קו תאים A375 - מדריך למחקר על מלנומה

A375 הוא קו תאים של מלנומה אנושית הנמצא בשימוש נרחב במחקר טוקסיקולוגי ואימונו-אונקולוגי. חוקרים משתמשים בקו תאים זה כדי לחקור את הביולוגיה של הסרטן ואת מסלולי האיתות, לבדוק או לסנן חומרים פוטנציאליים נגד סרטן ולפתח טיפולים חדשים ויעילים.

מקור ותכונות כלליות של תאי A375

היכרות עם מקורו ומאפייניו הכלליים של קו תאים יכולה לסייע בתכנון השימוש בו במחקר. חלק זה של המאמר יעסוק במקורו ובמאפייניו של קו התאים A375. לדוגמה, מהו קו התאים A375? מה הם מאפייני קו התאים A375? מה מקורם של תאי A375? מהו המבנה המורפולוגי של תאי מלנומה A375? מהו גודל תאי A375?

קו התאים הסרטני A375 מקורו בתרבית שתל של גידול מוצק של אישה בת 54 עם מלנומה ממאירה [1].
לתאי A375 מורפולוגיה דמוית אפיתל.
גודל התאים A375 קטן יחסית בהשוואה לקווי תאים אחרים. קוטרו של תא A375 הוא כ-12 מיקרומטר.
תאי המלנומה A375 הם היפותריפלואידים. מספר הכרומוזומים המודאלי עבור קו תאים זה הוא 62. בדרך כלל, לכל תא יש תשעה כרומוזומים סמנים ועותק אחד של כרומוזומים N2, N6 ו-N22 נורמליים.

רופא בודק גידולים בעורו של מבוגר כדי לאבחן סרטן עור.

תאי A375: מידע על תרבית תאים

תרבויות תאים A375 קלות לתחזוקה. אין להן דרישות תרבית תאים קפדניות. סעיף זה יסייע לכם ללמוד את המידע הדרוש על תרבית תאים. כגון מהו זמן הכפלה של A375. מהו מדיום קו התאים A375? מהו צפיפות הזריעה של A375? האם תאי מלנומה A375 הם תאים דבקים?

נקודות מרכזיות לגידול תאי A375

זמן הכפלת האוכלוסייה:	זמן הכפלת התאים A375 הוא 20 שעות.
דבקים או בתמיסה:	A375 הוא קו תאים מלנומה אנושי דבק.
צפיפות זריעה:	צפיפות^תאיםשל 1 x¹⁰⁴^{תאים/סמ"ר}היא אידיאלית לתרבויות תאים A375. תאים דבקים נשטפים עם תמיסת מלח פוספט (PBS) ומודגרים עם תמיסת מעבר (Accutase). לאחר מכן, התאים הוספו לתרבית והוצאו בצנטריפוגה. התאים שנאספו הושעו מחדש בתרבית והועברו לבקבוקים חדשים לצורך גידול.
מדיום גידול:	DMEM מומלץ כמצע אידיאלי ל-A375 כאשר הוא מועשר ב-10% סרום עגלי (FBS), 4.5 g/L גלוקוז, 1.5 g/L NaHCO3, 4 mM L-גלוטמין ו-1.0 mM נתרן פירובט. יש לחדש את מצע ה-A375 2-3 ימים בשבוע.
תנאי גידול:	תאי מלנומה A375 מגודלים באינקובטור לח (37°C) עם אספקת CO2 של 5%.
אחסון:	תאי A375 קפואים יש לשמור בטמפרטורה נמוכה מ-150°C בשלב האדים של חנקן נוזלי או במקפיא חשמלי.
תהליך הקפאה ומדיום:	מדיום CM-1 או CM-ACF משמשים להקפאת קו התאים A375. תהליך הקפאה איטי המאפשר ירידה הדרגתית של 1°C בטמפרטורה נבחר כדי להגן על חיוניות התאים.
תהליך ההפשרה:	בקבוקון תאי המלנומה A375 הקפואים מנוער במהירות באמבט מים במשך 40 עד 60 שניות, עד שנותר רק גוש קרח קטן. לתאים מוסיפים מדיום טרי ומסובבים בצנטריפוגה כדי להסיר את מרכיבי המדיום הקפוא. את משקע התאים שהתקבל מוסיפים שוב לתמיסה ושופכים לתוך בקבוקים חדשים.
רמת בטיחות ביולוגית:	תרבויות A375 מטופלות ומטופחות בתנאי מעבדה ברמת בטיחות ביולוגית 1.

