תאי AGS - חקר תאי AGS של אדנוקרצינומה בקיבה במחקרים על סרטן
תאיAGS מהווים קו תאים של אדנוקרצינומה בקיבה האנושית, הנמצא בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי. הוא משמש במיוחד לחקר הביולוגיה של סרטן הקיבה, כולל צמיחת הגידול, התפתחותו, התקדמותו והתערבויות טיפוליות. בנוסף, הוא משמש לחקר האינטראקציות בין הפתוגן למאכסן.
מאמר זה ידון ביסודות תאי AGS אפיתל הקיבה. בפרט, הוא יכסה:
- מאפיינים כלליים ומקור תאי AGS
- מידע על תרבית קו תאי AGS
- קו תאים AGS: יתרונות ומגבלות
- יישומים של תאי AGS
- פרסומים מחקריים על קו תאי AGS
- משאבים עבור קו תאי AGS: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
1. מאפיינים כלליים ומקור תאי AGS
לפני שמתחילים לעבוד עם קו תאים, יש להכיר את מקורו ואת המאפיינים הכלליים שלו. סעיף זה יכסה את הנושאים הבאים: מהן תאי AGS? מהו מקורם של תאי AGS? מהו המבנה המורפולוגי של קו תאי הסרטן AGS?
- קו תאים AGS נגזר מרקמת הקיבה של אישה קווקזית בת 54 עם אדנוקרצינומה בקיבה. הוא בודד בשנת 1979 [1].
- לתאי AGS מורפולוגיה דמוית אפיתל.
- תאי AGS האפיתלליים בקיבה הם היפרדיפלואידים. מספר הכרומוזומים המודאלי של תאי AGS הוא 49, המופיע בכמעט 60% מהתאים. פוליפלואידיות מופיעה גם בכ-3.6% מהתאים.
2. מידע על תרבית תאי AGS
לצורך טיפול וניהול נכונים של קו תאים, עליך להכיר את עקרונות היסוד של תרבית תאים. בפרט, עליך ללמוד: מהו זמן הכפלת התאים של AGS? מהו מצע התרבית של תאי AGS? כיצד מבצעים תרבית משנה של תאי AGS? אילו מצעי הקפאה משמשים לתאי AGS של אפיתל הקיבה?
נקודות מרכזיות בגידול תאי AGS
|
זמן הכפלה: |
זמן הכפלת תאי AGS נע בין 24 ל-48 שעות. |
|
דבקים או בתמיסה: |
תאי AGS הם דבקים. הם צומחים לשכבות חד-תאיות. |
|
צפיפות זריעה: |
תאי AGS נזרעים בצפיפות תאים של 1 x104תאים/סמ"ר. תאים יוצרים שכבה חד-תאית מלוכדת בצפיפות זו תוך 3 עד 5 ימים. לאחר הסרת המדיום הישן, התאים נשטפים ב-1 x PBS ומוחממים עם תמיסת פירוק Accutase. התאים המנותקים הושעו מחדש במדיום התרבית ונסחטו. משקע התאים הושעה מחדש, ולאחר ספירת תאי AGS, הם הועברו לבקבוק חדש לצורך גידול. |
|
מדיום גידול: |
תרבית DMEM המכילה 10% FBS, 4 mM L-Glutamine, 4.5 g/L Glucose, 1.5 g/L NaHCO3, ו-1.0 mM Sodium pyruvate משמשת לגידול תאי AGS. יש להחליף את התרבית 2 עד 3 פעמים בשבוע. |
|
תנאי גידול: |
תאי AGS נשמרים באינקובטור לח (בטמפרטורה של 37°C) עם אספקת CO2 של 5%. |
|
אחסון: |
תאי AGS קפואים נשמרים במקפיאים חשמליים בטמפרטורה של מתחת ל-150°C או בשלב האדים של חנקן נוזלי למשך זמן ארוך יותר. |
|
תהליך ההקפאה ומדיום: |
מדיום CM-1 או CM-ACF משמש להקפאת תאי AGS. הקפאת התאים מתבצעת באמצעות תהליך הקפאה איטי המאפשר ירידה של 1°C בלבד בטמפרטורה לדקה ומגן על חיוניות התאים. |
|
תהליך ההפשרה: |
תאי אפיתל קיבה קפואים מעורבבים במהירות באמבט מים בטמפרטורה של 37°C למשך 40 עד 60 שניות. התאים המופשרים מושרים מחדש במדיום תרבית טרי ומועברים לצלוחיות חדשות לצורך גידול. לאחר 24 שעות של דגירה, התרבית מחודשת כדי להסיר את מרכיבי התרבית הקפואה. בניגוד לכך, התאים המופשרים נצנטריפוגים, ומרכיבי התרבית הקפואה מוסרים. לאחר מכן, התאים שנקצרו מושרים שוב ומועברים לבקבוק המכיל את התרבית. |
|
רמת בטיחות ביולוגית: |
תנאי מעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 2 חיוניים לגידול תאי AGS. |
3. קו תאים AGS: יתרונות ומגבלות
חלק זה של המאמר יאיר כמה מהיתרונות והמגבלות העיקריים הקשורים לתאי AGS.
