张氏肝(HeLa)细胞
一般信息
| 说明 | Chang Liver 细胞系最初被认为来源于正常人的肝脏组织,但经过先进的基因分析后,该细胞系的分类发生了重大变化。STR PCR DNA 分析技术表明,Chang Liver 细胞系与 HeLa 细胞系没有区别,这表明它并非像以前认为的那样来自肝细胞,而应被视为 HeLa 的衍生物。这一发现对使用该细胞系的研究人员具有重要意义,强调了仔细解释使用该细胞系得出的实验结果的必要性。 HeLa 细胞最初于 20 世纪 50 年代初取自黑人妇女 Henrietta Lacks,以其体外生长旺盛和遗传稳定性而著称,鉴于其遗传相似性,Chang Liver 细胞系很可能也具有这些特征。在这种背景下,在与肝功能或肝病有关的研究中使用 Chang Liver 细胞系可能需要重新评估或用其他肝细胞特异性模型来确认。这次错误鉴定还凸显了细胞培养实践中更广泛的问题,包括交叉污染和错误标记,强调了对研究环境中使用的细胞系进行定期鉴定的重要性。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肝脏 |
| 疾病 | 腺癌 |
| 同义词 | 张氏肝脏、张氏细胞、张氏、CHL |
特点
| 年龄 | 30年 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮样 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | 张氏肝脏(HeLa)(Cytion 目录号 300139) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0238 |
生物分子数据
| 同工酶 | G6PD, A |
|---|---|
| 致肿瘤性 | 是,在叙利亚仓鼠中 |
| 病毒 | 小鼠肝炎病毒(MHV)检测呈阴性 |
| 病毒易感性 | 脊髓灰质炎病毒 1、2、3,腺病毒 3,水泡性口炎(印第安纳州) |
| 逆转录酶 | 阴性 |
| 产品 | 角蛋白 |
处理
| 培养基 | EMEM(MEM Eagle),w:2 mM L-谷氨酰胺,w:2.2 g/L NaHCO3,w:EBSS(Cytion 文章编号 820100a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|---|
| HLA 等位基因 |
A*: '68:02:01
B*: '15:03:01
C*: '12:03:01
DRB1*: '01:02:01
DQA1*: '01:01:02
DQB1*: '05:01:01
DPB1*: '01:01:01
E: '01:03:02
|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300139-713 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300139 |