שכבה מתיישבת של תאי A375 דבקים בהגדלה של 20x.

יתרונות ומגבלות של קו תאים A375

כמו קווי תאים אחרים, קו התאים A375 של מלנומה קשור לשילוב ייחודי של יתרונות ומגבלות, מה שהופך אותו לכלי חשוב במחקר סרטן המלנומה. בסעיף זה מפורטים רק כמה יתרונות וחסרונות משמעותיים של קו התאים A375.

יתרונות

היתרונות המשמעותיים של תאי A375 מפורטים להלן:

מודל גידול מלנומה: קו התאים A375 נגזר מגידול מלנומה ממאיר, ולכן משמש כמודל גידול יקר ערך לחקר הביולוגיה של מלנומה והתערבויות טיפוליות. תאים אלה מפגינים תכונות הדומות למלנומה, כגון קצב התפשטות גבוה ופולשנות.
תumorigenicity: תאי A375 הם בעלי יכולת גבוהה ליצירת גידולים, כלומר הם יכולים ליצור גידולים. תאי A375 מדווחים כמייצרים מלנומות אגרסיביות ללא מלנין בעכברי NIH Swiss שטופלו בסרום אנטי-תימוציט (חומר מדכא חיסון).
מאפיינים ידועים: A375 הוא קו תאים בעל מאפיינים גנטיים ידועים. הוא בעל מוטציות גנטיות ספציפיות כמו מלנומה. המוטציות ב-A375 כוללות שינוי בגן BRAF, מה שהופך אותו לרגיש למעכבים ספציפיים ל-BRAF. פרופיל גנטי זה הופך את תאי A375 לכלי מחקר מצוין לחקר מסלולים מולקולריים בסיסיים וטיפולים ממוקדים.

מגבלות

המגבלות הקשורות לתאי A375 הן:

מגבלות במבחנה: A375 הוא מודל גידול במבחנה. למרות שהוא מחקה את המאפיינים של מלנומה, הוא אינו יכול לייצג באופן מלא את המורכבות של גידולי מלנומה. לכן, יש לנהוג בזהירות כאשר ממצאים במבחנה מוכללים למחקרים קליניים.

רכשו את תאי A375 שלכם עכשיו

‏430.00 ‏€*

תוכן: 1.5 milliliter

מחירים לא כולל מיסים בתוספת עלויות משלוח

cryovial

מספר מוצר: 300110

יישומים מחקריים של קו תאים A375

קו התאים A375 משמש ליישומים מחקריים נרחבים במחקר הסרטן. להלן כמה מהתחומים הנפוצים שבהם נעשה שימוש בתאי A375.

מחקר סרטן: לתאיA375 יש יישומים נרחבים במחקר מלנומה. חוקרים השתמשו בתאים אלה כדי לחקור את הביולוגיה של סרטן העור, תהליכים ומנגנוני איתות תאיים בסיסיים, כולל התרבות תאים, נדידה וחדירה. זה עשוי גם לעזור לחוקרים לזהות מטרות טיפוליות מולקולריות חדשות. במחקר שנערך על ידי Lin Zhu ועמיתיו בשנת 2019 נעשה שימוש בתאי מלנומה A375 אגרסיביים ביותר, ונמצא תפקידו של microRNA-3662 בצמיחה ובפלישה של תאי מלנומה A375. ממצאי המחקר קובעים כי microRNA-3662 מכוון לגן ZEB1 ומווסת את צמיחת תאי המלנומה במבחנה ובחיות במודל הגידול A375 [2]. באופן דומה, מחקר שנערך בשנת 2018 מצא כי מסלולי PI3K/AKT ו-MAPK/ERK מעורבים בשגשוג ובגרורות של קו התאים A375 [3].
גילוי ובדיקת תרופות: קו התאיםA375 הוא מודל גידול שימושי במבחנה לבדיקה וסינון של חומרים פוטנציאליים נגד סרטן. חוקרים מעריכים את הרעילות והיעילות של תרופות כימותרפיות חדשות, תרכובות וטיפולים אחרים באמצעות תאי מלנומה A375 אלה. לדוגמה, מחקר בחן את התכונות האנטי-סרטניות של מיקרו-וננו-ווסקולות המופקות מאשכולית על תאי סרטן מלנומה אנושיים A375. התוצאות גילו כי מיקרו-וננו-ווסקולות גורמות לעצירת מחזור התא ואפופטוזיס ומעכבות את ביטוי הגנים בהתפשטות, נדידה וחדירה של תאים [4].

