Κύτταρα MM.1S-Luc

Παρουσιάζουμε το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's), μια εξειδικευμένη τροποποίηση του μέσου Ham's F-12 που έχει σχεδιαστεί για να ανταποκρίνεται στις μοναδικές απαιτήσεις της βιολογικής έρευνας. Αυτό το προηγμένο μέσο προσφέρει ξεχωριστά πλεονεκτήματα, ενισχύοντας την καλλιέργεια πρωτογενών ανθρώπινων ηπατοκυττάρων, καθώς και ηπατικών κυττάρων αρουραίου και κοτόπουλου, ιδιαίτερα σε συνθήκες μειωμένου ορού.

Το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) Medium είναι προσεκτικά διαμορφωμένο για τη βελτιστοποίηση των συνθηκών καλλιέργειας κυττάρων. Διαθέτει εμπλουτισμένη σύνθεση, παρέχοντας αυξημένα επίπεδα βασικών συστατικών, όπως αμινοξέα και πυρουβικό νάτριο, καθώς και πρόσθετα στοιχεία, όπως πουτρεσκίνη, θυμιδίνη, υποξανθίνη και ψευδάργυρο. Αυτές οι προσθήκες επιτρέπουν στους ερευνητές να συμπληρώνουν το μέσο με ελάχιστο ορό ή καθορισμένα συστατικά για συγκεκριμένους κυτταρικούς τύπους, διευκολύνοντας ακριβείς πειραματικές συνθήκες.

Ειδικότερα, το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) δεν περιέχει πρωτεΐνες ή αυξητικούς παράγοντες. Κατά συνέπεια, η συμπλήρωση με αυξητικούς παράγοντες και ορό εμβρύου βοοειδών (FBS) είναι συχνά απαραίτητη, επιτρέποντας στους ερευνητές να προσαρμόσουν το μέσο στις απαιτήσεις των συγκεκριμένων κυτταρικών σειρών τους. Για βέλτιστη απόδοση, η συγκέντρωση του FBS πρέπει να βελτιστοποιείται προσεκτικά για κάθε κυτταρική σειρά, εξασφαλίζοντας τη βέλτιστη ανάπτυξη και λειτουργικότητα.

Για τη διατήρηση του φυσιολογικού pH, το μέσο Ham's F-12K (Kaighn's) χρησιμοποιεί ρυθμιστικό σύστημα διττανθρακικού νατρίου (2,5 g/L), καθιστώντας απαραίτητο ένα ελεγχόμενο περιβάλλον 5-10% CO2 κατά τη διάρκεια της καλλιέργειας. Αυτό διασφαλίζει ότι το pH του μέσου παραμένει εντός του ιδανικού εύρους για την ανάπτυξη και τη βιωσιμότητα των κυττάρων
Ποιοτικός έλεγχος

pH = 7,2 +/
- 0,02 στους 20-25°C.
Κάθε παρτίδα έχει ελεγχθεί για στειρότητα και απουσία μυκοπλάσματος και βακτηρίων.

Συντήρηση

Διατηρείται στο ψυγείο στους +2°C έως +8°C στο σκοτάδι. Η κατάψυξη καθώς και η θέρμανση έως τους +37°C ελαχιστοποιούν την ποιότητα του προϊόντος.
Μην θερμαίνετε το μέσο σε θερμοκρασία άνω των 37°C και μη χρησιμοποιείτε ανεξέλεγκτες πηγές θερμότητας (π.χ. συσκευές μικροκυμάτων).
Εάν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί μόνο ένα μέρος του μέσου, αφαιρέστε αυτή την ποσότητα από τη φιάλη και ζεστάνετε τη σε θερμοκρασία δωματίου.
Η διάρκεια ζωής οποιουδήποτε μέσου εκτός από το βασικό μέσο είναι 8 εβδομάδες από την ημερομηνία παρασκευής.

