AAV-293 细胞
一般信息
| 说明 | AAV-293 细胞系是用人类腺病毒 5 型 DNA 转化的原代胚胎人类肾脏建立的永久性细胞系。腺病毒 E1 区编码的基因(E1a 和 E1b)在这些细胞中表达,并参与病毒启动子的反式激活,使这些细胞能够产生高水平的蛋白质。 AAV-293 源自亲本 293 细胞系,通过克隆和多轮测试,AAV-293 被特选用于在无辅助系统中生产高水平的 AAV。与普通 293 细胞相比,AAV-293 具有以下优势细胞表面积更大,转染能力更强,AAV 产量更高。 其优点是形态扁平,能牢固地附着在培养板上,是大规模培养和生产 AAV 的理想细胞。腺相关病毒(AAV)属于副病毒科,是单链无包膜 DNA 病毒中最小的一类病毒。 迄今报道的 AAV 有九种不同的血清型。AAV 既能感染分裂细胞,也能感染非分裂细胞,并能在人类宿主细胞中存活,具有长期基因转移的潜力。重组 AAV-2 是基因递送中最常用的血清型,可通过辅助病毒或 AAV-293 细胞产生高滴度。 |
|---|---|
| 有机体 | 人类 |
| 组织 | 胚胎肾脏 |
| 同义词 | AAV293 |
特点
| 年龄 | 胎儿 |
|---|---|
| 性别 | 女性 |
| 形态学 | 上皮细胞 |
| 生长特性 | 附着物 |
监管数据
| 引用 | AAV-293(Cytion 目录号 305127) |
|---|---|
| 生物安全等级 | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_6871 |
| 转基因生物现状 | GMO-S1:这种源自 HEK293 的 AAV-293 品系含有支持 AAV 载体生产的克隆修饰。此分类仅适用于德国境内,其他地区可能有所不同。 |
生物分子数据
处理
| 培养基 | DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。 |
|---|---|
| 补充剂 | 在培养基中添加 10% FBS 和 0.1 mM NEAA |
| 解离试剂 | Accutase |
| 亚培养 | 去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 5 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。 |
| 流体更新 | 每周 2 至 3 次 |
| 冷冻介质 | 我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。 |
| 解冻和培养细胞 |
|
| 培养氛围 | 37°C, 5%CO2, 加湿环境。 |
| 烧瓶涂层 | 无 |
| 冷冻程序 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 运输条件 | 冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装,以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。 |
| 储存条件 | 如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。 |
质量控制/基因图谱/HLA
| 无菌 | 使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。 为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。 |
|---|
分析证书(CoA)
| 地段编号 | 证书类型 | 日期 | 目录编号 |
|---|---|---|---|
| 305127-120825 | 分析证书 | 22. Oct. 2025 | 305127 |