B16-F10 细胞
有关 B16-F10 细胞的要点
| 说明 | B16-F10 细胞系是小鼠 B16 黑色素瘤细胞系的一个亚系,来源于小鼠的自发性皮肤肿瘤。这些细胞具有侵袭性转移潜能,尤其是向肺部转移,因此是研究黑色素瘤进展和转移的重要模型。B16-F10 细胞的黑色素含量很高,这导致了它们的色素沉着,并在各种检测中被用作追踪细胞增殖和肿瘤生长的标记物。B16-F10 是通过使用 Fidler 方法的十次选择程序获得的,与其母系 B16-F0 和经过一次选择程序的 B16-F1 亚系相比,B16-F10 的转移能力更强。 B16-F10细胞能在C57BL/6小鼠体内形成肿瘤,为体内研究提供了一致且可重复的模型,因此被广泛用于癌症研究。这些细胞表达各种黑色素瘤相关抗原,这对研究免疫反应和开发免疫疗法至关重要。此外,B16-F10 细胞还用于评估化疗药物的疗效和黑色素瘤耐药性的分子机制。该细胞系的遗传特征和在不同实验条件下的表现有助于深入了解黑色素瘤转移的相关途径,有助于开发靶向治疗策略。值得注意的是,B16-F10 的衍生物 B16-BL6 表现出更强的侵袭活性,使 B16 系列成为研究黑色素瘤生物学和治疗不同方面的综合模型系统。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 皮肤 |
| 疾病 | 小鼠黑色素瘤 |
| 同义词 | B16/F10, B16 F10, B16F10, B16 黑色素瘤 F10 |
B16-F10 细胞系的特点
| 品种/亚种 | C57BL/6 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 纺锤形细胞和上皮样细胞的混合物 |
| 生长特性 | 附着物 |
规格
| 引用 | B16-F10(Cytion 目录编号 305157) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0159 |
B16 黑色素瘤模型的遗传特征
| 产品 | 黑色素 |
|---|
培养方法
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量核查
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305157-030323 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305157 |
| 305157-030323SF | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305157 |
| 305157-131124 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 305157 |
| 305157-250725 | 分析证书 | 18. Aug. 2025 | 305157 |
材料转让协议
若您计划仅在单一研究地点将Cytion细胞系用于内部研究,请填写并签署我们的材料转让协议(MTA),随订单一并提交。
任何商业用途——包括但不限于收费服务、质量控制检测、产品放行、诊断应用或监管研究——请填写预期用途表,以便我们为您项目定制专属协议。
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所需产品
所需产品
冷冻培养基 CM-1 - 50 毫升冷冻保存介质变体: 50 毫升Cytion 的冷冻培养基 CM-1 是一种先进的冷冻培养基,旨在确保细胞在解冻后具有最高水平的活力和功能。这种多功能培养基适用于包括人类和动物细胞在内的多种细胞类型,是各种研究应用的必备工具。Freeze Medium CM-1 精心平衡了冷冻保护剂和必需营养素的组合,在冷冻过程中最大程度地减少了冰晶的形成和细胞应激,从而保护了细胞的完整性。
冷冻培养基 CM-1 的主要特点包括
广泛的兼容性:适用于多种类型的细胞,包括原代细胞、干细胞和成熟的细胞系。
高活力:经过优化,可最大限度地提高冻存后细胞的恢复能力和存活率,确保可靠的实验结果。
即用型:方便制备和灭菌,可立即使用,减少了制备时间和污染风险。
稳定性更强:在标准低温保存条件下保持稳定的性能,确保结果的可重复性。
保存期长:CM-1 是一种含血清的即用型冷冻保存培养基,可在冰箱中保存长达一年。
使用 CM-1 冷冻细胞
要使用 CM-1 冷冻粘附细胞和悬浮细胞,请按照以下步骤操作:
对于粘附细胞,清洗并使其与培养基质分离。对于悬浮细胞,直接进入下一步。
清点细胞,确保细胞浓度合适。
离心细胞使其沉淀,然后用 CM-1 冷冻培养基重悬。
将重新悬浮的细胞转移到冷冻瓶中。
在将细胞转移到长期储存器之前,采用缓慢冷冻的方法。
方法
说明
步骤
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手动冷冻
逐步降低温度以确保细胞活力的方法。
1️⃣ 将细胞放入冷冻培养基中,在 4°C 的冰箱中冷冻 40 分钟。
2️⃣转移到-80°C冷冻室24小时。
3️⃣将细胞保存在液氮中,以便长期保存。
❄️
使用冰冻先生
无需电力即可控制冷冻速率的便捷设备。
1️⃣用冷冻培养基在低温瓶中准备细胞。
2️⃣ 将冷冻瓶放入 Mr.