Σύνθεση




Συστατικά
mg/L


Ανόργανα άλατα
Χλωριούχο ασβέστιο x 2H2O
135,24



Θειικός χαλκός(ΙΙ) x 5H2O
0,00



Θειικός σίδηρος (ΙΙ) x 7H2O
0,83



Χλωριούχο μαγνήσιο x 6H2O
105,72



Θειικό μαγνήσιο x 7H2O
394,49



Χλωριούχο κάλιο
283,29



Φωσφορικό διυδρογόνο κάλιο
58,52



Χλωριούχο νάτριο
7597,20



φωσφορικό δινατριούχο νάτριοάνυδρο
115,02



Θειικός ψευδάργυρος x 7H2O
0,14


Άλλα συστατικά
D(+)-γλυκόζη άνυδρη
1260,00



Υποξανθίνη
4,08



DL-α-λιποϊκό οξύ
0,21



Κόκκινη φαινόλη
3,00



Πουτρεσκίνη x 2HCl
0,32



Πυρουβικό νάτριο
220,00



NaHCO3
2500,00



Θυµιδίνη
0,73


Αμινοξέα
L-αλανίνη
17,82



L-αργινίνη x HCl
421,40



L-ασπαραγίνη x H2O
30,02



L-ασπαρτικό οξύ
26,62



L-κυστεΐνη x HCl x H2O
70,24



L-Γλουταμίνη
292,20



L-γλουταμινικό οξύ
29,42



Γλυκίνη
15,01



L-ιστιδίνη x HCl x H2O
41,92



L-ισολευκίνη
7,87



L-λευκίνη
26,24



L-Λυσίνη x HCl
73,04



L-μεθειονίνη
8,95



L-φαινυλαλανίνη
9,91



L-προλίνη
69,06



L-Σερίνη
21,02



L-θρεονίνη
23,82



L-Τρυπτοφάνη
4,08



L-τυροσίνη
10,87



L-Βαλίνη
23,42


Βιταμίνες
D(+)-Βιοτίνη
0,07



D-παντοθενικό ασβέστιο
0,48



Χλωριούχο χολίνη
13,96



Φολικό οξύ
1,32



μυο-ινοσιτόλη
18,02



Νικοτιναμίδιο
0,04



Πυριδοξίνη x HCl
0,06



Ριβοφλαβίνη
0,04



Θειαμίνη x HCl
0,34



Βιταμίνη Β12
1,36

Διάλυμα αποκόλλησης κυττάρων Accutase με EDTA και φαινόλη κόκκινη – 100 ml

Το Accutase είναι ένα έτοιμο προς χρήση, αποστειρωμένο και φιλτραρισμένο διάλυμα αποκόλλησης κυττάρων, σχεδιασμένο ως μια ήπια εναλλακτική λύση της τρυψίνης/EDTA για τη διάσπαση προσκολλημένων κυττάρων θηλαστικών από τυπικά πλαστικά σκεύη καλλιέργειας ιστών και επιφάνειες με επίστρωση προσκόλλησης. Συνδυάζει πρωτεολυτική και κολλαγενολυτική ενζυμική δράση σε ένα ισορροπημένο αλατούχο διάλυμα για να προσφέρει αποτελεσματική αλλά ελεγχόμενη διάσπαση, διατηρώντας τις πρωτεΐνες της κυτταρικής επιφάνειας και υποστηρίζοντας υψηλή βιωσιμότητα μετά τη μεταμόσχευση και ταχεία επαναπροσκόλληση.

Η σύνθεση του Accutase βασίζεται στο φωσφορικό ρυθμιστικό διάλυμα Dulbecco (DPBS) με EDTA και φαινόλη κόκκινη ως οπτικό δείκτη pH. Τα ένζυμα είναι μη θηλαστικής και μη βακτηριακής προέλευσης, καθιστώντας το Accutase ιδιαίτερα κατάλληλο για την έρευνα με βλαστικά κύτταρα, τις ροές εργασίας εμβολίων και οποιαδήποτε εφαρμογή όπου πρέπει να ελαχιστοποιηθούν οι μολυσματικές ουσίες ζωικής ή μικροβιακής προέλευσης. Το διάλυμα αυτοαναστέλλεται στους 37 °C, οπότε δεν απαιτείται αντιδραστήριο εξουδετέρωσης ή μέσο που περιέχει ορό μετά την αποκόλληση – τα κύτταρα μπορούν να μεταφερθούν απευθείας σε φρέσκο μέσο.