תאי A375: פרסומים

כאן מוזכרים כמה פרסומים מחקריים חשובים העוסקים בתאי A375.

ויטמין D והאנלוגים שלו בעלי רמת סידן נמוכה מווסתים את התכונות האנטי-סרטניות של ציספלטין ודקרבזין בקו תאי מלנומה אנושית A375

מחקר זה פורסם ב-Journal of Oncology בשנת 2019. המחקר הציע כי טיפול משולב בויטמין D ובאנלוגים משפר את הפעילות האנטי-סרטנית של ציספלטין ודקרבזין בתאי מלנומה A375.

הערכה במבחנה של ההשפעות האנטי-מלנומה (קו תאים A375) של תמצית הג'ל ותמצית העלים השלמים של מינים נבחרים של אלוורה

מחקר זה פורסם בכתב העת Journal of Herbal Medicine בשנת 2022. מחקר זה בחן את ההשפעות האנטי-מלנומה של ג'ל אלוורה בתאי מלנומה A375.

חבר משפחת Fermitin 2 מקדם התקדמות מלנומה על ידי שיפור הקשר של p-α-Pix ל-Rac1 כדי להפעיל את מסלול MAPK

מחקר זה, שפורסם ב-Oncogene (2021), הציע כי חבר משפחת פרמיטין 2 (FERMT2 או kindlin-2) מעודד התקדמות מלנומה באמצעות הפעלת MAPK על ידי קישור עם p-α-Pix ו-Rac1.

FARP1 מקל על התרבות תאים באמצעות ויסות מסלול האיתות MAPK במלנומה עורית

מחקר זה, שפורסם בכתב העת The American Journal of Dermatopathology (2019), הציע כי FARP1 עשוי להקל על התפתחות והתקדמות מלנומה עורית. לפיכך, הוא יכול להוות יעד טיפולי שימושי.

הפוטנציאל הציטוטוקסי והאפופטוטי של תמציות Phyllodium elegans על קווי תאים סרטניים אנושיים

מאמר מחקר זה פורסם ב-Bioengineered (2019). מחקר זה בחן את הפעילות הציטוטוקסית והאפופטוטיבית של תמצית הצמח Phyllodium elegans על קווי תאים סרטניים אנושיים, כולל A375.

משאבים עבור קו תאים A375: פרוטוקולים, סרטונים ועוד

להלן מספר משאבים מקוונים העוסקים בתאי A375.

טרנספקציה של תאי A375: מדריך וידאו זה יסייע לכם ללמוד שלב אחר שלב כיצד לבצע טרנספקציה של תאי A375.
תרבית תאים: סרטוןזה מכיל מידע שימושי מאוד בנוגע לתרבית קווי תאים.

פרוטוקולי תרבית התאים עבור תאי A375 מפורטים כאן.

שורת תאים A375: קישור זה מכיל מידע שימושי על תרבית ותחזוקה של שורת תאים A375, כולל מדיה A375 וטיפול בתרבויות A375 קפואות ומתרבות.

שאלות נפוצות (FAQ) על תאי A375

מקורות

Avram, S., et al., Standardization of A375 human melanoma models on chicken embryo chorioallantoic membrane and Balb/c nude mice. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 מכוון ל-ZEB1 ומחליש את הפלישה של קו תאי המלנומה האגרסיבי A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: עמ' 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C מעכב את התרבות תאי מלנומה A375 ואת הגרורות באמצעות דיכוי מסלולי PI3K/Akt ו-MAPK/ERK. Life sciences, 2018. 206: עמ' 35-44.
Stanly, C., et al., מיקרו-וננו-ווסקולות המופקות מאשכולית מציגות פרופילים מטבולומיים מובחנים ופעילות אנטי-סרטנית בקו תאי מלנומה אנושי A375. Cells, 2020. 9(12): עמ' 2722.