COS-7 细胞
COS-7 细胞:推进重组蛋白表达和病毒研究
| 说明 | COS-7 细胞是一种从非洲绿猴肾组织中提取的成纤维细胞样细胞系,是研究领域的重要资源,尤其是其高转染效率使其成为表达重组蛋白的热门选择。COS-7 细胞来源于 CV-1 细胞系,并用猿猴病毒 40(SV40)的突变形式进行了转化,其中包括一个复制原点,允许含有 SV40 复制原点的转染质粒进行外显子复制。 转染试剂(如 Lipofectamine)可促进 COS-7 细胞的转染,其效率与在 HeLa 细胞中观察到的效率相同。传统方法在 COS-7 细胞中的转染效率可高达 80%,这表明它们易于进行基因操作。COS-7 细胞能够容纳大型质粒并对其进行复制,从而获得高产率的所需重组蛋白,这使其成为各种应用(包括基因表达研究、信号转导通路研究以及生产用于生化分析的蛋白质)的宝贵资源。 COS-7 细胞对各种病毒有很强的敏感性,因此是病毒学研究(包括病毒-宿主相互作用研究、病毒生命周期阐明和抗病毒药物测试)的绝佳模型。利用它们对病毒进入和复制的容许性来研究病毒感染机制、致病机理以及病毒入侵者引起的细胞反应。因此,COS-7 细胞是开发用于基因治疗和疫苗研究的病毒载体的重要工具。 COS-7 细胞转染效率高,可用于重组蛋白的表达,因此是研究的基石。COS-7 细胞易于遗传操作,对病毒易感,因此是研究基因表达、信号转导、病毒学和病毒载体开发不可或缺的工具,巩固了其在基础和应用生物科学领域的多功能工具地位。 |
|---|---|
| 有机体 | 绿猴 |
| 组织 | 肾脏 |
| 应用 | 转染宿主。适用于需要表达 SV40 T 抗原的载体转染。 |
| 同义词 | Cos-7、COS7、Cos7、CV-1 in Origin Simian-7 |
规格
| 年龄 | 成人 |
|---|---|
| 性别 | 男 |
| 形态学 | 纤维母细胞样 |
| 细胞类型 | 成纤维细胞 |
| 生长特性 | 单层,粘附 |
有关 COS-7 肾细胞的文档
| 引用 | COS-7(Cytion 目录编号 605470) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9534 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0224 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:该非洲绿猴肾源细胞系(COS-7)通过转染引入复制缺陷型SV40突变体pSV6-2,从而实现永生化。该构建体已整合至CV-2衍生的细胞中。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能存在差异。 |
基因构成
| 病毒易感性 | SV40(溶解生长)、40 摄氏度下的 SV40 tsA209、早期区域缺失的 SV40 突变体 |
|---|---|
| 产品 | T 抗原 |
维护技术
| 培养基 | DMEM:Ham's F12(1:1),w: 3.1 g/L 葡萄糖,w: 2.5 mM L-谷氨酰胺,w: 15 mM HEPES,w: 0.5 mM 丙酮酸钠,w: 1.2 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820400a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
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| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
纯度和身份检查
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 605470-250723 | 分析证书 | 22. Jan. 2026 | 605470 |