Βασικά χαρακτηριστικά

Έτοιμο προς χρήση 1x υγρό με αποστειρωμένο φιλτράρισμα – δεν απαιτείται αραίωση ή ανασύσταση
Συνδυασμένη πρωτεολυτική και κολλαγενολυτική ενζυμική δραστηριότητα για ήπια αποκόλληση
Κάθε παρτίδα τυποποιείται σε καθορισμένη δραστικότητα αποκόλλησης για συνέπεια μεταξύ των παρτίδων
Ενζυμική προέλευση μη θηλαστικών και μη βακτηριακή
Αυτοαναστέλλεται στους 37 °C – δεν απαιτείται ουδέτερο διάλυμα
Συντεθειμένο σε PBS Dulbecco με EDTA
Περιλαμβάνεται φαινόλη κόκκινη ως οπτικός δείκτης pH
pH 6,8 – 7,8


Τυπικές εφαρμογές
Το Accutase διαχωρίζει απαλά μια ευρεία ποικιλία προσκολλημένων και ευαίσθητων τύπων κυττάρων, συμπεριλαμβανομένων των ανθρώπινων εμβρυϊκών βλαστικών κυττάρων (hESCs), των ανθρώπινων επαγωγικών πολυδύναμων βλαστικών κυττάρων (iPSCs), των νευρικών βλαστικών κυττάρων, των πρωτογενών νευρώνων και των συνήθως καλλιεργούμενων προσκολλημένων σειρών όπως HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 και A549. Τυπικές περιπτώσεις χρήσης περιλαμβάνουν:

Συνηθισμένη υποκαλλιέργεια και μεταμόσχευση προσκολλημένων κυττάρων θηλαστικών
Απαλή αποσύνδεση μεμονωμένων κυττάρων από hESCs, iPSCs και άλλες ευαίσθητες σειρές
Προετοιμασία δειγμάτων για κυτταρομετρία ροής και ανάλυση FACS
Ανάλυση δεικτών κυτταρικής επιφάνειας όπου η ακεραιότητα του επιτόπου έχει σημασία
Δοκιμές κυτταρικής μετανάστευσης, πολλαπλασιασμού και απόπτωσης
Δοκιμές ηρεμίας μέσω στέρησης ορού και μελέτες μεταμόλυνσης ογκογονιδίων
Δοκιμές μετανάστευσης καρκινικών κυττάρων και κυττάρων νευρικής ακρολοφίας
Αύξηση της παραγωγής σε ροές εργασίας βιοαντιδραστήρων

Για συνήθη εργασίες, εφαρμόστε περίπου 10 ml Accutase ανά 75 cm2 επιφάνειας καλλιέργειας και επωάστε για 5–10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου. Ο βέλτιστος χρόνος επώασης πρέπει να προσδιορίζεται για κάθε κυτταρική σειρά και δεν πρέπει να υπερβαίνει τη μία ώρα. Πριν από την προσθήκη, ξεπλύνετε το στρώμα κυττάρων με διάλυμα αλάτων χωρίς Ca2+/Mg2+, όπως DPBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο, για να απομακρύνετε υπολείμματα ορού και δισθενή κατιόντα.

Χειρισμός και αποθήκευση
Αποθηκεύστε το κλειστό φιαλίδιο κατεψυγμένο στους -15 °C ή χαμηλότερα. Ξεπαγώστε είτε σε θερμοκρασία δωματίου είτε κατά τη διάρκεια της νύχτας στους +2 °C έως +8 °C. Μην ξεπαγώνετε το Accutase σε υδατόλουτρο στους 37 °C, καθώς οι αυξημένες θερμοκρασίες μειώνουν την ενζυμική δραστηριότητα. Μετά την απόψυξη, το διάλυμα μπορεί να αποθηκευτεί για έως και 2 μήνες στους +2 °C έως +8 °C. Μην το αποθηκεύετε σε θερμοκρασία δωματίου. Μην προθερμαίνετε το αντιδραστήριο στους 37 °C πριν από την εφαρμογή – προσθέστε το απευθείας στα πλυμένα κύτταρα σε θερμοκρασία δωματίου. Για μακροχρόνια διάρκεια ζωής, συνιστάται η διαίρεση σε μερίδες μίας χρήσης, ώστε να αποφεύγονται οι επαναλαμβανόμενοι κύκλοι απόψυξης. Εργάζεστε πάντα υπό ασηπτικές συνθήκες.

