תאי A549-RFP

A549-RFP הוא נגזרת מסומנת בפלואורסצנט של קו תאי אדנוקרצינומה ריאתי A549 אנושי, מהונדס לביטוי קבוע של חלבון פלואורסצנטי אדום (RFP) לצורך הדמיה ומעקב בזמן אמת. קו A549 ההורי הוקם מתאי אדנוקרצינומה ריאתי שמקורם בתורם בוגר ומציג מורפולוגיה אפיתלית עם מאפייני צמיחה דבקים. תאי A549 שומרים על מאפיינים של תאי אפיתל אלבולריים מסוג II, כולל ביטוי של ציטוקרטין ויכולת לייצר חלבון הקשור לסורפקטנט. הכנסת קלטת ביטוי RFP יציבה מאפשרת פלואורסצנציה רציפה ללא שינוי משמעותי בתכונות השגשוג והמטבוליזם הפנימיות של קו התאים ההורי, מה שהופך את A549-RFP למתאים למחקרי הדמיה אורכיים.

אפיון תפקודי של תאי A549 בתוך פאנלים גדולים של תאי סרטן הוכיח כי גודל התא, תכולת החלבון וקצב סינתזת החלבון מתואמים באופן חיובי עם נפח התא, וכי תאים גדולים יותר נוטים להתרבות לאט יותר. בניתוחים השוואתיים, תאי A549 ממוקמים בין קווי תאים סרטניים אפיתלליים קטנים יחסית ומהירים יותר, בניגוד לתאים גדולים יותר, הדומים יותר לתאים מזנכימליים, המציגים ביטוי גבוה יותר של וימנטין ורמות נמוכות יותר של E-cadherin. ההבדלים המטבוליים והפנוטיפיים הללו רלוונטיים לפרשנות ניסויית, שכן קצב סינתזת החלבונים והזרימה המטבולית תואמים את גודל התא ומשפיעים על הרגישות לחומרים המכוונים להתרבות או למסלולים אנבוליים המווסתים על ידי mTOR. השינוי ב-RFP משמר את התאמתם של תאי A549 למחקרים מטבוליים ופרמקולוגיים כאלה, תוך שהוא מאפשר הדמיה ישירה.

A549-RFP נמצא בשימוש נרחב במערכות תרבית משותפת, במודלים של שתלים אורתוטופיים ואקטופיים, ובבדיקות פלישה או גרורות, שבהן תיוג פלואורסצנטי מקל על הבחנה בין תאי הגידול למרכיבי הסטרומה או המארח. הפלואורסצנציה האדומה היציבה תומכת ביישומים כגון הדמיה של תאים חיים, סינון תוכן גבוה, כימות מבוסס ציטומטריה זרימה והדמיה אופטית in vivo. כגרסה ניתנת למעקב של מודל אדנוקרצינומה ריאתית מאופיין היטב, A549-RFP מספק פלטפורמה איתנה לחקר התרבות תאי הגידול, מעבר אפיתל-מזנכימלי, תגובה לתרופות ואינטראקציות בין הגידול לסביבתו המיקרו-סביבתית, הן במבחנה והן in vivo.