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巨噬细胞和免疫学研究中的 RAW 264.7 细胞系

RAW 264.7 细胞系是小鼠巨噬细胞的强大体外模型,是免疫学研究领域的基础。这些细胞来源于雄性 BALB/c 小鼠,经阿贝尔森鼠白血病病毒转化后形成了巨噬细胞样细胞系。RAW 264.7 细胞具有功能稳定性和固有的吞噬和针刺能力,是研究宿主与病原体相互作用的重要细胞,是免疫学研究的基石[1,2]。

形态特征和生长行为

经检查,RAW 264.7 细胞呈半粘附生长,既可形成纺锤形粘附细胞,也可形成球形漂浮的有活力细胞,细胞直径在 10 到 20 µm 之间。这种多态性和培养条件的适应性使 RAW 264.7 细胞成为实验操作和观察的多功能工具。

免疫功能和抗原呈递

作为抗原递呈细胞,RAW 264.7 细胞在免疫系统中发挥着关键作用。它们的功能不仅限于简单的病原体识别,还包括处理抗原并将抗原呈递给 T 细胞,从而协调全面的免疫反应。这种动态变化有助于深入了解免疫系统如何识别和中和外来实体。

巨噬细胞分化:M0、M1 和 M2 范式

RAW 264.7 细胞在作为 M0 巨噬细胞的基础状态下,具有极化为 M1 促炎或 M2 抗炎表型的非凡能力。这种极化能力为研究人员提供了一个研究各种细胞因子和环境因素对巨噬细胞功能和免疫反应的影响和作用的模型 [3,4]。

破骨细胞生成和骨重塑

虽然 RAW 264.7 细胞本身不是破骨细胞,但它们在研究破骨细胞生成--破骨细胞形成过程--方面发挥了重要作用。这些细胞有助于研究破骨细胞基因的表达及其对受体激活的反应。这项研究对了解骨质疏松症等病症的病理生理学具有深远的意义,骨质疏松症的特点是骨重塑失调。

RAW 264.7 细胞培养信息

在开始实验之前,您必须了解有关这种强大细胞系的一些基本信息。您知道 RAW 264.7 细胞的倍增时间吗?这些细胞的播种密度是多少?此外,RAW 264.7 的最佳生长条件是什么?请继续阅读,了解使用这种神奇细胞系所需的全部答案!

细胞培养信息

RAW 264.7 细胞系

倍增时间

11 至 30 小时

粘附或悬浮

大部分粘附,部分悬浮细胞群

接种密度

4 x 10^4 个细胞/平方厘米

推荐生长培养基

RPMI 1640,补充 10% 胎牛血清和 L-谷氨酰胺(2.5 mM)

最佳生长条件

5% CO2 加湿培养箱,温度 37°C

更换培养基

每周 2 到 3 次

储存

液氮气相

冷冻培养基

CM-1 或 CM-ACF

冷冻过程

缓慢冷冻

解冻过程

在 37°C 水浴中快速搅拌

生物安全等级

建议使用 BSL-2 实验室

不同融合度的小鼠 RAW 264.7 巨噬细胞。

RAW 264.7 细胞的优缺点

优点

  • 易于培养:RAW 264.7 细胞系易于在实验室中培养和维护,没有任何复杂的要求。
  • 特性良好:RAW 264.7 是一种特性良好的细胞系,这意味着它具有稳定的表型和功能特征。
  • 体外巨噬细胞模型:由于 RAW 264.7 细胞是巨噬细胞,它们具有类似巨噬细胞的基本功能,如吞噬和针吞。因此,它们经常被用作巨噬细胞的体外模型。
  • 分化为破骨细胞:RAW 264.7 细胞可通过特定分子因子分化为破骨细胞。这些分化细胞能够进行骨重塑,与破骨细胞类似。