Ποιότητα
Παρασκευάζεται σύμφωνα με αυστηρά πρότυπα ποιότητας. Κάθε παρτίδα Accutase υποβάλλεται σε αποστειρωτική διήθηση και ελέγχεται ως προς την αποστείρωση, το pH, την εμφάνιση και τη δραστικότητα διάσπασης, ώστε να διασφαλίζεται σταθερή και αναπαραγώγιμη απόδοση από παρτίδα σε παρτίδα.

Προδιαγραφές προϊόντος



Προδιαγραφές
Λεπτομέρεια



Τύπος προϊόντοςΑντιδραστήριο αποκόλλησης/διαχωρισμού κυττάρων
ΜορφήΣτεγνό-φιλτραρισμένο υγρό, έτοιμο προς χρήση
Όγκος100 ml
Συγκέντρωση εργασίας1x (έτοιμο προς χρήση)
Ενζυμική δραστικότηταΣυνδυασμένη πρωτεολυτική και κολλαγενολυτική
Προέλευση ενζύμουΜη θηλαστικό και μη βακτηριακό
Σύστημα ρυθμιστικού διαλύματοςPBS Dulbecco με EDTA
Δείκτης pHΦαινόλη κόκκινη
Εύρος pH6,8 – 7,8
ΕμφάνισηΔιαυγές διάλυμα, χρώματος από ανοιχτό κόκκινο έως πορτοκαλί
Θερμοκρασία αποθήκευσης-15 °C ή χαμηλότερη
Σταθερότητα μετά την απόψυξηΈως 2 μήνες στους +2 °C έως +8 °C
Συνιστώμενος όγκος χρήσης~10 ml ανά 75 cm2 επιφάνειας καλλιέργειας
Τυπικός χρόνος επώασης5 – 10 λεπτά σε θερμοκρασία δωματίου
Συνθήκες αποστολήςΚατεψυγμένο σε ξηρό πάγο
Προβλεπόμενη χρήσηΜόνο για ερευνητική χρήση και περαιτέρω παραγωγή



Σύνθεση (Σύνθεση ανά λίτρο)



Συστατικό
Συγκέντρωση (mg/L)




Ανόργανα άλατα

Χλωριούχο νάτριο (NaCl)8000,00
Υδρογενικό φωσφορικό νάτριο (Na2HPO4)1150,00
Χλωριούχο κάλιο (KCl)200,00
Διυδροφωσφορικό κάλιο (KH2PO4)200,00

Άλλα συστατικά

EDTA · 4Na (τετρανατριούχο EDTA)220,00
Φαινόλη κόκκινη3,00
Ιδιόκτητο μείγμα ενζύμων (πρωτεολυτική και κολλαγενολυτική δράση)1x



Το Accutase είναι σήμα κατατεθέν της Innovative Cell Technologies, Inc.

Το Freeze Medium CM-1 της Cytion είναι ένα υπερσύγχρονο μέσο κρυοσυντήρησης που έχει σχεδιαστεί για να εξασφαλίζει το υψηλότερο επίπεδο βιωσιμότητας και λειτουργικότητας των κυττάρων μετά την απόψυξη. Αυτό το ευέλικτο μέσο είναι κατάλληλο για ένα ευρύ φάσμα κυτταρικών τύπων, συμπεριλαμβανομένων τόσο ανθρώπινων όσο και ζωικών κυττάρων, καθιστώντας το απαραίτητο εργαλείο για ποικίλες ερευνητικές εφαρμογές. Διαμορφωμένο με έναν σχολαστικά ισορροπημένο συνδυασμό κρυοπροστατευτικών ουσιών και βασικών θρεπτικών συστατικών, το Freeze Medium CM-1 ελαχιστοποιεί τον σχηματισμό παγοκρυστάλλων και το κυτταρικό στρες κατά τη διαδικασία κατάψυξης, διατηρώντας έτσι την κυτταρική ακεραιότητα.
Τα βασικά χαρακτηριστικά του Freeze Medium CM-1 περιλαμβάνουν:

Ευρεία συμβατότητα: Αποτελεσματικό για ένα ευρύ φάσμα κυτταρικών τύπων, συμπεριλαμβανομένων πρωτογενών κυττάρων, βλαστικών κυττάρων και καθιερωμένων κυτταρικών σειρών.
Υψηλή βιωσιμότητα: Βελτιστοποιημένο για τη μεγιστοποίηση της ανάκτησης και της βιωσιμότητας των κυττάρων μετά την απόψυξη, εξασφαλίζοντας αξιόπιστα πειραματικά αποτελέσματα.
Έτοιμο προς χρήση: Παρασκευάζεται και αποστειρώνεται βολικά για άμεση εφαρμογή, μειώνοντας τον χρόνο προετοιμασίας και τον κίνδυνο μόλυνσης.
Ενισχυμένη σταθερότητα: Διατηρεί σταθερή απόδοση υπό τυπικές συνθήκες κρυοσυντήρησης, εξασφαλίζοντας αναπαραγώγιμα αποτελέσματα.
Μεγάλη διάρκεια ζωής: Το CM-1 είναι ένα μέσο κρυοσυντήρησης που περιέχει ορό, έτοιμο προς χρήση, το οποίο μπορεί να αποθηκευτεί στο ψυγείο για έως και ένα έτος.


Χρήση του CM-1 για την κατάψυξη κυττάρων

Για να χρησιμοποιήσετε το CM-1 για την κατάψυξη τόσο προσκολλημένων όσο και εναιωρημάτων κυττάρων, ακολουθήστε τα παρακάτω βήματα

Για προσκολλημένα κύτταρα, πλύνετε και διαχωρίστε τα από το υπόστρωμα καλλιέργειας. Για κύτταρα εναιωρήματος, προχωρήστε απευθείας στο επόμενο βήμα.
Μετρήστε τα κύτταρα για να βεβαιωθείτε ότι βρίσκονται στην κατάλληλη συγκέντρωση.
Φυγοκεντρήστε τα κύτταρα για να τα σφαιροποιήσετε και, στη συνέχεια, ανασυσσωματώστε τα σε μέσο κατάψυξης CM-1.
Μεταφέρετε τα επαναιωρούμενα κύτταρα σε κρυοφιαλίδια.
Χρησιμοποιήστε μια μέθοδο αργής κατάψυξης πριν από τη μεταφορά των κυττάρων σε μακροχρόνια αποθήκευση





Μέθοδος
Περιγραφή
Βήματα





❄️
Χειροκίνητη κατάψυξη

Μέθοδος βήμα προς βήμα που περιλαμβάνει σταδιακή μείωση της θερμοκρασίας για τη διασφάλιση της βιωσιμότητας των κυττάρων

1️⃣ Τοποθετήστε τα κύτταρα σε μέσο κατάψυξης σε καταψύκτη 4°C για 40 λεπτά.
2️⃣ Μεταφέρετε τα κύτταρα σε καταψύκτη -80°C για 24 ώρες.
3️⃣ Αποθηκεύστε τα κύτταρα σε υγρό άζωτο για μακροχρόνια διατήρηση



❄️
Χρήση του Mr. Frosty

Μια βολική συσκευή που επιτρέπει ελεγχόμενους ρυθμούς κατάψυξης χωρίς ηλεκτρικό ρεύμα

1️⃣ Προετοιμάστε τα κύτταρα σε κρυοφιαλίδια με μέσο κατάψυξης.
2️⃣ Τοποθετήστε τα κρυοφιαλίδια στο δοχείο Mr. Frosty.
3️⃣ Αποθηκεύστε στους -80°C για 24 ώρες πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο



❄️
Καταψύκτης ελεγχόμενης ταχύτητας

Καταψύκτης υψηλής ακρίβειας της Thermo Fisher ή άλλων κατασκευαστών σχεδιασμένος για ελεγχόμενη μείωση της θερμοκρασίας

1️⃣ Προγραμματίστε τη συσκευή για σταδιακή μείωση της θερμοκρασίας.
2️⃣ Τοποθετήστε τα προετοιμασμένα κύτταρα στον καταψύκτη.
3️⃣ Μετά τον κύκλο κατάψυξης, μεταφέρετε τα κύτταρα σε υγρό άζωτο









Αποθηκεύστε τα κρυοφιαλίδια σε θερμοκρασίες κάτω των -130°C ή σε υγρό άζωτο για μακροχρόνια συντήρηση.