יתרונות
היתרונות העיקריים של תאי AGS אפיתל קיבה הם:
|
קלים לגידול |
קו תאי קרצינומה בקיבה AGS קל לתחזוקה במעבדות לגידול תאים. אין לו דרישות גידול תאים מסובכות וקטנוניות. יתר על כן, הוא מציג מאפייני צמיחה טובים, מה שהופך אותו לבחירה אידיאלית לחקר הביולוגיה של סרטן הקיבה. |
|
רלוונטיות לסרטן הקיבה |
תאי AGS נגזרו מאדנוקרצינומה בקיבה אנושית, מה שהופך אותם לשימוש נרחב לחקר הביולוגיה של קרצינומה בקיבה והתערבויות טיפוליות. |
מגבלות
המגבלה הקשורה לקו התאים AGS היא:
|
מודל תאים במבחנה |
תאי AGS מתורבתים במעבדות מחקר ביו-רפואיות בתנאים מלאכותיים. לכן, ייתכן שהם אינם משחזרים באופן מלא את הסביבה המיקרו-סביבתית של סרטן הקיבה in vivo ואת האינטראקציות התאיות והמולקולריות האחרות. |
4. יישומים של תאי AGS
תאי AGS משמשים באופן ספציפי לחקר הביולוגיה של סרטן הקיבה. יש להם יישומים מבטיחים רבים אחרים בתחום הביו-רפואי. כמה מהיישומים המחקריים המעניינים של תאי AGS הם:
- מחקר סרטן הקיבה: תאיAGS הם כלי מחקר מצוין לחקר המנגנונים התאיים והמולקולריים העומדים בבסיס התפתחות סרטן הקיבה, גרורותיו וחדירתו. חוקרים גם משתמשים בתאי AGS אפיתל הקיבה כדי לחקור תהליכים תאיים שונים, מוטציות גנטיות ומסלולי איתות בהתפתחות סרטן הקיבה. מחקר שפורסם ב-Oncology Reports (2019) מצא כי microRNA-183-5p.1 מעודד התרבות, נדידה וחדירה של תאי גידול על ידי עיכוב שרשרת האיתות Bcl 2/P53. בנוסף, הוא גם מווסת כלפי מטה את הגן TPM1 כדי להפעיל השפעות אלה. לפיכך, הן microRNA והן TPM1 מוצעים כיעדים מולקולריים יעילים לפיתוח טיפולים ממוקדים נגד סרטן הקיבה [2].
- סינון תרופות: תאיAGS משמשים בדרך כלל לסינון תרופות חדשות ויעילות נגד סרטן הקיבה. חוקרים מעריכים את הרעילות התאית ואת היעילות של תרופות פוטנציאליות באמצעות קו התאים AGS. כמו כן, נערך מחקר לזיהוי מטרות מולקולריות חדשות ופיתוח טיפולים ממוקדים חדשניים למאבק בסרטן הקיבה. מחקר שנערך בשנת 2021 השתמש בתאי סרטן הקיבה AGS ובחן את ההשפעה הטיפולית של התרופה פקליטקסל. הממצאים העלו כי פקליטקסל גורם לקטסטרופה מיטוטית, מנגנון אינטגרלי של אפופטוזיס או מוות תאי בתאי AGS. בנוסף, הוא גם קידם אוטופגיה בתאי סרטן הקיבה [3].
