HEp-2 细胞

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

US$395.00*

产品采用干冰冷冻运输，装于冷冻管中。每支冷冻管通常含有3×10^⁶ 个贴壁细胞系细胞或5×10^⁶ 个悬浮细胞系细胞（具体详见批次合格证）。

价格不含税，另加运费

cryovial

产品编号 300397

安全数据表

产品介绍

分析证书（CoA）

说明	HEp-2 细胞系最初被认为来源于喉癌细胞，后来通过 DNA 指纹和 HeLa 标记染色体的存在被确认为受到 HeLa 细胞（一种来源于宫颈癌的细胞系）的污染。尽管如此，HEp-2 细胞系仍被广泛用于间接免疫荧光法检测抗核抗体（ANA），这是诊断系统性红斑狼疮和系统性硬化症等疾病的关键。使用 HEp-2 细胞的间接免疫荧光检测法（IIFA）可提供明确的阳性或阴性结果，是检测抗核抗体的标准方法。这种直接的方法对于诊断和分类不同的系统性自身免疫疾病至关重要。在 HEp-2 细胞间接免疫荧光法中观察到的自身抗体模式，尤其是在风湿病学中观察到的自身抗体模式，为了解各种风湿病提供了宝贵的信息。此外，对 HEp-2 人体细胞在不同培养条件下表达的抗原进行全面审查，有助于确定与狼疮等疾病相关的特异性 ANA。总之，尽管 HEp-2 等细胞系受到 HeLa 细胞的污染，引发了癌症研究中对结果准确性和可靠性及其临床意义的担忧，但 Hep-2 在检测抗核抗体方面的实用性及其在不同研究学科中的应用凸显了其持续的重要性。除其他应用外，HEp-2 细胞系还是诊断和分类自身免疫性疾病的重要工具。
有机体	人类
组织	喉部
疾病	腺癌
应用	在风湿病学中，使用 HEp-2 细胞的间接免疫荧光在诊断自身免疫性疾病（包括系统性红斑狼疮和系统性硬化症）方面发挥着重要作用
同义词	Hep-2，HEP-2，HEp-2/HeLa，Hep 2，Hep2，HEp2，HEP2，H.Ep.-2，H.Ep.#2，H.Ep.2 号，肝 II，人类表皮样癌 #2，人类表皮瘤-2

年龄	30年
性别	女性
种族	非洲裔美国人
形态学	上皮样
生长特性	单层，粘附

引用	HEp-2 （Cytion 目录号 300397）
生物安全等级	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1906

同工酶	G6PD, A
逆转录酶	阴性
产品	角蛋白

培养基	EMEM（MEM Eagle），w：2 mM L-谷氨酰胺，w：2.2 g/L NaHCO3，w：EBSS（Cytion 文章编号 820100a）。
补充剂	在培养基中添加 10% FBS 和 1% NEAA
解离试剂	Accutase
亚培养	去除粘附细胞上的旧培养基，用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS，T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞，T25 烧瓶用 1-2 毫升，T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟，使其分离。孵育后，用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬，然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液，用新鲜培养基重悬细胞，并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
播种密度	1 × 10^⁴ 个细胞/^平方厘米
流体更新	每周 2 至 3 次
解冻后恢复	解冻后，将细胞以5×10^⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中，使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
冷冻介质	我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
解冻和培养细胞	确认小瓶在运送时仍处于深度冷冻状态，因为细胞是用干冰运送的，以便在运输过程中保持最佳温度。收到细胞后，立即将冻存瓶保存在低于 -150°C 的温度下，以确保细胞的完整性；如果需要立即培养，则进行步骤 3。如需立即进行培养，可将冻存瓶浸入 37°C 的水浴中，加入清水和抗菌剂，轻轻搅拌 40-60 秒，直至残留一小块冰，迅速解冻冻存瓶。在流动罩内无菌条件下进行所有后续步骤，打开前用 70% 乙醇消毒冷冻瓶。小心打开消毒瓶，将细胞悬浮液转移到装有 8 毫升室温培养基的 15 毫升离心管中，轻轻搅拌。将混合物以 300 x g 离心 3 分钟，分离细胞，小心弃去含有残留冷冻培养基的上清液。用 10 毫升新鲜培养基轻轻重悬细胞团。对于粘附细胞，将悬浮液分装在两个 T25 培养瓶中；对于悬浮培养，将所有培养基转移到一个 T25 培养瓶中，以促进细胞的有效相互作用和生长。坚持既定的亚培养方案，以继续生长和维持细胞系，确保可靠的实验结果。
培养氛围	37°C, 5%_CO2, 加湿环境。
烧瓶涂层	无
冷冻程序	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
运输条件	冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂包装，以便在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
储存条件	如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

无菌	使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

地段编号	证书类型	日期	目录编号
300397-070225	分析证书	23. May. 2025	300397
300397-101022	分析证书	23. May. 2025	300397

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