3️⃣ 在-80°C下保存24小时,然后转移到液氮中。
❄️
可控速率冷冻箱
赛默飞或其他制造商生产的用于控制温度降低的高精度冷冻机。
1️⃣对设备进行编程,使温度逐渐降低。
2️⃣ 将准备好的细胞放入冷冻室。
3️⃣冷冻周期结束后,将细胞转移到液氮中。
将冷冻瓶保存在-130°C以下的温度或液氮中,以便长期保存。
成分
含 FBS、DMSO、葡萄糖、盐类
缓冲能力:pH = 7.2 至 7.6
Cytion 的冻存培养基 CM-1 为低温保存提供了可靠的解决方案,可确保细胞在解冻后的高存活率和高功能性,适用于广泛的研究应用。€59.00*DMEM,w:4.5 g/L 葡萄糖,w:4 mM L-谷氨酰胺,w:3.7 g/L NaHCO3,w:1.0 mM 丙酮酸钠DMEM(杜氏改良老鹰培养基)是一种用途广泛的基础培养基,可支持生物研究中各种哺乳动物细胞的生长。它是培养原代成纤维细胞、神经元、神经胶质细胞、HUVEC、平滑肌细胞以及 HeLa、293、Cos-7 和 PC-12 等常用细胞系的理想培养基。
DMEM 与其他培养基的不同之处在于其独特的成分。与最初的 Eagle's Minimal Essential Medium 相比,它的氨基酸和维生素浓度增加了四倍,令人印象深刻。DMEM 最初是在低葡萄糖(1 克/升)和丙酮酸钠的条件下开发的,现在经常在较高葡萄糖水平(含或不含丙酮酸钠)下使用。值得注意的是,DMEM 不含蛋白质、脂类或生长因子,因此需要补充。为达到最佳生长效果,常用的方法是在 DMEM 中添加 10% 的胎牛血清(FBS)。此外,DMEM 采用碳酸氢钠缓冲体系,需要 5-10% 的二氧化碳环境来维持生理 pH 值。
杜氏改良老鹰培养基(DMEM)在用于细胞和组织培养的特定培养基中备受推崇,可满足各种粘附细胞表型的生长需求。它超越了 20 世纪 50 年代为培养鸡细胞而开发的原始老鹰培养基,采用了被称为 "杜氏改良 "的增强型补充配方。与原来的培养基相比,这种改良大大提高了特定氨基酸和维生素的含量,最高可达原来的四倍。
在细胞培养领域,DMEM 作为不同类型细胞(包括原代细胞、干细胞和转化细胞)的生长培养基发挥着重要作用。研究人员还将改良版 DMEM 广泛应用于药物发现、组织工程和细胞信号通路研究等研究领域。
质量控制
无菌过滤
储存和保质期
储存于 +2°C 至 +8°C,避光保存。
开封后,请在 4°C 下保存,并在 6-8 周内使用。
运输条件
环境温度
保存
避光冷藏,温度保持在 +2°C 至 +8°C。避免冷冻和频繁加温至 +37°C,否则会降低产品质量。
不要将培养基加热到 37°C 以上或使用微波炉等不受控制的热源。
如果只需使用部分培养基,请取出所需用量并加热至室温后再使用。
成分
类别
成分
浓度(毫克/升)
氨基酸
甘氨酸
30.00
L-Arginine HCl
84.00
L-Cystine 2 HCl
62.57
L -谷氨酰胺
584.00
L 组氨酸盐酸盐H2O
42.00
L-异亮氨酸
105.00
L-亮氨酸
105.00
L -赖氨酸盐酸盐
146.00
L-Methionine
30.00
L -苯丙氨酸
66.00
L -丝氨酸
42.00
L -苏氨酸
95.00
左旋色氨酸
16.00
L-酪氨酸 2 Na2H2O
103.79
L-缬氨酸
94.00
维生素
氯化胆碱
4.00
泛酸 D 钙
4.00
叶酸
4.00
肌醇
7.20
烟酰胺
4.00
盐酸吡哆醛
4.00
核黄素
0.40
盐酸硫胺素
4.00
无机盐
CaCl22H2O
265.00
Fe(NO3)39H2O
0.10
氯化钾
400.00
MgSO4 7H2O
200.10
氯化钠
6400.00
NaHCO3
3700.00
NaH2PO4 2H2O
141.73
其他成分
D-葡萄糖
4500.00
酚红钠盐
