Células SiHa: arrojando luz sobre la investigación del cáncer de cuello de útero

Las célulasSiHa son células de cáncer de cuello de útero ampliamente utilizadas en la investigación biomédica. Son excelentes huéspedes de transfección y, por tanto, adecuadas para estudios de expresión génica. Debido a su origen humano y a su relevancia para el cáncer de cuello de útero, estas células se emplean principalmente en estudios de biología del cáncer, virología y desarrollo de fármacos.

Características generales y origen de las células SiHa

Comprender el origen y los atributos generales de una línea celular es crucial, ya que influye en su uso dentro de su investigación. En esta sección del artículo, aprenderá sobre el origen de la línea celular SiHa, sus características distintivas y mucho más: ¿Qué es la línea celular de cáncer SiHa? ¿Qué son las células SiHa VPH? ¿Cuál es el origen de la línea celular SiHa? ¿Cuál es la morfología de SiHa?

SiHa, la línea celular de carcinoma de cuello de útero se derivó de fragmentos de una biopsia uterina primaria de una mujer asiática (55 años) con cáncer de células escamosas [1].
La línea celular SiHa muestra un cariotipo hipertriploide. La mayoría de las células tienen un número cromosómico medio de entre 69 y 72 cromosomas. Sin embargo, alrededor del 24% de las células poseen un número cromosómico modal de 71.
Las células SiHa son positivas para el virus 16 del papiloma humano. Presentan una integración de alrededor de 1 a 2 copias del genoma del VPH por célula [2].
Estas células de cáncer de cuello de útero presentan una morfología epitelial.

División de células de cáncer de cuello de útero HeLa al microscopio.

Línea celular SiHa: Información sobre el cultivo

Mantener el cultivo de una línea celular no es fácil hasta que no se conocen todos los puntos clave para su cultivo. Usted debe saber: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de SiHa? ¿Qué es el medio celular SiHa? ¿Cómo se cultiva la línea celular SiHa?

Puntos clave para el cultivo de células SiHa

Tiempo de duplicación:	El tiempo de duplicación de las células SiHa es de aproximadamente 17 horas.
Adherentes o en suspensión:	SiHa es una línea celular adherente.
Proporción de subcultivo:	La proporción de subcultivo para las células SiHa es de 1:2 a 1:4. Para el pasaje, las células adherentes se enjuagan con 1x PBS. Se añade la solución de Accutase y las células se incuban de 8 a 10 minutos a temperatura ambiente. A continuación, se añade medio de cultivo y se centrifugan las células. El sedimento celular se resuspende y las células se vierten en un nuevo matraz para el cultivo.
Medio de cultivo:	Para el crecimiento ideal de las células SiHa se utiliza el medio esencial mínimo de Eagle (EMEM) que contiene un 10% de FBS, 2 mM de L-Glutamina, 2,2 g/L de NaHCO3 y solución salina equilibrada de Earle (EBSS). El medio se sustituye de 2 a 3 veces por semana.
Condiciones de crecimiento:	Las células SiHa se mantienen en una incubadora humidificada a 37°C con un suministro del 5% de CO2.
Almacenamiento:	Los viales congelados de la línea celular de cáncer de cuello de útero SiHa se almacenan a una temperatura inferior a -150°C en un congelador eléctrico o en la fase de vapor de nitrógeno líquido para un plazo más largo.
Proceso y medio de congelación:	Para la congelación de células SiHa se utiliza el medio de congelación CM-1 o CM-ACF. Las células se congelan utilizando un método de congelación lenta que sólo permite una disminución de 1 °C por minuto para proteger la viabilidad de las células.
Proceso de descongelación:	Las células congeladas se mantienen entre 40 y 60 segundos en un baño de agua a 37 °C hasta que queda un pequeño grumo de hielo. Después, se añade medio de crecimiento fresco y se centrifugan las células para eliminar los componentes del medio de congelación. El sedimento celular se resuspende y las células se dispensan en un matraz de cultivo para su crecimiento.
Nivel de bioseguridad:	Se requiere un laboratorio de nivel de bioseguridad 1 para manipular y mantener cultivos celulares de SiHa.

