EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
El medio mínimo esencial de Eagle (EMEM) es uno de los medios basales más utilizados para el cultivo de una amplia gama de células de mamíferos, en particular de líneas celulares adherentes. Desarrollada originalmente por Harry Eagle, esta fórmula clásica contiene los aminoácidos esenciales, las vitaminas y las sales inorgánicas necesarias para favorecer el crecimiento tanto de células primarias como de líneas celulares establecidas en condiciones de cultivo estándar.
Esta formulación líquida, lista para usar y filtrada estérilmente, está suplementada con la solución salina equilibrada de Earle (EBSS), 2 mM de L-glutamina, D-glucosa (1,0 g/L) y 2,2 g/L de bicarbonato sódico (NaHCO3), lo que la hace adecuada para su uso en una atmósfera de incubadora con control de CO₂ (normalmente 5 % de CO₂). El rojo de fenol incluido actúa como indicador de pH, lo que permite un cómodo control visual del estado del medio durante el cultivo celular.
Características principales
- Fórmula clásica del MEM de Eagle con solución salina equilibrada de Earle (EBSS)
- Incluye 2 mM de L-glutamina: listo para su uso inmediato
- 2,2 g/L de bicarbonato de sodio: tamponado para incubación con un 5 % de CO₂
- Con D-glucosa (1,0 g/L) como fuente primaria de carbono
- Con rojo de fenol como indicador de pH
- Sin HEPES y sin piruvato sódico
- Medio líquido filtrado estéril, listo para usar
- pH 7,0 – 7,6
Aplicaciones típicas
El EMEM permite el cultivo de una amplia variedad de líneas celulares de mamíferos, entre ellas HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 y muchas células primarias. Entre las aplicaciones habituales se incluyen:
- Mantenimiento rutinario y expansión de líneas celulares adherentes
- Flujos de trabajo de propagación de virus y producción de vacunas
- Aplicaciones de citotoxicidad y bioensayos
- Estudios de transfección y expresión de proteínas
- Investigación básica en biología celular y biología molecular
Para un crecimiento celular óptimo, el EMEM se suele complementar con un 5-10 % de suero fetal bovino (FBS) y, dependiendo de la línea celular, con aminoácidos no esenciales (NEAA) y antibióticos como la penicilina/estreptomicina.
Manipulación y almacenamiento
Almacene el frasco sin abrir a una temperatura de entre +2 °C y +8 °C, protegido de la luz. Una vez abierto, utilícelo en condiciones asépticas. La L-glutamina en solución está sujeta a una degradación gradual; recomendamos utilizar el medio en un plazo de 4 semanas tras su apertura para obtener un rendimiento óptimo, o bien añadir L-glutamina fresca antes de su uso si se almacena durante períodos más largos. Deje que el medio se caliente hasta alcanzar los 37 °C antes de añadirlo a las células.
Calidad
Fabricado bajo estrictas normas de calidad. Cada lote se somete a pruebas de esterilidad, pH, osmolalidad y niveles de endotoxinas para garantizar un rendimiento constante en aplicaciones de cultivo celular.
Especificaciones del producto
| Especificaciones | Detalle |
|---|---|
| Tipo de producto | MEM |
| Categoría del producto | Medios de cultivo celular |
| Formato | Líquido |
| Estéril | Sí |
| Tamaño | 500 ml |
| L-glutamina | Con L-glutamina (2 mM) |
| Glucosa | Con glucosa (1,0 g/l) |
| Bicarbonato sódico | Con NaHCO3 (2,2 g/L) |
| HEPES | Sin HEPES |
| Piruvato sódico | Sin piruvato sódico |
| Rojo de fenol | Con rojo de fenol |
| Solución salina | Solución salina equilibrada de Earle (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Contenido de endotoxinas | No especificado |
| Almacenamiento | +2 °C a +8 °C |
Formulación (composición por litro)
| Componente | Concentración (mg/l) |
|---|---|
| Sales inorgánicas | |
| Cloruro de calcio · 2H₂O | 265,00 |
| Sulfato de magnesio | 97,72 |
| Cloruro de potasio | 400,00 |
| Cloruro de sodio | 6.800,00 |
| Dihidrogenofosfato de sodio, anhidro | 122,00 |
| Bicarbonato de sodio (NaHCO3) | 2.200,00 |
| Aminoácidos | |
| L-arginina · HCl | 126,00 |
| L-cistina · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamina | 292,00 |
| L-histidina · HCl · H₂O | 42,00 |
| L-isoleucina | 52,00 |
| L-leucina | 52,00 |
| L-lisina · HCl | 72,50 |
| L-metionina | 15,00 |
| L-fenilalanina | 32,00 |
| L-treonina | 48,00 |
| L-triptófano | 10,00 |
| L-tirosina · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valina | 46,00 |
| Vitaminas | |
| Pantotenato de calcio D | 1,00 |
| Cloruro de colina | 1,00 |
| Ácido fólico | 1,00 |
| Mio-inositol | 2,00 |
| Nicotinamida | 1,00 |
| Piridoxal · HCl | 1,00 |
| Riboflavina | 0,10 |
| Tiamina · HCl | 1,00 |
| Otros componentes | |
| D(+)-Glucosa | 1 000,00 |
| Rojo de fenol | 10,00 |