SK-N-LO 细胞
一般信息
| 说明 | SK-N-LO 细胞系是一种人类神经母细胞瘤细胞系,用于研究神经母细胞瘤以及细胞凋亡机制和癌症信号通路。它也被归类为原始神经外胚层肿瘤(PNET)细胞系,携带尤文肉瘤家族肿瘤(ESFT)中常见的 EWS-FLI1 融合基因。这种融合基因来自染色体易位,在这些肿瘤细胞的致癌行为中起着关键作用。 SK-N-LO 细胞对某些针对致癌信号通路的抑制剂特别敏感。例如,GLI 抑制剂 GANT61 已被证明能诱导 SK-N-LO 细胞发生不依赖于 Caspase 的凋亡。GANT61 会破坏刺猬(Hh)信号通路中 GLI1 和 GLI2- 介导的转录,而这对该细胞系的细胞存活和增殖至关重要。经 GANT61 处理后,SK-N-LO 细胞表现出与凋亡相关的形态学变化,如染色质凝聚和核破碎。此外,GANT61 还会降低对细胞周期进展和存活非常重要的 GLI2 和 survivin 等蛋白质的表达,同时增加细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 p21 的表达。 此外,SK-N-LO 细胞也被用来研究阿片受体信号转导。这些细胞经改造后可表达μ-阿片受体,是研究阿片诱导的镇痛与细胞内信号通路之间相互作用的宝贵模型。例如,研究表明吗啡可通过PI3Kγ途径刺激SK-N-LO细胞中的Akt磷酸化,而这一过程可由cAMP信号调节。这凸显了SK-N-LO细胞在探索癌症生物学和神经药理学方面的多功能性。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 大脑 |
| 疾病 | 原始神经外胚层肿瘤 |
| 转移部位 | 骨髓 |
| 同义词 | SK-N-L0、SKN-LO、SKNLO |
特点
| 年龄 | 10 年 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 种族 | 高加索人 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 粘附在涂有胶原蛋白的烧瓶中 |
监管数据
| 引用 | SK-N-LO(Cytion 目录号 300400) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_4569 |
生物分子数据
| 核型 | 表型频率乘积: 0.00005 |
|---|
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 3至4×10⁴个细胞/平方厘米 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1(Cytion 目录号 800100),其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,以促进恢复并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 为了在解冻后获得最佳附着力和存活率,我们建议使用涂有胶原蛋白的烧瓶或平板。 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '24:02:01, '29:02:01
B*: '18:01:01, '58:01:01
C*: '05:01:01, '07:18:01
DRB1*: '03:01:01, '08:04:01
DQA1*: '04:01:02, '05:01:01
DQB1*: '02:01:01, '04:02:01
DPB1*: '02:01:02, '13:01:01
E: '01:01, '01:03
|
材料转让协议
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