15.90
丙酮酸钠
110.00€25.00*Accutase 细胞脱附液 - 100 毫升变体: 100 毫升含EDTA和酚红的Accutase细胞脱附液 – 100 毫升
Accutase 是一种即用型、经无菌过滤的细胞脱附液,旨在作为胰蛋白酶/EDTA 的温和替代品,用于将贴壁哺乳动物细胞从标准组织培养塑料器皿和粘附涂层表面上分离。该产品将蛋白水解酶和胶原酶活性结合在平衡盐溶液中,可实现有效且可控的细胞分离,同时保留细胞表面蛋白,并支持高传代存活率及快速再附着。
Accutase 的配方以杜尔贝科磷酸盐缓冲盐水(DPBS)为基础,并添加了 EDTA 及作为视觉 pH 指示剂的酚红。 该酶制剂源自非哺乳动物且非细菌来源,因此Accutase特别适用于干细胞研究、疫苗工作流程,以及任何必须最大限度减少动物或微生物来源污染的应用场景。该溶液在37 °C下会自动失活,因此脱附后无需使用中和试剂或含血清培养基——细胞可直接转移至新鲜培养基中。
主要特点
即用型 1x 无菌过滤液——无需稀释或复溶
兼具蛋白水解和胶原蛋白水解酶活性,实现温和分离
每批产品均标准化至特定解离活性,确保批次间一致性
酶源为非哺乳动物及非细菌来源
在 37 °C 时自动失活——无需中和溶液
以含EDTA的杜尔贝科PBS配制
内含酚红作为视觉pH指示剂
pH 6.8 – 7.8
典型应用
Accutase 可温和地分离各种粘附性和敏感性细胞类型,包括人类胚胎干细胞 (hESCs)、人类诱导多能干细胞 (iPSCs)、神经干细胞、原代神经元以及常规培养的粘附性细胞系,如 HeLa、HEK 293、CHO、MDCK、Vero、NIH/3T3、BHK-21 和 A549。 典型应用包括:
哺乳动物贴壁细胞的常规传代与分培养
hESCs、iPSCs及其他敏感细胞系的温和单细胞分离
流式细胞术和FACS分析的样本制备
对表位完整性至关重要的细胞表面标志物分析
细胞迁移、增殖和凋亡检测
通过血清饥饿法进行的静止期检测及致癌基因转染研究
肿瘤细胞和神经嵴细胞迁移检测
生物反应器工作流程中的生产规模放大
常规操作中,每75 cm²培养表面使用约10 ml Accutase,室温孵育5–10分钟。应针对每种细胞系确定最佳孵育时间,且不应超过一小时。添加前,请用不含钙镁的盐溶液(如无钙无镁DPBS)冲洗细胞层,以去除残留血清和二价阳离子。
操作与储存
未开封的瓶装产品应冷冻保存于-15 °C或更低温度。可在室温下或于+2 °C至+8 °C环境中过夜解冻。请勿在37 °C水浴中解冻Accutase,因高温会降低酶活性。解冻后,溶液可在+2 °C至+8 °C条件下保存最长2个月;请勿在室温下保存。 使用前请勿将试剂预热至37 °C——应在室温下直接加入已洗涤的细胞中。为延长保质期,建议分装为单次用量,以避免反复解冻。操作时务必在无菌条件下进行。
质量
本品在严格的质量标准下生产。每批Accutase均经过无菌过滤,并经过无菌性、pH值、外观及解离活性的检测,以确保批次间性能的一致性和可重复性。
产品规格
规格
详情
产品类型细胞脱附/分离试剂
规格经无菌过滤的液体,即用型
容量100 毫升
工作浓度1×(即用型)
酶活性兼具蛋白水解和胶原蛋白水解活性
酶源非哺乳动物和非细菌
缓冲体系含EDTA的杜尔贝科PBS
pH指示剂酚红
pH 范围6.8 – 7.8
外观透明、淡红至橙色溶液
储存温度-15 °C 或更低
解冻后的稳定性在 +2 °C 至 +8 °C 条件下可保存长达 2 个月
建议使用量每 75 cm² 培养表面约 10 ml
典型孵育时间室温下 5 – 10 分钟
运输条件干冰冷冻
预期用途仅限研究用途及后续生产
配方(每升成分)
组分
浓度(mg/L)
无机盐
氯化钠 (NaCl)8000.00
磷酸氢二钠 (Na2HPO4)1150.00
氯化钾 (KCl)200.00
