Células RBL-2H3 - Importancia de RBL-2H3 en la respuesta alérgica y los estudios inmunológicos
La línea celular RBL-2H3 es una línea celular de leucemia basófila derivada de rata que se utiliza en la investigación inmunológica. Sirve como sistema modelo para estudiar la fisiología, el comportamiento y las funciones de los mastocitos. Estas células también se emplean para estudiar reacciones alérgicas, procesos inmunológicos y pruebas y desarrollo de fármacos.
Este artículo ofrece información sobre el origen, las características generales, los requisitos de cultivo y las aplicaciones de investigación de las células RBL-2H3.
Células RBL-2H3: Origen y características generales
Antes de utilizar una línea celular de basófilos en su investigación, debe conocer su origen y sus atributos generales. Esta sección del artículo le informará sobre los aspectos básicos de las células RBL-2H3. Por ejemplo, ¿Qué son los mastocitos RBL-2H3? ¿Por qué utilizar células RBL-2H3? ¿Qué son las células RBL-2H3 en la leucemia basófila de rata? ¿Cuál es la morfología RBL-2H3? ¿Son inmortales las células RBL-2H3?
- Las RBL-2H3 son células de leucemia basófila derivadas de células basófilas de rata Wistar en 1978 en el Laboratorio de Inmunología del Instituto Nacional de Investigación Dental.
- Las células RBL-2H3 poseen receptores de tirosina quinasa c-kit y receptores de mastocito proteasa II (RMCP-II), lo que las convierte en un modelo potencial de mastocito. Por ello, se denominan comúnmente mastocitos a pesar de su origen a partir de basófilos de rata [1].
- Liberan histamina y otros mediadores tras su activación y expresan receptores IgE de alta afinidad.
- Las células RBL-2H3 presentan una morfología similar a la de los fibroblastos.
Células RBL-2H3: Información sobre el cultivo
Esta sección le ayudará a conocer algunos aspectos clave para el cultivo de la línea celular RBL-2H3. Usted sabrá: ¿Cuál es el tiempo de duplicación de las células RBL-2H3? ¿Cuál es la densidad de siembra de células RBL-2H3? ¿Cuál es el protocolo de cultivo de células RBL-2H3? ¿Qué es el medio de congelación de la línea celular RBL-2H3?
Puntos clave para el cultivo de células RBL-2H3
|
Tiempo de duplicación de la población: |
El tiempo de duplicación de la población de mastocitos RBL-2H3 es de aproximadamente 50-60 horas. |
|
Adherente o en suspensión: |
La RBL-2H3 es una línea celular adherente. |
|
Proporción de subcultivo: |
Para las células RBL-2H3, la proporción de división se mantiene entre 1:2 y 1:4. Las células adherentes se lavan con solución 1 x PBS libre de magnesio y calcio. Se añade la solución de pasaje Accutase y se mantienen las células a temperatura ambiente durante 10 minutos para que se despeguen del fondo del recipiente de cultivo. Se añade medio fresco y se centrifugan las células. Las células recolectadas se resuspenden cuidadosamente en medio fresco y se vierten en nuevos matraces que contienen medio de crecimiento. |
|
Medio de cultivo: |
Para cultivar las células RBL-2H3 se utiliza un medio EMEM que contiene un 10% de FBS, 2 mM de L-Glutamina, 2,2 g/L de NaHCO3 y sal EBSS. El medio debe cambiarse de 2 a 3 veces por semana. |
|
Condiciones de crecimiento: |
Las células RBL-2H3 se cultivan en una incubadora humidificada a 37 °C de temperatura y conectada a una fuente deCO2 al 5%. |
|
Almacenamiento: |
Las células se almacenan en la fase de vapor de nitrógeno líquido o a una temperatura inferior a -150 °C en un congelador eléctrico para proteger la viabilidad de las células a largo plazo. |
|
Proceso y medio de congelación: |
El medio de congelación CM-1 o CM-ACF se utiliza para congelar las células RBL-2H3 mediante un proceso de congelación lento. En pocas palabras, este método permite una disminución de la temperatura de 1 °C por minuto y protege a las células del choque. |
|
Proceso de descongelación: |
Las células RBL-2H3 se descongelan en un baño de agua preajustado (37 °C) durante aproximadamente 60 segundos. Después, las células se añaden a medio de cultivo fresco y se centrifugan. Este paso es esencial para eliminar los componentes del medio de congelación. A continuación, el sedimento celular se resuspende en un medio de crecimiento y las células se dispensan en un matraz para su cultivo. |
|
Nivel de bioseguridad: |
Las células RBL-2H3 deben mantenerse en laboratorios de bioseguridad 1. |
Ventajas y limitaciones de la línea celular de basófilos RBL-2H3
Las células RBL-2H3 se utilizan habitualmente en la investigación inmunológica. En esta sección se describen sus principales ventajas y limitaciones.
