Κύτταρα SiHa – Ρίχνοντας φως στην έρευνα για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας
Τα κύτταρα SiHa είναι κύτταρα καρκίνου του τραχήλου της μήτρας που χρησιμοποιούνται ευρέως στη βιοϊατρική έρευνα. Αποτελούν εξαιρετικούς ξενιστές για τη μεταφορά γονιδιακού υλικού και, ως εκ τούτου, είναι κατάλληλα για μελέτες γονιδιακής έκφρασης. Λόγω της ανθρώπινης προέλευσής τους και της συνάφειάς τους με τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας, τα κύτταρα αυτά χρησιμοποιούνται κυρίως σε μελέτες βιολογίας του καρκίνου, ιολογίας και ανάπτυξης φαρμάκων.
- Μέσο ανάπτυξης
- Για την ιδανική ανάπτυξη των κυττάρων SiHa χρησιμοποιείται το ελάχιστο απαραίτητο μέσο Eagle (EMEM) που περιέχει 10% FBS, 2 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3 και το ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα Earle (EBSS). Το μέσο αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
- Χρόνος διπλασιασμού
- Ο χρόνος διπλασιασμού για τα κύτταρα SiHa είναι περίπου 17 ώρες.
- Τύπος ανάπτυξης
- Τα SiHa αποτελούν προσκολλητική κυτταρική σειρά.
- Επίπεδο βιοασφάλειας
- BSL-1
- Διατίθεται από
- Cytion — Παραγγελία SiHa
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση των κυττάρων SiHa
Η κατανόηση της προέλευσης και των γενικών χαρακτηριστικών μιας κυτταρικής σειράς είναι ζωτικής σημασίας, καθώς επηρεάζει τη χρήση της στην έρευνά σας. Σε αυτή την ενότητα του άρθρου, θα μάθετε για την προέλευση της κυτταρικής σειράς SiHa, τα διακριτικά χαρακτηριστικά της και πολλά άλλα: Τι είναι η καρκινική κυτταρική σειρά SiHa; Τι είναι τα κύτταρα SiHa HPV; Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς SiHa; Ποια είναι η μορφολογία της SiHa;
- Η SiHa, η κυτταρική σειρά καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας, προήλθε από θραύσματα πρωτογενούς βιοψίας της μήτρας μιας Ασιάτισσας (55 ετών) με καρκίνο πλακωδών κυττάρων [1].
- Η κυτταρική σειρά SiHa παρουσιάζει υπερτριπλοειδή καρυότυπο. Τα περισσότερα κύτταρα έχουν μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων μεταξύ 69 και 72. Ωστόσο, περίπου το 24% των κυττάρων έχει μέσο αριθμό χρωμοσωμάτων 71.
- Τα κύτταρα SiHa είναι θετικά στον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων τύπου 16. Παρουσιάζουν ενσωμάτωση περίπου 1 έως 2 αντιγράφων του γονιδιώματος του HPV ανά κύτταρο [2].
- Αυτά τα κύτταρα καρκίνου του τραχήλου της μήτρας παρουσιάζουν επιθηλιακή μορφολογία.
Κυτταρική σειρά SiHa: Πληροφορίες για την καλλιέργεια
Η διατήρηση μιας καλλιέργειας κυτταρικής σειράς δεν είναι εύκολη υπόθεση, έως ότου γνωρίσετε όλα τα βασικά σημεία για την καλλιέργειά της. Πρέπει να γνωρίζετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων SiHa; Ποιο είναι το μέσο καλλιέργειας των κυττάρων SiHa; Πώς καλλιεργείται η κυτταρική σειρά SiHa;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια των κυττάρων SiHa
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού των κυττάρων SiHa είναι περίπου 17 ώρες.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:
Η SiHa είναι μια προσκολλητική κυτταρική σειρά.
