DAKIKI 细胞
一般信息
| 说明 | DAKIKI 是一种人爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)阳性的 B 淋巴母细胞样细胞系,其表面表达 IgA1 并分泌聚合型 IgA1。该细胞系最初源自一名鼻咽癌成人患者的周围淋巴细胞,随后被建立为一种持续增殖的悬浮培养细胞系。 该细胞呈现典型的淋巴母细胞样形态,可在添加血清的RPMI培养基中生长。DAKIKI已被广泛用作人IgA1产生B细胞的模型,特别适用于研究免疫球蛋白合成、分泌调控及翻译后糖基化。 生化及凝集素分析表明,DAKIKI细胞分泌的IgA1在铰链区具有缺乏半乳糖的O-连接糖链。 单糖组成分析和凝集素ELISA证实,末端或α2,6-唾液酸化N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)残基富集,这是IgA肾病中观察到的异常糖基化IgA1的特征性糖型。 神经氨酸酶处理显著增加了 Helix aspersa 凝集素的反应性,表明存在唾液酸化 GalNAc 结构。使用 DAKIKI 细胞的高尔基体富集分馏物进行的功能检测证明了 CMP-NeuAc:GalNAc-IgA1 α2,6-唾液酸转移酶活性,证实了这些细胞直接对缺乏半乳糖的 O-糖链进行唾液酸化的能力。 转录分析显示ST6-GalNAcII有表达,而ST6-GalNAcI无表达,这支持了ST6-GalNAcII在介导IgA1铰链区GalNAc的α2,6-唾液酸化中的作用。 除了在糖基化研究中的应用外,DAKIKI 还被评估了其对 B 细胞诱导因子和佛波酯的反应性,这些物质可调节某些人类 B 细胞系中的免疫球蛋白分泌。尽管 DAKIKI 会持续分泌 IgA,但它已被纳入用于研究免疫球蛋白产生调节和分化状态的 EBV 转化 B 细胞模型之中。 凭借其稳定的IgA1分泌特征以及可重复产生缺乏半乳糖、铰链区α2,6-唾液酸化糖链的能力,DAKIKI已成为一个表征充分的体外系统,用于探究IgA1糖基化机制、B细胞分化以及IgA相关疾病的分子发病机制。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 外周血 |
| 同义词 | DAKIKI,DAKIKI 克隆体 1 |
特点
| 年龄 | 未说明 |
|---|---|
| 性别 | 未说明 |
| 种族 | 非洲 |
| 形态学 | 淋巴母细胞 |
| 细胞类型 | B细胞 |
| 生长特性 | 悬挂 |
监管数据
| 引用 | DAKIKI(Cytion 产品编号 305928) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 2 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_3675 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | 无 |
| 亚培养 | 通过上下吸取操作轻柔匀化烧瓶中的细胞悬液,随后取代表性样本测定每毫升细胞密度。用新鲜培养基将悬液稀释至1×10⁵细胞/毫升浓度,并将调整后的悬液分装至新烧瓶中进行后续培养。 |
| 播种密度 | 2 至 5 × 10⁵ 个细胞/cm² |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 作为冷冻保存培养基,我们使用完全生长培养基+10% DMSO,以获得足够的解冻后存活率。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305928-130426 | 分析证书 | 15. May. 2026 | 305928 |
材料转让协议
若您计划仅在单一研究地点将Cytion细胞系用于内部研究,请填写并签署我们的材料转让协议(MTA),随订单一并提交。
任何商业用途——包括但不限于收费服务、质量控制检测、产品放行、诊断应用或监管研究——请填写预期用途表,以便我们为您项目定制专属协议。