- אינטראקציות בין מארח לפתוגן: קו תאי הסרטן AGS חוקר גם אינטראקציות בין מארח לפתוגן. זה עוזר לחוקרים להבין את המנגנונים והתגובות התאיים המעורבים בזיהום. לדוגמה, מחקר שנערך בשנת 2020 מצא כי RNA קטן שאינו מקודד, הנמצא בשלפוחיות הממברנה החיצונית של Helicobacter pylori, מפחית את הפרשת האינטרלוקין 8 בתאי AGS אנושיים [4].
5. פרסומים מחקריים על קו תאים AGS
חלק זה של המאמר יסקור כמה פרסומים מחקריים מעניינים ומצוטטים ביותר העוסקים בתאי AGS.
סלידרוסיד גורם לאפופטוזיס ואוטופגיה מגנה בתאי AGS של סרטן קיבה אנושי באמצעות מסלול PI3K/Akt/mTOR
מחקר זה, שפורסם ב-Biomedicine & Pharmacotherapy (2020), הציע כי סלידרוסיד, תרכובת טבעית, גורם לאוטופגיה מגנה ולמוות תאי בתאי AGS אפיתל הקיבה באמצעות ויסות מסלול האיתות PI3K/AKT/mTOR.
מחקר זה פורסם בכתב העת Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). הוא בחן את ההשפעות הסינרגטיות האנטי-סרטניות של הפוליסכריד אסטראגלוס והתרופה אפטניב בתאי AGS. ממצאי המחקר העלו כי אסטראגלוס משפר את ההשפעות האנטי-סרטניות של אפטניב באמצעות דיכוי מסלול האיתות AKT.
מחקר זה, שפורסם ב-Journal of Ethnopharmacology (2018), הציע כי Curcuzedoalide, תרכובת טבעית מצמח Curcuma zedoaria Roscoe, תורם לפוטנציאל הציטוטוקסיות שלו נגד תאי AGS.
ביטוי יתר של FOXA1 מעכב את התרבות התאים ואת EMT של תאי AGS בסרטן הקיבה האנושי
פרסום זה ב-Gene (2018) הציע כי ויסות יתר של FOXA1 מדכא את התרבות תאי אדנוקרצינומה בקיבה AGS ואת המעבר האפיתליאלי-מזנכימלי (EMT) והפלישה.
מאמר מחקרי זה פורסם ב-International Journal of Medical Microbiology בשנת 2020. במחקר זה נעשה שימוש בתאי AGS כדי לחקור את האינטראקציות בין הפתוגן למאכסן. הממצאים העלו כי Helicobacter pylori מכיל RNA לא מקודד בשקיות הממברנה החיצונית שלו, המשפיע על רמות IL-8 בתאי AGS.
6. משאבים עבור קו תאים AGS: פרוטוקולים, סרטונים ועוד
להלן מספר משאבים העוסקים בתאי AGS.
- פרוטוקול טרנספקציה של תאי AGS: סרטוןזה הוא מדריך שלב אחר שלב ללימוד פרוטוקול טרנספקציה לתאי AGS אפיתל קיבה.
הקישור הבא מכיל את פרוטוקול תרבית תאי AGS.
- פרוטוקול תרבית תאי AGS: אתרזה מכיל מידע שימושי על תרבית תאי AGS ופרוטוקולים לתרבית תאים. בקצרה, הוא מספק פרוטוקול לתרבית משנה של תאי AGS אפיתל קיבה ולטיפול בתרבויות AGS מתרבות וקפואות.
- תרבית משנה של תאי AGS: אתר זה מסביר בפירוט את הליך תרבית המשנה של תאי AGS.
מקורות
- Phuc, B.H., et al., גנומיקה השוואתית של שני זנים וייטנאמיים של Helicobacter pylori, CHC155 מחולה בסרטן קיבה שאינו קרדיאלי ו-VN1291 מחולה בכיב תריסריון. דוחות מדעיים, 2023. 13(1): עמ' 8869.
- Lin, J., et al.,miRNA‑183‑5p. 1 מקדם את הנדידה והפלישה של תאי AGS סרטן הקיבה על ידי מיקוד ב-TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. דוחות אונקולוגיה, 2019. 42(6): עמ' 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., ההשפעה של פקליטקסל על אפופטוזיס, אוטופגיה וקטסטרופה מיטוטית בתאי AGS. דוחות מדעיים, 2021. 11(1): עמ' 23490.
- Zhang, H., et al., sncRNAs packaged by Helicobacter pylori outer membrane vesicles attenuate IL-8 secretion in human cells. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.