Αναλογία υποκαλλιέργειας:
Ο λόγος υποκαλλιέργειας για τα κύτταρα SiHa είναι 1:2 έως 1:4. Για τη μεταφύτευση, τα προσκολλημένα κύτταρα ξεπλένονται με 1x PBS. Προστίθεται διάλυμα Accutase και τα κύτταρα επωάζονται για 8 έως 10 λεπτά σε θερμοκρασία περιβάλλοντος. Στη συνέχεια, προστίθεται καλλιεργητικό μέσο και τα κύτταρα φυγοκεντρώνονται. Το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέα φιάλη για καλλιέργεια.
Μέσο ανάπτυξης:
Για την ιδανική ανάπτυξη των κυττάρων SiHa χρησιμοποιείται το ελάχιστο απαραίτητο μέσο του Eagle (EMEM) που περιέχει 10% FBS, 2 mM L-γλουταμίνη, 2,2 g/L NaHCO3 και το ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα του Earle (EBSS). Το μέσο καλλιέργειας αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Τα κύτταρα SiHa διατηρούνται σε υγρανθέντα επωαστήρα στους 37°C με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Τα φιαλίδια της κατεψυγμένης κυτταρικής σειράς SiHa για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας αποθηκεύονται σε θερμοκρασία κάτω των -150°C σε ηλεκτρικό καταψύκτη ή, για μακροπρόθεσμη αποθήκευση, στην ατμοσφαιρική φάση υγρού αζώτου.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Για την κατάψυξη των κυττάρων SiHa χρησιμοποιείται το μέσο κατάψυξης CM-1 ή CM-ACF. Τα κύτταρα καταψύχονται με τη μέθοδο της αργής κατάψυξης, η οποία επιτρέπει μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 °C ανά λεπτό, προκειμένου να προστατευθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα διατηρούνται για 40 έως 60 δευτερόλεπτα σε υδατόλουτρο στους 37°C έως ότου απομείνει ένας μικρός σβώλος πάγου. Στη συνέχεια, προστίθεται φρέσκο μέσο ανάπτυξης και τα κύτταρα φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το ίζημα των κυττάρων επαναδιαλύεται και τα κύτταρα μεταφέρονται σε φιάλη καλλιέργειας για ανάπτυξη.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Για τον χειρισμό και τη συντήρηση των κυτταρικών καλλιεργειών SiHa απαιτείται εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1.
Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα της κυτταρικής σειράς SiHa
Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές ανθρώπινου καρκινώματος, η SiHa διαθέτει επίσης ορισμένα διακριτά χαρακτηριστικά που συνδέονται με συγκεκριμένα πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα. Εδώ, έχουμε συζητήσει μερικά σημαντικά από αυτά.
Πλεονεκτήματα της κυτταρικής σειράς SiHa για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας
- Μοντέλο καρκίνου του τραχήλου της μήτρας
- Προέρχεται από πλακώδες καρκίνωμα του τραχήλου της μήτρας.
- Χρησιμοποιείται για τη μελέτη των μηχανισμών, της ανάπτυξης και της εξέλιξης του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας.
- Εκφράζει τα γονίδια p53+ και pRB+, τα οποία σχετίζονται με την επιδιόρθωση του DNA, τη ρύθμιση του κυτταρικού κύκλου και την καταστολή των όγκων.
- Ογκογόνος δυναμικότητα
- Τα κύτταρα SiHa είναι ογκογόνα και μπορούν να προκαλέσουν κακώς διαφοροποιημένους επιδερμοειδείς όγκους βαθμού III σε γυμνά ποντίκια.
- Χρησιμοποιούνται για έρευνα του καρκίνου in vivo και για τη δοκιμή αντικαρκινικών θεραπειών.
Μειονεκτήματα των κυττάρων SiHa
- Ρυθμός πολλαπλασιασμού
- Τα κύτταρα SiHa πολλαπλασιάζονται γρήγορα, οδηγώντας σε υπερβολική ανάπτυξη.
- Απαιτούν συχνές μεταμοσχεύσεις, γεγονός που αυξάνει τον κίνδυνο γενετικής αστάθειας, η οποία μπορεί να επηρεάσει τη συμπεριφορά των κυττάρων με την πάροδο του χρόνου.