请注意:MTA仅适用于特定细胞系。若产品页面同时显示本通知及MTA文件,则该协议适用。未涵盖于MTA的细胞系页面将不显示协议提示。MTA对美洲、中国大陆及台湾地区客户无效,请联系我们的美国实体获取适用协议。
-
所需产品
所需产品
冷冻培养基 CM-1 - 50 毫升冷冻保存介质变体: 50 毫升Cytion 的冷冻培养基 CM-1 是一种先进的冷冻培养基,旨在确保细胞在解冻后具有最高水平的活力和功能。这种多功能培养基适用于包括人类和动物细胞在内的多种细胞类型,是各种研究应用的必备工具。Freeze Medium CM-1 精心平衡了冷冻保护剂和必需营养素的组合,在冷冻过程中最大程度地减少了冰晶的形成和细胞应激,从而保护了细胞的完整性。
冷冻培养基 CM-1 的主要特点包括
广泛的兼容性:适用于多种类型的细胞,包括原代细胞、干细胞和成熟的细胞系。
高活力:经过优化,可最大限度地提高冻存后细胞的恢复能力和存活率,确保可靠的实验结果。
即用型:方便制备和灭菌,可立即使用,减少了制备时间和污染风险。
稳定性更强:在标准低温保存条件下保持稳定的性能,确保结果的可重复性。
保存期长:CM-1 是一种含血清的即用型冷冻保存培养基,可在冰箱中保存长达一年。
使用 CM-1 冷冻细胞
要使用 CM-1 冷冻粘附细胞和悬浮细胞,请按照以下步骤操作:
对于粘附细胞,清洗并使其与培养基质分离。对于悬浮细胞,直接进入下一步。
清点细胞,确保细胞浓度合适。
离心细胞使其沉淀,然后用 CM-1 冷冻培养基重悬。
将重新悬浮的细胞转移到冷冻瓶中。
在将细胞转移到长期储存器之前,采用缓慢冷冻的方法。
方法
说明
步骤
❄️
手动冷冻
逐步降低温度以确保细胞活力的方法。
1️⃣ 将细胞放入冷冻培养基中,在 4°C 的冰箱中冷冻 40 分钟。
2️⃣转移到-80°C冷冻室24小时。
3️⃣将细胞保存在液氮中,以便长期保存。
❄️
使用冰冻先生
无需电力即可控制冷冻速率的便捷设备。
1️⃣用冷冻培养基在低温瓶中准备细胞。
2️⃣ 将冷冻瓶放入 Mr.
3️⃣ 在-80°C下保存24小时,然后转移到液氮中。
❄️
可控速率冷冻箱
赛默飞或其他制造商生产的用于控制温度降低的高精度冷冻机。
1️⃣对设备进行编程,使温度逐渐降低。
2️⃣ 将准备好的细胞放入冷冻室。
3️⃣冷冻周期结束后,将细胞转移到液氮中。
将冷冻瓶保存在-130°C以下的温度或液氮中,以便长期保存。
成分
含 FBS、DMSO、葡萄糖、盐类
缓冲能力:pH = 7.2 至 7.6
Cytion 的冻存培养基 CM-1 为低温保存提供了可靠的解决方案,可确保细胞在解冻后的高存活率和高功能性,适用于广泛的研究应用。€59.00*Accutase 细胞脱附液 - 100 毫升变体: 100 毫升含EDTA和酚红的Accutase细胞脱附液 – 100 毫升
Accutase 是一种即用型、经无菌过滤的细胞脱附液,旨在作为胰蛋白酶/EDTA 的温和替代品,用于将贴壁哺乳动物细胞从标准组织培养塑料器皿和粘附涂层表面上分离。该产品将蛋白水解酶和胶原酶活性结合在平衡盐溶液中,可实现有效且可控的细胞分离,同时保留细胞表面蛋白,并支持高传代存活率及快速再附着。
Accutase 的配方以杜尔贝科磷酸盐缓冲盐水(DPBS)为基础,并添加了 EDTA 及作为视觉 pH 指示剂的酚红。 该酶制剂源自非哺乳动物且非细菌来源,因此Accutase特别适用于干细胞研究、疫苗工作流程,以及任何必须最大限度减少动物或微生物来源污染的应用场景。该溶液在37 °C下会自动失活,因此脱附后无需使用中和试剂或含血清培养基——细胞可直接转移至新鲜培养基中。
主要特点
即用型 1x 无菌过滤液——无需稀释或复溶
兼具蛋白水解和胶原蛋白水解酶活性,实现温和分离
每批产品均标准化至特定解离活性,确保批次间一致性
酶源为非哺乳动物及非细菌来源
在 37 °C 时自动失活——无需中和溶液
以含EDTA的杜尔贝科PBS配制
内含酚红作为视觉pH指示剂
pH 6.8 – 7.8
典型应用
