Células KC
Información general
| Descripción | KC (Kc167) es una línea celular embrionaria de Drosophila melanogaster derivada de un embrión femenino en la fase de cierre dorsal, registrada en Cellosaurus con el código CVCL_Z833. La línea se estableció originalmente y se ha utilizado ampliamente en biología celular de Drosophila, cribados genéticos y genómica funcional. Las células Kc167 se han inmortalizado con SV40 y crecen de forma semiadherente, formando una población mixta de células adheridas y otras que flotan libremente. Se encuentran entre las líneas celulares de Drosophila mejor caracterizadas y son totalmente aptas para el silenciamiento génico mediado por ARNi, lo que las convierte en un modelo fundamental para los cribados de ARNi a escala genómica en la biología de los invertebrados. Las células KC son aplicables en la biología celular de Drosophila, cribados de ARNi y CRISPR a escala genómica, estudios de vías de transducción de señales (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), investigación sobre la inmunidad innata y estudios comparativos de vías conservadas evolutivamente. El genoma de Drosophila, totalmente secuenciado y anotado, combinado con amplias bases de datos públicas de reactivos de ARNi (p. ej., DRSC/TRiP), hace que las células KC sean especialmente potentes para el descubrimiento genómico funcional imparcial. Se aplica la clasificación BSL-2 debido a la inmortalización con SV40. Las células KC se cultivan en medio Schneider para Drosophila suplementado con 2 mM de glutamina y un 10 % de FBS. Es fundamental señalar que las líneas celulares de Drosophila se cultivan a 25 °C en aire ambiente sin CO₂ (y no a 37 °C / 5 % de CO₂, como en el caso de las células de mamíferos). Las células se pasan mediante una resuspensión y dilución suaves (crecimiento semiadherente). El medio se renueva o las células se diluyen cada 2-3 días. |
|---|---|
| Organismo | Drosophila melanogaster (mosca de la fruta) |
| Tejido | Embrión |
| Enfermedad | Normal |
| Sitio metastásico | Embrión (fase de cierre dorsal) |
| Aplicaciones | Biología celular de Drosophila; cribados de ARNi a escala genómica; cribados CRISPR; transducción de señales (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); inmunidad innata; genómica funcional de invertebrados |
| Sinónimos | KC, K C |
Características
| Edad | Fase de cierre dorsal |
|---|---|
| Género | Mujer |
| Morfología | De tipo epitelial semiadherente |
| Tipo de célula | Células embrionarias |
| Propiedades de crecimiento | semisólido |
Datos reglamentarios
| Cita | KC (número de catálogo de Cytion 300604) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusAccesión | CVCL_Z833 |
| Situación de los OMG | GMO-S2: Esta línea celular de Drosophila contiene un casete de inmortalización SV40 integrado de forma estable. Se requiere un nivel de contención BSL-2. Esta clasificación solo es válida en Alemania y puede variar en otros países. |
Datos biomoleculares
| Susceptibilidad al virus | SV40 inmortalizado |
|---|
Manejo de
| Medio de cultivo | Medio de Schneider para Drosophila + 2 mM de glutamina + 10 % de suero fetal bovino (FBS). |
|---|---|
| Suplementos | Añade al medio 2 mM de glutamina y un 10 % de FBS |
| Reactivo de disociación | No es necesario (se adhiere parcialmente; resuspender con cuidado) |
| Tiempo de duplicación | entre 24 y 48 horas, aproximadamente |
| Subcultivo | Pipetea con cuidado el cultivo para resuspender las células semiadherentes. Transfiera un volumen adecuado a un nuevo frasco y añada medio de Schneider fresco y precalentado. Diluya hasta alcanzar una densidad de entre 5 × 10⁵ y 1 × 10⁶ células/ml. Incube a 25 °C en aire ambiente sin CO₂. |
| Ratio de división | Del 1 al 3 |
| Densidad de siembra | De 5 × 10⁵ a 1 × 10⁶ células/ml |
| Renovación de fluidos | Cada 2 ó 3 días |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido. |
| Descongelación y cultivo de células |
|
| Atmósfera de incubación | 25 °C, aire ambiente (no se necesita CO₂). |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido. |
Control de calidad y análisis molecular
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