C2C12 细胞
通过 C2C12 肌管推进肌肉研究
| 说明 | C2C12 细胞系是一种永生化的小鼠成肌细胞系,来源于 2 个月大的 C3H 小鼠品系的大腿肌肉,因其独特的细胞分化特性而被广泛用于生物医学研究。C2C12 肌母细胞在高血清条件下可快速增殖并表现出典型的肌母细胞特征。转入低血清或饥饿状态后,C2C12 细胞开始肌原分化,转变为肌管,肌管是收缩性骨骼肌细胞的前体。 C2C12 细胞很容易通过转染结合外源 cDNA 和核酸,因此是基因表达研究和肌母细胞与肌管分化研究的良好选择。分化过程中会表达 Myf5、MyoD、Myogenin 和 Mrf4 等肌原标志物,以及 Csrp3 和 Mef2a 等肌肉特异性标志物,这些标志物对研究不同的肌肉表型和骨骼肌再生至关重要。 C2C12 肌母细胞的独特形状及其在血清补充培养基中转化为肌母细胞环和随后转化为成熟肌管的过程强调了这些细胞的动态性质及其在骨骼肌研究中的潜力。 研究人员使用明胶水凝胶等基质进行 C2C12 细胞培养,以模拟体内肌肉条件,从而对肌肉细胞发育和细胞外基质效应进行详细研究。新陈代谢分析揭示了肌肉形成和恢复过程中的关键途径,重点研究了必需蛋白和钙在收缩过程中的作用。基因沉默技术进一步阐明了分化过程,突出了 SMAD1 磷酸化在肌肉再生中的重要作用,这对了解肌肉萎缩和损伤中的恢复至关重要。 总之,C2C12 细胞系是生物医学研究领域的一个重要工具,为探索肌肉形成、分化、基因表达的复杂性以及各种因素对骨骼肌细胞系的深远影响提供了一个多功能平台,包括肌丝、中间丝蛋白的关键作用以及这些细胞过程所处的整个生物体环境。 |
|---|---|
| 有机体 | 鼠标 |
| 组织 | 肌肉 |
| 应用 | 转染宿主 |
| 同义词 | C2c12、C2-C12、C12 |
属性
| 品种/亚种 | C3H |
|---|---|
| 年龄 | 2 个月 |
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 肌母细胞样 |
| 细胞类型 | 肌细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
规格
| 引用 | C2C12(Cytion 目录号 400476) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 10090 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0188 |
C2C12 小鼠细胞系的遗传特征
培养方法
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS |
| 解离试剂 | Accutase |
| 加倍时间 | 24 小时 |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 播种密度 | 1×10⁴个细胞/cm²将在约4天内形成融合细胞层 |
| 流体更新 | 每 3 至 5 天 |
| 解冻后恢复 | 解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
C2C12 细胞的质量控制
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
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分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 400476-1122 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 400476 |
| 400476-180324 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 400476 |
| 400476-1122 | 分析证书 | 18. Aug. 2025 | 400476 |
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