Συστατικά

Περιέχει FBS, DMSO, γλυκόζη, άλατα
Ρυθμιστική ικανότητα: pH = 7,2 έως 7,6


Το Freeze Medium CM-1 της Cytion προσφέρει μια αξιόπιστη λύση για την κρυοσυντήρηση, εξασφαλίζοντας υψηλή βιωσιμότητα και λειτουργικότητα των κυττάρων μετά την απόψυξη για ένα ευρύ φάσμα ερευνητικών εφαρμογών.

Επισκόπηση προϊόντος
Όγκος: 100 ml Αποθήκευση: ≤-15°C Αποστειρότητα:
Το Αντιβιοτικό/Αντιμυκητιασικό διάλυμα (100x) είναι ένα αποστειρωμένο, έτοιμο προς χρήση συμπύκνωμα που έχει σχεδιαστεί για τη μείωση των κινδύνων μικροβιακής μόλυνσης σε κυτταροκαλλιέργειες και συναφείς εργαστηριακές εφαρμογές. Αυτό το διάλυμα 100x περιέχει έναν καθιερωμένο συνδυασμό πενικιλλίνης, στρεπτομυκίνης και αμφοτερικίνης Β
- παρέχοντας αντιμικροβιακή δράση ευρέος φάσματος έναντι θετικών κατά Gram και αρνητικών κατά Gram βακτηρίων, ζυμομυκήτων και νηματοειδών μυκήτων. Το σκεύασμα είναι κατάλληλο για χρήση σε καλλιέργειες ευκαρυωτικών κυττάρων, βακτηριακά μέσα και άλλα ευαίσθητα στη μόλυνση συστήματα, υποστηρίζοντας καθαρές και συνεπείς εργαστηριακές λειτουργίες.
Εφαρμογή και οφέλη Βελτιστοποιημένο για ερευνητικά πρωτόκολλα ρουτίνας, αυτό το διάλυμα χρησιμοποιείται ευρέως για τη διατήρηση ασηπτικών συνθηκών σε ροές εργασίας κυτταροκαλλιέργειας. Προσφέρει αξιόπιστη απόδοση σε περιβάλλοντα ευαίσθητα στη μόλυνση, βοηθώντας τους ερευνητές να μειώσουν τον κίνδυνο υπερανάπτυξης μικροβίων χωρίς να διακυβεύεται η υγεία των κυττάρων ή η πειραματική αναπαραγωγιμότητα. Η αποστειρωμένη φιλτραρισμένη σύνθεση εξαλείφει την ανάγκη για πρόσθετα στάδια διαλυτοποίησης, υποστηρίζοντας την απλοποιημένη προετοιμασία των μέσων και μειώνοντας τη μεταβλητότητα στις καθημερινές εργαστηριακές διαδικασίες.
Χρήση και συμβατότητα Για να επιτύχετε πρότυπες συγκεντρώσεις εργασίας, αραιώστε το διάλυμα 1:100 στο πλήρες μέσο καλλιέργειάς σας. Το προϊόν είναι συμβατό με ένα ευρύ φάσμα κυτταρικών σειρών θηλαστικών και βασικών μέσων. Με σταθερή διαθεσιμότητα αποθεμάτων, οι ερευνητές επωφελούνται από την αξιόπιστη συνέχεια του εφοδιασμού και τον απλουστευμένο προγραμματισμό της εφοδιαστικής. Το διάλυμα πρέπει να αποθηκεύεται στους ≤ -15 °C και να προστατεύεται από επαναλαμβανόμενους κύκλους ψύξης-απόψυξης για να διατηρείται η σταθερότητα. Μόνο για ερευνητική χρήση. Όχι για χρήση σε διαγνωστικές ή θεραπευτικές διαδικασίες. Όχι για χρήση σε ανθρώπους ή ζώα.