Κύτταρα CTX

Η CTX (γνωστή και ως CTX0E03) είναι μια υπό όρους αθανατοποιημένη σειρά ανθρώπινων νευρικών βλαστικών κυττάρων που προέρχεται από το φλοιώδες νευροεπιθήλιο ανθρώπινου εμβρύου του πρώτου τριμήνου. Η σειρά δημιουργήθηκε μέσω ρετροϊκής ενσωμάτωσης ενός μεταγονιδίου σύντηξης c-mycER^TAM, το οποίο προκαλεί κυτταρική πολλαπλασιασμό μόνο παρουσία 4-υδροξυταμοξιφαίνης (4-OHT). Ελλείψει 4-OHT και σε μέσο χωρίς μιτογόνα, τα κύτταρα CTX0E03 υφίστανται διακοπή της ανάπτυξης και διαφοροποιούνται σε νευρώνες και αστροκύτταρα, διατηρώντας την πολυδύναμη ικανότητα διαφοροποίησης. Η σειρά είναι κλωνική, έχει φυσιολογικό ανθρώπινο καρυότυπο (46,XY) και αναπτύχθηκε υπό συνθήκες συμβατές με τις οδηγίες GMP για πιθανή κλινική εφαρμογή.

Η σειρά CTX0E03 έχει αξιολογηθεί σε προκλινικά μοντέλα ισχαιμικού εγκεφαλικού επεισοδίου (μοντέλο αρουραίου MCAo), όπου τα εμφυτευμένα κύτταρα προώθησαν σημαντική ανάκαμψη της αισθητικοκινητικής λειτουργίας. Η σειρά έχει εισέλθει σε κλινικές δοκιμές για τη θεραπεία του εγκεφαλικού επεισοδίου. Χρησιμοποιείται επίσης ως in vitro μοντέλο για τη βιολογία των νευρικών βλαστικών κυττάρων, τη διαφοροποίηση των φλοιωδών νευρώνων, την έρευνα για τη νόσο του Αλτσχάιμερ (μελέτες τοξικότητας Abeta) και τη νευροφαρμακολογική διαλογή. Το σύστημα υπό όρους αθανατοποίησης καθιστά το CTX0E03 ιδιαίτερα κατάλληλο για μελέτες ασφάλειας και αποτελεσματικότητας, καθώς ο πολλαπλασιασμός μπορεί να απενεργοποιηθεί με την αφαίρεση της 4-OHT πριν από τη μεταμόσχευση.

Το CTX0E03 πολλαπλασιάζεται σε DMEM/F12 εμπλουτισμένο με συμπλήρωμα N2, EGF (20 ng/ml) και FGF-2 (20 ng/ml) με 4-OHT (1 μM) σε επιφάνειες επικαλυμμένες με λαμινίνη στους 37°C σε 5% CO₂. Για τη διαφοροποίηση, οι αυξητικοί παράγοντες και το 4-OHT αποσύρονται. Η σειρά κατατάσσεται στο επίπεδο βιοασφάλειας 1 (GMO-S1 στη Γερμανία λόγω του ενσωματωμένου μεταγονιδίου c-mycERTAM). Οι χρήστες πρέπει να συμμορφώνονται με τους ισχύοντες κανονισμούς για τους ΓΤΟ στη δικαιοδοσία τους.