Capa adherente de células SiHa a 10× y 20× aumentos.

Ventajas e inconvenientes de la línea celular SiHa

Al igual que otras líneas celulares de carcinoma humano, SiHa también posee algunas características distintivas asociadas a ciertas ventajas e inconvenientes. A continuación se exponen algunos de los más significativos.

Ventajas de la línea celular de cáncer de cuello de útero SiHa

Modelo decáncer de cuello de útero
- Derivado del carcinoma cervical de células escamosas.
- Se utiliza para estudiar los mecanismos, el crecimiento y el desarrollo del cáncer de cuello de útero.
- Expresa los genes p53+ y pRB+, relacionados con la reparación del ADN, la regulación del ciclo celular y la supresión tumoral.
Potencial tumorigénico
- Las células SiHa son tumorigénicas y pueden inducir tumores epidermoides poco diferenciados de grado III en ratones desnudos.
- Se utilizan para la investigación del cáncer in vivo y para probar tratamientos anticancerígenos.

Desventajas de las células SiHa

Tasa de proliferación
- Las células SiHa proliferan rápidamente, lo que provoca un crecimiento excesivo.
- Requieren pases frecuentes, lo que aumenta el riesgo de inestabilidad genética, que puede afectar al comportamiento celular a lo largo del tiempo.

Aplicaciones de las células SiHa en la investigación

La línea celular SiHa se utiliza ampliamente en la investigación del cáncer de cuello de útero. A continuación se exponen algunas aplicaciones específicas de esta línea celular.

Estudios relacionados con el virus del papiloma humano (VPH): Las células SiHa son positivas al VPH 16, por lo que son entidades valiosas para estudiar la infección por el virus del papiloma humano, sus mecanismos moleculares y su papel en el desarrollo y la progresión del cáncer de cuello de útero. Los investigadores también emplean estas células para investigar la replicación viral, la integración y su impacto en los procesos de la célula huésped. En un estudio realizado en 2020 se utilizó la línea celular SiHa para examinar el papel de las oncoproteínas E6/E7 del VPH en el desarrollo del cáncer de cuello de útero, dirigiéndose a ella con la tecnología CRISPR. Los resultados revelaron que el knockdown de los genes E6/E7 provocaba la inhibición del crecimiento y la apoptosis de las células SiHa. Por lo tanto, estos genes virales pueden servir como dianas farmacológicas cruciales para el desarrollo de terapias contra el cáncer de cuello de útero asociado al VPH [3].
Biología del cáncer: Las células SiHa son un modelo inestimable para estudiar la biología del cáncer de cuello de útero, incluyendo su desarrollo, progresión, metástasis e invasión. Los investigadores utilizan estas células para explorar las mutaciones genéticas y las vías moleculares subyacentes que contribuyen al desarrollo y crecimiento del cáncer de cuello de útero, como en un estudio en el que se utilizaron células SiHa y se descubrió que la regulación al alza de SEC61G (SEC61 subunidad translocon gamma) fomenta la proliferación de células de cáncer de cuello de útero a través de la activación de la cascada MAPK [4].
Detección y ensayo de fármacos: SiHa es una línea de cáncer de cuello de útero ampliamente utilizada para evaluar la eficacia de posibles fármacos anticancerígenos específicos para el cáncer de cuello de útero asociado al VPH. Los investigadores exploran el potencial antiproliferativo, apoptótico y antimetastásico de los fármacos utilizando estas células. Por ejemplo, en un estudio realizado en 2019 se investigó el potencial citotóxico de los extractos frutales de tipo SS de Vatica diospyroides Symington en la línea celular de cáncer de cuello uterino SiHa [5].

