 1-13.
  4. Wu, C., et al., חומצה Neogambogic גורמת לאפופטוזיס של תאי מלנומה B16 באמצעות מסלול האיתות PI3K/Akt/mTOR. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): עמ' 197-202.
  5. Meng, L., et al., פעילות אנטי-סרטנית של ג'ינסנוסיד Rg3 במלנומה באמצעות ויסות מטה של מסלולי ERK ו-Akt. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): עמ' 2069-2079.

 

אנו מזהים שאתה נמצא במדינה אחרת או משתמש בשפת דפדפן שונה מזו שנבחרה כרגע. האם ברצונך לקבל את ההגדרות המוצעות?

סגור