NCI-H1299 细胞
对 NCI-H1299 肺癌细胞的了解
| 说明 | NCI-H1299(亦称H1299)是一种人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系,源自一名成年男性肺癌患者的淋巴结转移灶。与H292细胞一样,H1299在癌症生物学和肿瘤免疫学研究中被广泛用作NSCLC模型。 该细胞系呈现上皮样形态,其特征为贴壁、扁平的细胞,厚度小于5 µm,细胞倍增时间约为22–30小时。H1299细胞表达角蛋白和波形蛋白,但神经丝三聚体蛋白呈阴性,反映出兼具上皮和间质特征的表型。 在遗传学上,H1299 细胞携带 TP53 基因的纯合部分缺失,导致 p53 蛋白表达完全丧失。 该细胞系还具有野生型KRAS状态,这使其区别于携带内源性KRAS突变的其他非小细胞肺癌(NSCLC)模型,如A549细胞。由于缺乏功能性p53信号传导且KRAS完整,H1299细胞常被用于研究肿瘤抑制因子生物学、致癌信号通路、凋亡、转移及治疗耐药机制。 与A549等更具上皮特征的非小细胞肺癌细胞系相比,H1299细胞表现出更明显的间质表型,其上皮标志物表达水平降低,这使其特别适用于上皮-间质转化(EMT)、侵袭及转移进展的研究。 另有报道指出,H1299细胞虽能低水平合成神经肽神经肽B(NMB),但无法检测到胃泌素释放肽(GRP)的产生。其强劲的增殖特性、高转染效率以及特征明确的分子背景,使其在靶向治疗、基因编辑、免疫介导的细胞毒性及KRAS相关下游信号通路的研究中得到广泛应用。 与所有长期培养的肿瘤细胞模型一样,建议定期进行鉴定并确认关键分子特征,以确保实验的可重复性。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 肺部 |
| 疾病 | 癌症 |
| 同义词 | H1299、H-1299、NCH1299 |
详细信息
| 年龄 | 59 岁 |
|---|---|
| 种族 | 高加索人 |
| 生长特性 | 附着物 |
H1299 小细胞肺癌细胞的特征
| 引用 | NCI-H1299(Cytion 目录号 300485) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0060 |
表达/突变
处理
| 培养基 | RPMI 1640,w:2.0 mM 稳定谷氨酰胺,w:2.0 g/L NaHCO3(Cytion 文章编号 820700a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS,并加入 2.5 g/L 葡萄糖和 10 mM HEPES |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
H1299 细胞的质量控制
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 300485-131124 | 分析证书 | 26. May. 2025 | 300485 |
| 300485-240624 | 分析证书 | 23. May. 2025 | 300485 |
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