Células CTX

DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) es un medio basal muy versátil y ampliamente utilizado, diseñado para favorecer el crecimiento de una amplia gama de células de mamífero en la investigación biológica. Es un medio ideal para el cultivo de fibroblastos primarios, neuronas, células gliales, HUVEC, células musculares lisas, así como líneas celulares populares como HeLa, 293, Cos-7 y PC-12.
Lo que diferencia al DMEM de otros medios es su composición única. Contiene una concentración de aminoácidos y vitaminas cuatro veces superior a la del Medio Esencial Mínimo original de Eagle. Desarrollado inicialmente con glucosa baja (1 g/L) y piruvato sódico, el DMEM se emplea frecuentemente con niveles de glucosa más altos, con o sin piruvato sódico. En particular, el DMEM no contiene proteínas, lípidos ni factores de crecimiento, por lo que es necesario complementarlo. Para lograr un crecimiento óptimo, un enfoque común es complementar DMEM con 10% de suero fetal bovino (FBS). Además, el DMEM emplea un sistema tampón de bicarbonato sódico, que requiere un entorno con un 5-10% de CO2 para mantener un pH fisiológico.
El Medio Eagle Modificado de Dulbecco (DMEM) está muy bien considerado entre los medios definidos para el cultivo de células y tejidos, ya que satisface las necesidades de crecimiento de diversos fenotipos celulares adherentes. Supera al Medio de Eagle original, desarrollado en la década de 1950 para el cultivo de células de pollo, mediante la formulación suplementaria mejorada conocida como modificación de Dulbecco. Esta modificación eleva significativamente el contenido de determinados aminoácidos y vitaminas hasta cuatro veces en comparación con el medio original.
En el campo del cultivo celular, el DMEM desempeña un papel vital como medio de crecimiento para diferentes tipos celulares, incluidas las células primarias, las células madre y las células transformadas. Los investigadores también emplean la versión modificada de DMEM para una amplia gama de aplicaciones de investigación, como el descubrimiento de fármacos, la ingeniería de tejidos y el estudio de las vías de señalización celular.

Control de calidad

Filtrado estéril


Almacenamiento y vida útil

Almacenar entre +2°C y +8°C, protegido de la luz.
Una vez abierto, conservar a 4°C y utilizar en un plazo de 6-8 semanas.


Condiciones de envío

Temperatura ambiente


Conservación

Mantener refrigerado a +2°C a +8°C en la oscuridad. Evitar la congelación y el calentamiento frecuente a +37°C, ya que reduce la calidad del producto.
No calentar el medio a más de 37°C ni utilizar fuentes de calor no controladas, como aparatos de microondas.
Si sólo se va a utilizar una parte del medio, retirar la cantidad necesaria y calentarla a temperatura ambiente antes de su uso.


Composición



Categoría
Componentes
Concentración (mg/L)