Ventajas
- Facilidad de cultivo: Las células RBL-2H3 pueden cultivarse y mantenerse fácilmente en el entorno del laboratorio. Esto facilita la experimentación rentable y reproducible, lo que las convierte en una elección popular para los estudios iniciales en inmunología.
Limitaciones
- Origen no humano: Al proceder de basófilos de rata, es posible que las células RBL-2H3 no imiten con exactitud los procesos biológicos humanos, lo que puede limitar su aplicabilidad en estudios de investigación específicos en humanos. Esto requiere una interpretación cautelosa de los datos al extrapolar los resultados a sistemas humanos.
- Modelo simplificado de mastocitos: Aunque estas células proporcionan un modelo básico para estudiar las funciones de los mastocitos, no representan completamente la compleja naturaleza de las interacciones de los mastocitos dentro del sistema inmunitario humano. En consecuencia, es posible que no modelen adecuadamente las funciones polifacéticas de los mastocitos en las respuestas inmunitarias o las enfermedades in vivo.
Línea celular RBL-2H3: Una piedra angular en la investigación inmunológica
Investigación de basófilos y mastocitos con la línea celular RBL-2H3
La línea celular RBL-2H3, derivada del Rattus norvegicus, es un modelo clave para estudiar la biología de los basófilos y los mastocitos. Estos mastocitos de rata proporcionan información esencial sobre la liberación de mediadores por parte de los mastocitos, algo fundamental para comprender las afecciones alérgicas como la rinitis alérgica. A través de estas células, los investigadores exploran la dinámica de los receptores celulares y el establecimiento de sinapsis inmunológicas, que son fundamentales para la respuesta del sistema inmunitario a los alérgenos.Un interesante estudio publicado en 2019 utilizó la línea celular RBL-2H3 e investigó los mecanismos que subyacen a las reacciones pseudoalérgicas producidas por la inyección de Qingkailing. El estudio descubrió que la cascada de señalización PI3K-RAC1 provoca parcialmente esta respuesta alérgica en las células [2]
Dinámica de las sinapsis inmunológicas en la investigación de la alergia
Las células RBL-2H3, muy utilizadas en la investigación inmunológica, son especialmente eficaces para investigar la dinámica de las sinapsis inmunológicas. Esto ayuda a dilucidar los procesos de comunicación del sistema inmunitario, con aplicaciones en el estudio de mastocitos tanto de sangre periférica como peritoneales. Este tipo de investigación es vital para una comprensión global de la respuesta inmunitaria tanto en contextos sistémicos como localizados
Cribado de fármacos y pruebas de toxicidad
En el cribado y ensayo de fármacos, se aprovecha la capacidad de respuesta de las células RBL a diversos estímulos, incluido el estudio de cómo el H2O2 inhibe las respuestas mediadas por IgE. Estas células desempeñan un papel esencial en el desarrollo de tratamientos para enfermedades como las infecciones estreptocócicas, en las que los estreptococos del grupo mitis inhiben la activación de los mastocitos. Además, los investigadores evalúan los efectos tóxicos de diversas sustancias, como productos químicos, fármacos y nanopartículas, utilizando este modelo RBL 2H3 mc. Por ejemplo, un estudio reciente (2022) evaluó la citotoxicidad de los microplásticos de poliestireno en las células RBL-2H3. Encontraron que los microplásticos dañan los orgánulos de las células RBL-2H3 y promueven la muerte celular [3]. Otro estudio de 2021 evaluó el potencial antialérgico y antiinflamatorio de un producto natural, la neferina, utilizando el modelo RBL 2H3 mc. El estudio reveló las buenas propiedades antialérgicas y antiinflamatorias del compuesto [4]
Metodologías avanzadas de medición inmunológica
La liberación consistente y medible de mediadores de las células RBL-2H3 las hace ideales para una fluorimetría conveniente, facilitando mediciones precisas y exactas cruciales para el estudio de enfermedades y la evaluación de agentes terapéuticos.