Accutase 可温和地分离各种粘附性和敏感性细胞类型,包括人类胚胎干细胞 (hESCs)、人类诱导多能干细胞 (iPSCs)、神经干细胞、原代神经元以及常规培养的粘附性细胞系,如 HeLa、HEK 293、CHO、MDCK、Vero、NIH/3T3、BHK-21 和 A549。 典型应用包括:
哺乳动物贴壁细胞的常规传代与分培养
hESCs、iPSCs及其他敏感细胞系的温和单细胞分离
流式细胞术和FACS分析的样本制备
对表位完整性至关重要的细胞表面标志物分析
细胞迁移、增殖和凋亡检测
通过血清饥饿法进行的静止期检测及致癌基因转染研究
肿瘤细胞和神经嵴细胞迁移检测
生物反应器工作流程中的生产规模放大
常规操作中,每75 cm²培养表面使用约10 ml Accutase,室温孵育5–10分钟。应针对每种细胞系确定最佳孵育时间,且不应超过一小时。添加前,请用不含钙镁的盐溶液(如无钙无镁DPBS)冲洗细胞层,以去除残留血清和二价阳离子。
操作与储存
未开封的瓶装产品应冷冻保存于-15 °C或更低温度。可在室温下或于+2 °C至+8 °C环境中过夜解冻。请勿在37 °C水浴中解冻Accutase,因高温会降低酶活性。解冻后,溶液可在+2 °C至+8 °C条件下保存最长2个月;请勿在室温下保存。 使用前请勿将试剂预热至37 °C——应在室温下直接加入已洗涤的细胞中。为延长保质期,建议分装为单次用量,以避免反复解冻。操作时务必在无菌条件下进行。
质量
本品在严格的质量标准下生产。每批Accutase均经过无菌过滤,并经过无菌性、pH值、外观及解离活性的检测,以确保批次间性能的一致性和可重复性。
产品规格
规格
详情
产品类型细胞脱附/分离试剂
规格经无菌过滤的液体,即用型
容量100 毫升
工作浓度1×(即用型)
酶活性兼具蛋白水解和胶原蛋白水解活性
酶源非哺乳动物和非细菌
缓冲体系含EDTA的杜尔贝科PBS
pH指示剂酚红
pH 范围6.8 – 7.8
外观透明、淡红至橙色溶液
储存温度-15 °C 或更低
解冻后的稳定性在 +2 °C 至 +8 °C 条件下可保存长达 2 个月
建议使用量每 75 cm² 培养表面约 10 ml
典型孵育时间室温下 5 – 10 分钟
运输条件干冰冷冻
预期用途仅限研究用途及后续生产
配方(每升成分)
组分
浓度(mg/L)
无机盐
氯化钠 (NaCl)8000.00
磷酸氢二钠 (Na2HPO4)1150.00
氯化钾 (KCl)200.00
磷酸二氢钾 (KH₂PO₄)200.00
其他组分
EDTA·4Na(四钠乙二胺四乙酸)220.00
酚红3.00
专有酶混合物(具有蛋白水解和胶原蛋白水解活性)1x
Accutase 是 Innovative Cell Technologies, Inc. 的注册商标。€75.00*抗生素/抗真菌溶液(100 倍)产品概述
容量:100 毫升 储存:≤-15°C 无菌:无菌过滤
抗生素/抗真菌溶液(100 倍)是一种无菌、即用型浓缩液,旨在降低细胞培养和相关实验室应用中的微生物污染风险。这种 100x 溶液含有青霉素、链霉素和两性霉素 B 的成熟组合,对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、酵母菌和丝状真菌具有广谱抗菌活性。该制剂适用于真核细胞培养、细菌培养基和其他对污染敏感的系统,支持清洁、一致的实验室操作。
应用和优点 该溶液针对常规研究方案进行了优化,广泛用于维持细胞培养工作流程中的无菌条件。它能在污染敏感环境中提供可靠的性能,帮助研究人员降低微生物过度生长的风险,同时不影响细胞健康或实验重现性。无菌过滤配方无需额外的溶解步骤,可简化培养基制备过程,减少日常实验过程中的变异性。
使用方法与兼容性 要达到标准的工作浓度,可将溶液按 1:100 的比例稀释到完整的培养基中。该产品与多种哺乳动物细胞系和基础培养基兼容。由于有稳定的库存,研究人员可从可靠的供应连续性和简化的物流规划中获益。溶液应储存在 ≤ -15 °C 的环境中,避免反复冻融以保持稳定。 仅供研究使用。不得用于诊断或治疗程序。不得用于人类或动物。€45.00*