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων SiHa
Η κυτταρική σειρά SiHa χρησιμοποιείται ευρέως στην έρευνα για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας. Εδώ εξετάζονται μερικές συγκεκριμένες εφαρμογές αυτής της κυτταρικής σειράς.
- Μελέτες σχετικές με τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων (HPV): Τα κύτταρα SiHa είναι θετικά στον HPV 16 και, ως εκ τούτου, αποτελούν πολύτιμα μοντέλα για τη μελέτη της λοίμωξης από τον ιό των ανθρώπινων θηλωμάτων, των μοριακών μηχανισμών της και του ρόλου της στην ανάπτυξη και την εξέλιξη του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν επίσης αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν την αναπαραγωγή και την ενσωμάτωση του ιού, καθώς και την επίδρασή του στις διεργασίες των κυττάρων-ξενιστών. Σε μια μελέτη που διεξήχθη το 2020 χρησιμοποιήθηκε η κυτταρική σειρά SiHa για να εξεταστεί ο ρόλος των ογκοπρωτεϊνών E6/E7 του HPV στην ανάπτυξη του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας, στοχεύοντάς τις με την τεχνολογία CRISPR. Τα ευρήματα αποκάλυψαν ότι η καταστολή των γονιδίων E6/E7 προκάλεσε αναστολή της ανάπτυξης των κυττάρων SiHa και απόπτωση. Επομένως, αυτά τα ιικά γονίδια ενδέχεται να αποτελέσουν κρίσιμους φαρμακευτικούς στόχους για την ανάπτυξη θεραπειών κατά του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας που σχετίζεται με τον HPV [3].
- Βιολογία του καρκίνου: Τα κύτταρα SiHa αποτελούν ένα ανεκτίμητο μοντέλο για τη μελέτη της βιολογίας του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας, συμπεριλαμβανομένης της ανάπτυξης, της εξέλιξης, της μετάστασης και της διήθησης του καρκίνου. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να διερευνήσουν τις γενετικές μεταλλάξεις και τις υποκείμενες μοριακές οδούς που συμβάλλουν στην ανάπτυξη και την εξάπλωση του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας· για παράδειγμα, σε μια μελέτη που χρησιμοποίησε κύτταρα SiHa διαπιστώθηκε ότι η αυξημένη έκφραση του SEC61G (υπομονάδα γάμμα του μεταφορέα SEC61) ενθαρρύνει τον πολλαπλασιασμό των καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας μέσω της ενεργοποίησης της κασκάδας MAPK [4].
- Διαλογή και δοκιμή φαρμάκων: Η SiHa είναι μια ευρέως χρησιμοποιούμενη κυτταρική σειρά καρκίνου του τραχήλου της μήτρας για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας πιθανών αντικαρκινικών φαρμάκων ειδικά για τον καρκίνο του τραχήλου της μήτρας που σχετίζεται με τον HPV. Οι ερευνητές διερευνούν το αντιπολλαπλασιαστικό, αποπτωτικό και αντιμεταστατικό δυναμικό των φαρμάκων χρησιμοποιώντας αυτά τα κύτταρα. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη το 2019 διερεύνησε το κυτταροτοξικό δυναμικό εκχυλισμάτων καρπών του Vatica diospyroides Symington Type SS στη γραμμή καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας SiHa [5].
Κύτταρα SiHa για την έρευνά σας!
Ερευνητικές δημοσιεύσεις στις οποίες παρουσιάζονται τα κύτταρα SiHa
Ορισμένες σημαντικές και συχνά αναφερόμενες ερευνητικές δημοσιεύσεις αφορούν τη σειρά κυττάρων SiHa του πλακώδους καρκινώματος του τραχήλου της μήτρας.
Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό OncoTargets and Therapy (2019) πρότεινε ότι η φυσική ένωση αλόη-εμοδίνη ασκεί αποπτωτικές επιδράσεις που σχετίζονται με τον ιό HPV E6/E7 και τον μεταβολισμό της γλυκόζης στα κύτταρα καρκίνου του τραχήλου της μήτρας SiHa.