La línea celular RBL-2H3, con sus orígenes en el Rattus norvegicus, es un activo inestimable en la investigación fundamental y aplicada dentro del campo de la inmunología. Ofrece profundas oportunidades para avanzar en nuestro conocimiento y tratamiento de las enfermedades inmunológicas
Línea celular RBL-2H3 para investigación inmunológica avanzada
Células RBL-2H3: Publicaciones de investigación
Las siguientes son algunas interesantes publicaciones de investigación sobre los mastocitos RBL-2H3:
Actividad inhibidora de la narirutina sobre la degranulación de las células RBL-2H3
Este trabajo de investigación se publicó en la revista Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). El estudio propuso que la narirutina, un compuesto natural, ejerce efectos inhibidores sobre la degranulación de las células RBL 2H3 a través de la regulación de NF-κB, MAPK y la vía de señalización de la tirosina quinasa.
Esta investigación publicada en el International Journal of Molecular Sciences (2020) propuso que el compuesto de apigenina suprime de forma significativa las respuestas alérgicas e inflamatorias de las células RBL-2H3 y RAW264.7. Por lo tanto, puede servir como agente potencial para combatir enfermedades relacionadas con el sistema inmunitario.
Este trabajo de investigación publicado en el International Journal of Molecular Sciences (2021) evaluó los efectos antialérgicos y antiinflamatorios de un producto natural, la saponarina, utilizando diferentes líneas celulares, incluida la RBL-2H3.
Este estudio de Medicina Complementaria y Alternativa Basada en la Evidencia (2014) encontró que los extractos de Benchalokawichian y algunos constituyentes activos ejercen potenciales efectos inhibitorios sobre la liberación de ß-hexosaminidasa de RBL 2H3.
Este trabajo se publicó en 2018 en la revista International Journal of Biological Macromolecules. El estudio afirmaba que la espirulina máxima, un producto natural, inhibe la degranulación de RBL 2H3 mediante la prevención de la fosforilación de MAPKs y AKT.
Recursos para la línea celular RBL-2H3: Protocolos, vídeos y más
RBL-2H3 es una línea de mastocitos ampliamente utilizada. Aquí se mencionan los recursos disponibles que cubren los protocolos de cultivo y transfección de RBL-2H3:
- Modelo de MC RBL 2H3: Este artículo de investigación incluye protocolos para el mantenimiento de cultivos de RBL-2H3 y para la transfección de RBL-2H3.
He aquí algunos recursos que explican el protocolo de cultivo de células RBL-2H3:
- Células RBL-2H3: Este sitio web le resultará útil para conocer los protocolos de cultivo celular de la línea celular RBL-2H3. Además, contiene información sobre los medios y las condiciones de cultivo de las células RBL-2H3.
Línea celular RBL-2H3: Preguntas frecuentes esenciales para los investigadores
Referencias
- Passante, E. y N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., et al., Reacción pseudoalérgica causada por la inyección de Qingkailing parcialmente a través de la vía de señalización PI3K-Rac1 en células RBL-2H3. Investigación en toxicología, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Los micro (nano) plásticos de poliestireno dañan los orgánulos de las células RBL-2H3 y promueven MOAP-1 para inducir la apoptosis. Revista de Materiales Peligrosos, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Anti-allergic and anti-inflammatory effects of neferine on RBL-2H3 cells. Revista Internacional de Ciencias Moleculares, 2021. 22(20): p. 10994.