缺点

  • 原始巨噬细胞代表性差:作为一种转化细胞系,RAW 264.7 可能无法准确代表原代巨噬细胞的特征,在基因表达、表型和功能方面可能存在一些差异。
  • 药物筛选的局限性:RAW 264.7 细胞可能不适合所有类型的药物筛选试验,它们对某些药物的反应可能与原代巨噬细胞不同。
  • 细胞粘附性强:RAW 264.7 细胞强烈粘附在培养瓶表面,有时很难分离。

RAW 264.7 细胞在巨噬细胞模拟和免疫学研究中的应用

模拟细胞免疫反应

RAW 264.7 细胞系反映了真实巨噬细胞的功能,是研究细胞对病原体和免疫刺激反应的关键模型。一项强调这方面的研究评估了热杀灭乳酸菌对这些细胞的免疫调节和抗氧化作用,为免疫系统调节提供了重要发现[5]。

作为补充,2019 年进行的研究阐明了 RAW 264.7 暴露于植物何首乌多糖的免疫学影响。研究认为,这些化合物通过激活 NF-κB/MAPK 信号通路触发免疫反应,从而提供了深入的分子认识[6]。

探索破骨细胞生成

作为破骨细胞分化研究的替代物,RAW 264.7 细胞有助于阐明破骨细胞的行为和分化途径。这些研究拓展了我们对骨吸收机制和骨质疏松症发病机制的认识。我们经常利用先进的成像技术来监测细胞内的变化并分析这些细胞内的血红素代谢。

深入了解破骨细胞生成的分子机制

尽管 RAW 264.7 细胞的主要作用是作为巨噬细胞模型,但它们也被用于体外破骨细胞生成研究。通过在这些细胞中诱导类似破骨细胞的特征,研究人员可以深入了解分化过程和破骨细胞前期行为,不过在这些研究中必须考虑细胞系的固有特征和来源。

天然产品生物活性筛选

天然产品生物活性筛选是 RAW 264.7 细胞的另一项优势应用。例如,韩国在一项研究中使用 RAW 264.7 细胞对草药混合物的免疫刺激特性进行了调查,结果表明该细胞系能有效鉴定天然物质中的生物活性化合物[7]。

用我们的RAW 264.7 细胞为您的研究开路

使用 RAW 264.7 细胞发表的研究论文

关于小鼠巨噬细胞系 RAW 264.7 的研究论文很多:

RAW 264.7 细胞:资源、方案、视频及更多

RAW 264.7 细胞常用于转染研究。以下资源解释了用于 RAW 264.7 细胞系的不同转染方法。

与 RAW 264.7 细胞系相关的视频

关于 RAW 264.7 细胞系的基本常见问题:对巨噬细胞模拟和破骨细胞生成研究的启示

参考文献

  1. Taciak, B., et al., Evaluation of phenotypic and functional stability of RAW 264.7 cell line through serial passages.PloS one, 2018.13(6): p. e0198943.
  2. Wang, S., et al., 炎性巨噬细胞通过调节 Notch 信号通路干扰骨细胞成熟和矿化。分子医学》,2022 年。28(1): p. 102.
  3. Orekhov, A.N., et al., Monocyte differentiation and macrophage polarization.Vessel Plus, 2019.3: p. 10.
  4. Khabipov, A., et al., RAW 264.7巨噬细胞被胰腺癌细胞极化--研究肿瘤促进巨噬细胞的模型。Anticancer Research, 2019.39(6): p. 2871-2882.
  5. Kang, C.-H., et al., Heat-killed lactic acid bacteria inhibit nitric oxide production via inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 in RAW 264.7 cells.Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021.13(6): p. 1530-1538.
  6. Zhang, J., et al., Polysaccharides from Polygonatum sibiricum Delar.RSC advances, 2019.9(31): p. 17988-17994.
  7. Trinh, T.A., et al.,草药配方对 RAW 264.7 巨噬细胞免疫应答增强的影响。生物分子》,2020 年。10(3): p. 424.

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