Células CHO-EGFR
1.900,00 €*
Los productos se envían congelados en hielo seco en criotubos. Cada criotubo contiene normalmente 3 × 10 6 células para líneas adherentes o 5 × 106 células para líneas en suspensión (consulte el certificado de análisis del lote para obtener más detalles).
Información general
| Descripción | Aviso legal: Los precios indicados para las líneas celulares son exclusivamente para clientes del ámbito académico o sin ánimo de lucro. Para las entidades comerciales, el precio es de aproximadamente 6.250 €. Las células CHO-EGFR son células recombinantes de ovario de hámster chino (CHO) modificadas genéticamente para expresar de forma estable el receptor del factor de crecimiento epidérmico humano (EGFR/ERBB1/HER1), un receptor tirosina quinasa perteneciente a la familia ErbB. El EGFR regula procesos celulares clave, como la proliferación, la supervivencia, la migración y la diferenciación, mediante la activación de vías de señalización posteriores, tales como MAPK/ERK, PI3K/AKT y JAK/STAT. La expresión anómala, la amplificación o la mutación del EGFR se asocian con frecuencia a múltiples tumores sólidos, entre ellos el cáncer de pulmón no microcítico, el cáncer colorrectal, el glioblastoma y el carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello. Los modelos CHO-EGFR estables proporcionan una plataforma controlada para investigar la biología del receptor y la orientación terapéutica. Las células CHO-EGFR se utilizan ampliamente en la investigación oncológica y el desarrollo de productos biológicos para la caracterización de anticuerpos monoclonales anti-EGFR, inhibidores de la tirosina quinasa, anticuerpos biespecíficos, conjugados de anticuerpos y fármacos, y terapias con células inmunitarias modificadas. Estas células permiten la evaluación cuantitativa de la unión del ligando, la activación del receptor, la internalización, el estado de fosforilación, la señalización posterior y el bloqueo terapéutico. También se emplean habitualmente en ensayos de citometría de flujo, estudios de ocupación de receptores, cribado de alto rendimiento y flujos de trabajo de pruebas de potencia. Dado que las células CHO presentan características de crecimiento robustas y una expresión endógena relativamente baja de los sistemas de receptores humanos, ofrecen un fondo reproducible para la expresión de EGFR recombinante y el desarrollo de ensayos estandarizados. |
|---|---|
| Organismo | Hámster chino |
| Tejido | Ovario |
| Enfermedad | Ovario de hámster chino, no neoplásico; modificado genéticamente para la expresión de EGFR en la superficie |
| Aplicaciones | Cribado de anticuerpos; desarrollo de terapias dirigidas contra el EGFR; ensayos de ADCC/CDC; investigación sobre el cáncer de pulmón y colorrectal; citometría de flujo |
Características
| Edad | Adultos |
|---|---|
| Género | Mujer |
| Morfología | De tipo epitelial |
| Tipo de célula | Célula epitelial del ovario |
| Propiedades de crecimiento | Adherente/suspensión |
Datos reglamentarios
| Cita | CHO-EGFR (número de catálogo de Cytion 305977) |
|---|---|
| Nivel de bioseguridad | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosaurusAccesión | CVCL_A8W3 |
| Situación de los OMG | GMO-S1: Esta línea celular CHO contiene un casete de expresión de EGFR que permite realizar análisis de la función del receptor. Esta clasificación solo es válida en Alemania y puede variar en otros países. |
Datos biomoleculares
| Antígenos de superficie | EGFR (HER1/ErbB1/CD340) |
|---|
Manejo de
| Medio de cultivo | Para cultivos adherentes: DMEM:F12 de Ham (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a) Para cultivos en suspensión: CHO Growth Medium A (de InSCREENeX; número de catálogo de InSCREENeX INS-ME-1039) |
|---|---|
| Suplementos | Para cultivos adherentes: Suplementar el medio con un 5% de FBS. Añadir Geneticina (G418-Sulfat) hasta alcanzar una concentración final de 0,5 mg/mL. |
| Reactivo de disociación | Para cultivos adherentes: Tripsina-EDTA |
| Tiempo de duplicación | aprox. 14-16 horas |
| Subcultivo | Para el cultivo rutinario de células adherentes: Aspirar el medio de cultivo antiguo de las células adherentes y lavarlas con PBS para eliminar cualquier resto de medio. Después de aspirar el PBS, añadir el volumen apropiado de solución de tripsina/EDTA en función del tamaño del recipiente de cultivo (por ejemplo, 1 ml para un matraz T25, 3 ml para un matraz T75) e incubar a temperatura ambiente o 37°C durante 5-10 minutos, o hasta que las células se desprendan. Controlar el desprendimiento al microscopio y, si es necesario, golpear suavemente el recipiente para liberar las células. Una vez desprendidas, añadir medio completo para inactivar la tripsina/EDTA, resuspender suavemente las células y transferir una alícuota de la suspensión celular a un nuevo recipiente de cultivo que contenga medio fresco. Colocar el recipiente en una incubadora a 37°C con un 5% deCO2 y cambiar el medio cada 2-3 días. |
| Ratio de división | Del 1 al 5 |
| Densidad de siembra | De 2 a 5 x 104 células/cm2 |
| Renovación de fluidos | de 2 a 3 veces por semana |
| Recuperación tras el deshielo | Tras la descongelación, dividir las células en una proporción de 1:2 a 1:3 en matraces T25 y dejar que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran (para cultivos adherentes) durante al menos 24 horas. |
| Medio de congelación | Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido. |
| Descongelación y cultivo de células |
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| Atmósfera de incubación | 37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada. |
| Condiciones de envío | Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado. |
| Condiciones de almacenamiento | Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido. |
Control de calidad / Perfil genético / HLA
| Esterilidad | La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia. Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias. |
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