Το άρθρο αυτό δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Future Journal of Pharmaceutical Sciences» το 2022. Η μελέτη αυτή διερεύνησε τις αντικαρκινικές δράσεις του εκχυλίσματος φύλλων του φυτού Excoecaria agallocha (L.) στη κυτταρική σειρά καρκίνου του τραχήλου της μήτρας SiHa.
Η μελέτη αυτή, που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Journal of Sol-Gel Science and Technology» (2022), πρότεινε ότι το μόριο 1,10-φαινανθρολίνης, όταν συζεύγεται με νανοσωματίδια θειικού ψευδαργύρου, ασκεί σημαντική αντιπολλαπλασιαστική δράση στα κύτταρα SiHa.
Η έρευνα αυτή δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Oncology Reports το 2019. Η μελέτη αποκάλυψε ότι η αστραγαλοσίδη IV, ένα φυσικό προϊόν, καταστέλλει τη μετανάστευση και την εισβολή των κυττάρων SiHa ρυθμίζοντας τις οδούς σηματοδότησης PI3K και MAPK που μεσολαβούνται από το TGF‑β1.
Αυτή η μελέτη που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό «Biomedicine & Pharmacotherapy» (2020) αποκάλυψε ότι η IFI16 (πρωτεΐνη 16 που επάγεται από την ιντερφερόνη-γάμμα) ρυθμίζει το γονίδιο PD-L1 μέσω της ενεργοποίησης της οδού STING-TBK1-NF-kB, προωθώντας έτσι την ανάπτυξη των καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας SiHa.
Πηγές για τη σειρά κυττάρων SiHa: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν ορισμένοι διαδικτυακοί πόροι που αφορούν τα κύτταρα SiHa.
- Μεταφορά γονιδίου στα κύτταρα SiHa: Αυτό το ερευνητικό άρθρο περιέχει ένα πρωτόκολλο για τη διατήρηση των κυττάρων SiHa του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας και για τη μεταφορά γονιδίου στα κύτταρα SiHa.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια των κυττάρων SiHa.
- Κυτταρική σειρά SiHa: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει πολλά πολύτιμα δεδομένα σχετικά με την κυτταρική σειρά SiHa. Αυτά περιλαμβάνουν πληροφορίες σχετικά με τα μέσα ανάπτυξης, τις συνθήκες καλλιέργειας, τα πρωτόκολλα για την υποκαλλιέργεια των κυττάρων SiHa και τον χειρισμό των πολλαπλασιαστικών και κρυοσυντηρημένων καλλιεργειών τους.
Συχνές ερωτήσεις για τα κύτταρα καρκινώματος του τραχήλου της μήτρας SiHa
Βιβλιογραφία
- Melzer, C., J. von der Ohe και R. Hass, Συνοπτική ανασκόπηση: η αλληλεπίδραση των μεσεγχυματικών στρωματικών/βλαστοειδών κυττάρων με τα καρκινικά κύτταρα προσφέρει θεραπευτικές δυνατότητες. Stem cells, 2018. 36(7): σ. 951-968.
- Ostrowska, K.M., et al., Διερεύνηση της επίδρασης του ιού των ανθρώπινων θηλωμάτων υψηλού κινδύνου στη βιοχημική σύνθεση των καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας με τη χρήση φασματοσκοπίας δόνησης. Analyst, 2010. 135(12): σ. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., Αναστολή της ανάπτυξης ανθρώπινων καρκινικών κυττάρων του τραχήλου της μήτρας in vitro και in vivo μέσω της διάσπασης των mRNA των πρωτεϊνών E6/E7 του ιού των ανθρώπινων θηλωμάτων με το σύστημα CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: σ. 104794.
- Fan, Y., et al., Το SEC61G προάγει τον πολλαπλασιασμό του καρκίνου του τραχήλου της μήτρας ενεργοποιώντας την οδό σηματοδότησης MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Αντικαρκινικό δυναμικό εκχυλισμάτων φρούτων από το Vatica diospyroides τύπου Symington SS και η επίδρασή τους στον προγραμματισμένο κυτταρικό θάνατο κυτταρικών σειρών καρκίνου του τραχήλου της μήτρας. The Scientific World Journal, 2019. 2019.