Aminoácidos
Glicina
30.00



L-Arginina HCl
84.00



L-Cistina 2 HCl
62.57



L-Glutamina
584.00



L-Histidina HCl H2O
42.00



L-Isoleucina
105.00



L-Leucina
105.00



L-Lisina HCl
146.00



L-metionina
30.00



L-Fenilalanina
66.00



L-Serina
42.00



L-Treonina
95.00



L-Triptófano
16.00



L-Tirosina 2 Na 2H2O
103.79



L-Valina
94.00


Vitaminas
Cloruro de colina
4.00



D-pantotenato cálcico
4.00



Ácido fólico
4.00



mio-Inositol
7.20



Nicotinamida
4.00



Piridoxal HCl
4.00



Riboflavina
0.40



Tiamina HCl
4.00


Sales inorgánicas
CaCl2 2 H2O
265.00



Fe(NO3)3 9 H2O
0.10



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
200.10



NaCl
6400.00



NaHCO3
3700.00



NaH2PO4 2H2O
141.73


Otros componentes
D-Glucosa
4500.00



Sal sódica de rojo de fenol
15.90



Piruvato sódico
110.00

Solución de desprendimiento celular Accutase con EDTA y rojo de fenol – 100 ml

Accutase es una solución de desprendimiento celular lista para usar y filtrada estérilmente, diseñada como una alternativa suave a la tripsina/EDTA para disociar células mamíferas adherentes de material plástico estándar para cultivo de tejidos y superficies recubiertas para la adhesión. Combina la actividad enzimática proteolítica y colagenolítica en una solución salina equilibrada para proporcionar una disociación eficaz pero controlada, preservando las proteínas de la superficie celular y favoreciendo una alta viabilidad tras el paso y una rápida readhesión.

La formulación de Accutase se basa en la solución salina tamponada con fosfato de Dulbecco (DPBS) con EDTA y rojo de fenol como indicador visual del pH. Las enzimas son de origen no mamífero y no bacteriano, lo que hace que Accutase sea especialmente adecuado para la investigación con células madre, los procesos de desarrollo de vacunas y cualquier aplicación en la que sea necesario minimizar los contaminantes de origen animal o microbiano. La solución se autoinhibe a 37 °C, por lo que no se requiere ningún reactivo neutralizante ni medio que contenga suero tras la desadhesión: las células pueden transferirse directamente a un medio fresco.

Características principales

Líquido 1x filtrado estéril listo para usar: no requiere dilución ni reconstitución
Actividad enzimática combinada proteolítica y colagenolítica para una disociación suave
Cada lote está estandarizado con una actividad de disociación definida para garantizar la consistencia entre lotes
Enzimas de origen no mamífero y no bacteriano
Se autoinhibe a 37 °C: no se necesita solución neutralizante
Formulado en PBS de Dulbecco con EDTA
Incluye rojo de fenol como indicador visual de pH
pH 6,8 – 7,8


Aplicaciones típicas
Accutase disocia suavemente una amplia variedad de tipos de células adherentes y sensibles, incluidas las células madre embrionarias humanas (hESC), las células madre pluripotentes inducidas humanas (iPSC), las células madre neurales, las neuronas primarias y las líneas adherentes cultivadas habitualmente, como HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 y A549. Entre los casos de uso típicos se incluyen:

Subcultivo y pases rutinarios de células mamíferas adherentes
Disociación suave de células individuales de hESC, iPSC y otras líneas sensibles
Preparación de muestras para citometría de flujo y análisis FACS
Análisis de marcadores de superficie celular en los que la integridad del epítopo es importante
Ensayos de migración, proliferación y apoptosis celular
Ensayos de quiescencia mediante privación de suero y estudios de transfección de oncogenes
Ensayos de migración de células tumorales y de la cresta neural
Ampliación de la producción en flujos de trabajo con biorreactores

Para el trabajo rutinario, aplique aproximadamente 10 ml de Accutase por cada 75 cm² de superficie de cultivo e incube durante 5-10 minutos a temperatura ambiente. El tiempo de incubación óptimo debe determinarse para cada línea celular y no debe superar una hora. Antes de la adición, enjuague la capa celular con una solución salina libre de Ca²⁺/Mg²⁺, como DPBS sin calcio ni magnesio, para eliminar el suero residual y los cationes divalentes.

Manipulación y almacenamiento
Almacene el frasco sin abrir congelado a -15 °C o menos. Descongele a temperatura ambiente o durante la noche a una temperatura de entre +2 °C y +8 °C. No descongele Accutase en un baño de agua a 37 °C, ya que las temperaturas elevadas reducen la actividad enzimática. Tras la descongelación, la solución puede almacenarse hasta 2 meses a una temperatura de entre +2 °C y +8 °C; no la almacene a temperatura ambiente. No precaliente el reactivo a 37 °C antes de su aplicación; añádalo directamente a las células lavadas a temperatura ambiente. Para una vida útil prolongada, se recomienda el fraccionamiento en alícuotas de un solo uso para evitar ciclos de descongelación repetidos. Trabaje siempre en condiciones asépticas.