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Publicaciones de investigación con células SiHa

Algunas publicaciones de investigación significativas y citadas con frecuencia tienen como protagonista a la línea celular de carcinoma escamoso de cuello de útero SiHa.

El efecto antitumoral de la aloe-emodina en células de cáncer de cuello uterino se asoció con el virus del papiloma humano E6/E7 y el metabolismo de la glucosa

Esta publicación en OncoTargets and Therapy (2019) propuso que un compuesto natural aloe-emodina ejerce efectos apoptóticos asociados al VPH E6/E7 y al metabolismo de la glucosa en células de cáncer de cuello uterino SiHa.

Evaluación del potencial anticancerígeno del extracto de hoja de Excoecaria agallocha (L.) en la línea celular de cáncer de cuello uterino humano (SiHa) y evaluación del mecanismo de acción subyacente

Este artículo se publicó en la revista Future Journal of Pharmaceutical Sciences en 2022. Este estudio investigó las actividades antitumorales del extracto de hojas de la planta Excoecaria agallocha (L.) en la línea celular de cáncer de cuello de útero SiHa.

Efecto antiproliferativo de la 1, 10-fenantrolina acoplada a nanopartículas de ZnO sulfatado en la línea celular de cáncer de cuello de útero SiHa

Este estudio publicado en el Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) propuso que la molécula 1, 10-Fenantrolina al acoplarse con nanopartículas de sulfato de zinc, ejerce efectos antiproliferativos significativos en células SiHa.

El astragalósido IV inhibe la invasión y la metástasis de las células de cáncer de cuello de útero SiHa a través de las vías PI3K y MAPK mediadas por TGF-β1

Esta investigación se publicó en la revista Oncology Reports en 2019. El estudio reveló que el astragalósido IV, un producto natural, suprime la migración y la invasión de las células SiHa mediante la modulación de las vías de señalización PI3K y MAPK mediadas por TGF-β1.

IFI16 promueve la progresión del cáncer de cuello de útero mediante la regulación de PD-L1 en el inmunomicroambiente a través de la vía STING-TBK1-NF-kB

Este estudio publicado en Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) reveló que IFI16 (interferon-gamma inducible protein 16) regula el gen PD-L1 a través de la activación de la vía STING-TBK1-NF-kB para favorecer el crecimiento de las células de cáncer de cuello de útero SiHa.

Recursos para la línea celular SiHa: Protocolos, vídeos y más

He aquí algunos recursos en línea sobre las células SiHa.

Transfección de células SiHa: Este artículo de investigación contiene un protocolo para el mantenimiento de células SiHa de cáncer de cuello de útero y para la transfección de células SiHa.

El siguiente enlace contiene información sobre el cultivo de células SiHa.

Línea celular SiHa: Este sitio web contiene muchos datos valiosos sobre la línea celular SiHa. Incluye información sobre medios de crecimiento, condiciones de cultivo, protocolos de subcultivo de células SiHa y manipulación de sus cultivos proliferativos y crioconservados.

Preguntas frecuentes sobre las células de carcinoma cervical SiHa

Referencias

Melzer, C., J. von der Ohe, y R. Hass, Revisión concisa: la diafonía del estroma mesenquimal/células similares al tallo con células cancerosas proporciona potencial terapéutico. Células madre, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Investigación de la influencia del virus del papiloma humano de alto riesgo en la composición bioquímica de las células de cáncer de cuello uterino mediante espectroscopia vibracional. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro and in vivo growth inhibition of human cervical cancer cells via human papillomavirus E6/E7 mRNAs' cleavage by CRISPR/Cas13a system. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G promotes cervical cancer proliferation by activating MAPK signaling pathway. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Potencial anticancerígeno de extractos frutales de Vatica diospyroides symington tipo SS y su efecto sobre la muerte celular programada de líneas celulares de cáncer de cuello uterino. Revista del mundo científico, 2019. 2019.