磷酸二氢钾 (KH₂PO₄)200.00
其他组分
EDTA·4Na(四钠乙二胺四乙酸)220.00
酚红3.00
专有酶混合物(具有蛋白水解和胶原蛋白水解活性)1x
Accutase 是 Innovative Cell Technologies, Inc. 的注册商标。€75.00*抗生素/抗真菌溶液(100 倍)产品概述
容量:100 毫升 储存:≤-15°C 无菌:无菌过滤
抗生素/抗真菌溶液(100 倍)是一种无菌、即用型浓缩液,旨在降低细胞培养和相关实验室应用中的微生物污染风险。这种 100x 溶液含有青霉素、链霉素和两性霉素 B 的成熟组合,对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、酵母菌和丝状真菌具有广谱抗菌活性。该制剂适用于真核细胞培养、细菌培养基和其他对污染敏感的系统,支持清洁、一致的实验室操作。
应用和优点 该溶液针对常规研究方案进行了优化,广泛用于维持细胞培养工作流程中的无菌条件。它能在污染敏感环境中提供可靠的性能,帮助研究人员降低微生物过度生长的风险,同时不影响细胞健康或实验重现性。无菌过滤配方无需额外的溶解步骤,可简化培养基制备过程,减少日常实验过程中的变异性。
使用方法与兼容性 要达到标准的工作浓度,可将溶液按 1:100 的比例稀释到完整的培养基中。该产品与多种哺乳动物细胞系和基础培养基兼容。由于有稳定的库存,研究人员可从可靠的供应连续性和简化的物流规划中获益。溶液应储存在 ≤ -15 °C 的环境中,避免反复冻融以保持稳定。 仅供研究使用。不得用于诊断或治疗程序。不得用于人类或动物。€45.00*公共广播事业磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 溶液
磷酸盐缓冲盐水(PBS)是生物和化学研究中广泛使用的缓冲溶液。在组织处理和细胞培养等各种实验过程中,它在维持 pH 值平衡和渗透压方面发挥着至关重要的作用。我们的 PBS 溶液由高纯度成分精心配制而成,可确保每次实验的稳定性和可靠性。我们的 PBS 溶液的渗透压和离子浓度接近人体渗透压和离子浓度,因此等渗且对大多数细胞无毒。
我们的 PBS 溶液的成分
我们的 PBS 溶液是一种经过 pH 值调整的超纯级磷酸盐缓冲液和生理盐水混合溶液。在 1 倍工作浓度下,它包含
8000 毫克/升氯化钠(NaCl)
200 毫克/升 氯化钾(KCl)
1150 毫克/升 无水磷酸氢二钠(Na2HPO4)
200 毫克/升 无水磷酸二氢钾(KH2PO4)
这种成分可确保最佳的 pH 值和离子平衡,适用于广泛的生物应用。
我们的 PBS 溶液的应用
我们的 PBS 溶液非常适合生物研究中的各种应用。它具有等渗和无毒的特性,适用于物质稀释和细胞容器冲洗。含有 EDTA 的 PBS 溶液可有效分离附着和凝集的细胞。不过,PBS 中不应添加锌等二价金属,否则会导致沉淀。在这种情况下,建议使用 Good's 缓冲液。此外,我们的 PBS 溶液也可作为病毒运输培养基的替代品,用于运输和储存包括 SARS-CoV-2 在内的 RNA 病毒。
质量控制
无菌过滤
储存和保质期
储存于 +2°C 至 +25°C,避光保存。
开封后,储存于 2°C 至 25°C,并在 24 个月内使用。
运输条件
环境温度
保养
避光冷藏,温度保持在 +2°C 至 +8°C。避免冷冻和频繁加温至 +37°C,否则会降低产品质量。
不要将培养基加热到 37°C 以上或使用微波炉等不受控制的热源。
如果只需使用部分培养基,请取出所需用量并加热至室温后再使用。
成分
类别
成分
浓度(毫克/升)
盐类
氯化钾
200
无水磷酸一钾
200
氯化钠
8000
无水磷酸氢二钠
1150€20.00* -
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