Calidad
Fabricado bajo estrictas normas de calidad. Cada lote de Accutase se filtra en condiciones estériles y se somete a pruebas de esterilidad, pH, aspecto y actividad de disociación para garantizar un rendimiento constante y reproducible de un lote a otro.

Especificaciones del producto



Especificaciones
Detalle



Tipo de productoReactivo de desprendimiento/disociación celular
FormatoLíquido filtrado estéril, listo para usar
Volumen100 ml
Concentración de trabajo1x (listo para usar)
Actividad enzimáticaProteolítica y colagenolítica combinadas
Origen de la enzimaNo mamífero y no bacteriano
Sistema tampónPBS de Dulbecco con EDTA
Indicador de pHRojo de fenol
Rango de pH6,8 – 7,8
AspectoSolución transparente, de color rojo pálido a naranja
Temperatura de almacenamiento-15 °C o menos
Estabilidad tras la descongelaciónHasta 2 meses a una temperatura de entre +2 °C y +8 °C
Volumen de uso recomendado~10 ml por cada 75 cm² de superficie de cultivo
Tiempo de incubación habitual5 – 10 minutos a temperatura ambiente
Condiciones de envíoCongelado en hielo seco
Uso previstoSolo para uso en investigación y fabricación posterior



Formulación (composición por litro)



Componente
Concentración (mg/L)




Sales inorgánicas

Cloruro de sodio (NaCl)8000,00
Hidrogenofosfato disódico (Na₂HPO₄)1150,00
Cloruro de potasio (KCl)200,00
Dihidrogenofosfato de potasio (KH₂PO₄)200,00

Otros componentes

EDTA · 4Na (EDTA tetrasódico)220,00
Rojo de fenol3,00
Mezcla enzimática patentada (actividad proteolítica y colagenolítica)1x



Accutase es una marca registrada de Innovative Cell Technologies, Inc.

Descripción general del producto
Volumen: 100 ml Almacenamiento: ≤-15°C Esterilidad: Filtrado estéril
La Solución Antibiótica/Antimicótica (100x ) es un concentrado estéril, listo para usar, diseñado para reducir los riesgos de contaminación microbiana en cultivos celulares y aplicaciones de laboratorio relacionadas. Esta solución 100x contiene una combinación bien establecida de penicilina, estreptomicina y anfotericina B, que proporciona una actividad antimicrobiana de amplio espectro contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, levaduras y hongos filamentosos. La formulación es adecuada para su uso en cultivos de células eucariotas, medios bacterianos y otros sistemas sensibles a la contaminación, lo que favorece unas operaciones de laboratorio limpias y consistentes.
Aplicación y ventajas Optimizada para protocolos de investigación rutinarios, esta solución se utiliza ampliamente para mantener condiciones asépticas en flujos de trabajo de cultivos celulares. Ofrece un rendimiento fiable en entornos sensibles a la contaminación, ayudando a los investigadores a reducir el riesgo de sobrecrecimiento microbiano sin comprometer la salud celular o la reproducibilidad experimental. La formulación filtrada estéril elimina la necesidad de pasos adicionales de solubilización, lo que permite una preparación racionalizada de los medios y reduce la variabilidad en los procedimientos diarios de laboratorio.
Uso y compatibilidad Para alcanzar concentraciones de trabajo estándar, diluya la solución 1:100 en su medio de cultivo completo. El producto es compatible con una amplia gama de líneas celulares de mamíferos y medios basales. Con una disponibilidad de stock constante, los investigadores se benefician de una continuidad de suministro fiable y una planificación logística simplificada. La solución debe almacenarse a ≤ -15 °C y protegerse de ciclos repetidos de congelación-descongelación para mantener la estabilidad. Sólo para uso en investigación. No para uso en procedimientos diagnósticos o terapéuticos. No para uso en humanos o animales.