เซลล์ PC-12 - ผลกระทบของเซลล์ PC-12 ในการวิจัยทางชีววิทยาประสาทและระบบประสาท

PC-12เป็นเซลล์ไลน์ประสาทที่คงสภาพอยู่ได้นานซึ่งถูกสร้างขึ้นจากหนู ใช้ในงานวิจัยด้านประสาทชีววิทยา เป็นเครื่องมือวิจัยที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาการแยกแยะและการเพิ่มจำนวนของเซลล์ประสาท นอกจากนี้ นักวิจัยยังใช้เซลล์เหล่านี้ในการศึกษาสรีรวิทยาของเส้นประสาท เส้นทางการส่งสัญญาณของเซลล์ และความเป็นพิษต่อระบบประสาท อีกทั้งยังถูกนำไปใช้ในการทดสอบและพัฒนายาอีกด้วย

ข้อมูลทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ไลน์ PC-12

การเข้าใจลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของสายเซลล์เป็นสิ่งสำคัญอย่างยิ่งก่อนเริ่มทำงานกับมัน หัวข้อนี้จะช่วยให้คุณได้เรียนรู้ข้อมูลที่สำคัญเกี่ยวกับสายเซลล์ PC12 ที่นี่คุณจะทราบ: สายเซลล์ PC12 คืออะไรในโรคเฟโอโครโมไซโตมา? เซลล์ PC12 มีการแยกแยะอย่างไร? แหล่งกำเนิดของ PC12 คืออะไร? ขนาดของเซลล์ PC12 คืออะไร?

  • เซลล์ประสาท PC12 มีความคล้ายคลึงกับการเพาะเลี้ยงเซลล์ประสาทของทารกในครรภ์ โดยได้มาจากเนื้องอกเฟโอโครโมไซโตมาของต่อมหมวกไตหนู เซลล์เหล่านี้มีต้นกำเนิดจากตัวอ่อน มีลักษณะคล้ายกับการผสมระหว่างเซลล์ที่มีสีeosinophilic และเซลล์ประสาท [1]
  • เซลล์ PC12 ทำหน้าที่เป็นเซลล์คาเทโคลามีน พวกมันสังเคราะห์, เก็บรักษา, และหลั่งโดปามีนและนอร์อิพิเนฟริน
  • เซลล์เฟอโอโครโมไซโตมา (PC12) มีเส้นผ่านศูนย์กลาง 10 ถึง 12 ไมโครเมตร
  • เซลล์ PC-12 มีลักษณะรูปร่างเป็นหลายเหลี่ยม
  • เซลล์ PC-12 มีจำนวนโครโมโซมที่สม่ำเสมอและใกล้เคียงกับจำนวนโครโมโซมในเซลล์ปกติ (n=40)

เส้นประสาทสปลานค์ใหญ่ช่วยในการเคลื่อนไหวของทางเดินอาหารส่วนต้นและให้ระบบประสาทซิมพาเทติกแก่ต่อมหมวกไตส่วนเมดัลลา

การเพาะเลี้ยงเซลล์ PC-12

เซลล์ไลน์ PC12 แบบจำลองเซลล์ประสาทถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางประสาทวิทยาศาสตร์ คุณควรทราบข้อมูลสำคัญต่อไปนี้เพื่อช่วยให้การเพาะเลี้ยงเป็นไปอย่างง่ายและมีประสิทธิภาพ ส่วนนี้จะครอบคลุมถึงอาหารเลี้ยงเซลล์ PC-12, ระยะเวลาการเพิ่มจำนวนเป็นสองเท่า, ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยง, ขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์, และเงื่อนไขต่างๆ

จุดสำคัญสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ PC-12

เวลาการเพิ่มจำนวนประชากรเป็นสองเท่า:

ค่าเวลาสองเท่าของ PC-12 ประมาณ 40 ชั่วโมง

ติดกันหรือแขวนลอย:

เซลล์ประสาท PC12 เติบโตเป็นกลุ่มเล็กๆ ในสภาพแขวนลอย พวกมันยึดเกาะกับพื้นผิวที่ไม่เคลือบได้น้อยมากและก่อตัวเป็นแผ่นบนคอลลาเจน

ความหนาแน่นของการหว่านเมล็ด:

ความหนาแน่นของการเพาะเลี้ยงเซลล์ของสายพันธุ์เซลล์ PC 12 ถูกควบคุมให้อยู่ที่ 1 x104 เซลล์/ซม. สำหรับการเลี้ยงแบบแขวนลอย เซลล์จะถูกนำออกจากพื้นผิวโดยการใช้ปิเปตดูดเซลล์พร้อมกับเติมอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่เพื่อแยกเซลล์เดี่ยว เซลล์จะถูกผ่านเข็มขนาด 22 เกจ และเทลงในขวดเพาะเลี้ยงใหม่ สำหรับเซลล์ที่เพาะเลี้ยงบนคอลลาเจน ให้ล้างเซลล์ด้วย PBS และบ่มในสารละลายสำหรับการเพาะเลี้ยง (TrypleExpress) เป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้น เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่และปั่นเหวี่ยงเซลล์ จากนั้นให้แขวนตะกอนเซลล์อย่างระมัดระวังและแบ่งเซลล์ลงในภาชนะเพาะเลี้ยง

อาหารเลี้ยงเชื้อ:

RPMI 1640 ที่มี 10% เซรั่มจากเลือดวัวตัวอ่อน, กลูตามีนเสถียร 2.1 มิลลิโมลาร์ และโซเดียมไฮโดรเจนคาร์บอเนต 2.0 กรัม/ลิตร ใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ PC 12 สื่อเพาะเลี้ยงจะเปลี่ยนใหม่ทุก 2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์

เงื่อนไขการเจริญเติบโต:

เพาะเลี้ยงเซลล์ PC-12 ในตู้อบควบคุมความชื้นที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมเติมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ 5%

การเก็บรักษา:

เซลล์ PC-12 ถูกเก็บรักษาในสถานะไอของไนโตรเจนเหลวหรือที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C เพื่อคงความมีชีวิตของเซลล์ในระยะยาว

กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง:

CM-1 หรือ CM-ACF ใช้สำหรับการแช่แข็งเซลล์ PC12 วิธีการแช่แข็งช้าถูกนำมาใช้ซึ่งอนุญาตให้อุณหภูมิลดลง 1°C วิธีนี้ช่วยป้องกันเซลล์จากการช็อกและรักษาความมีชีวิตของเซลล์ไว้

กระบวนการละลาย

เซลล์ PC-12 ที่ถูกแช่แข็งจะถูกนำมาละลายในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C หลังจากนั้นเติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่และปั่นเหวี่ยงเพื่อช่วยกำจัดองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเซลล์ที่ใช้ในการแช่แข็ง เซลล์ที่รวบรวมได้จะถูกแขวนลอยและแบ่งใส่ลงในขวดเพาะเลี้ยงที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สำหรับการเจริญเติบโตใหม่ การฟื้นตัวจากการแช่แข็งจะใช้เวลาประมาณ 24 ชั่วโมง

ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ:

ห้องปฏิบัติการความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 จำเป็นต้องใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ประสาท PC12

กลุ่มเซลล์ PC12 ของหนูที่เป็นเนื้องอกสีน้ำตาลแดงที่เกาะติดกันซึ่งสังเกตได้ที่กำลังขยาย 10 เท่าและ 20 เท่า

สายเซลล์ PC-12: ข้อได้เปรียบและข้อจำกัด

สายพันธุ์เซลล์ PC-12 มีลักษณะเด่นบางประการที่ทำให้แตกต่างจากสายพันธุ์เซลล์ประสาทอื่นๆ ส่วนนี้จะเจาะลึกถึงข้อดีและข้อจำกัดที่เกี่ยวข้องกับการใช้สายพันธุ์เซลล์นี้ในงานวิจัย

ข้อดี

  • เพาะเลี้ยงง่าย:เซลล์ PC-12 มีความแข็งแรงและเพาะเลี้ยงได้ค่อนข้างง่าย ทำให้สามารถเข้าถึงได้สำหรับห้องปฏิบัติการหลากหลายรูปแบบและวัตถุประสงค์ในการวิจัย
  • การแยกตัวของเซลล์ประสาท:สามารถถูกกระตุ้นให้แยกตัวเป็นเซลล์คล้ายเซลล์ประสาทได้ ซึ่งทำหน้าที่เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาการพัฒนาของระบบประสาท การแยกตัวของเซลล์ และกระบวนการที่เกี่ยวข้องกับการเกิดเซลล์ประสาทใหม่
  • ความหลากหลายในงานวิจัย:เซลล์ PC-12 ถูกนำมาใช้ในงานวิจัยทางประสาทชีววิทยาที่หลากหลาย รวมถึงการศึกษาความเป็นพิษต่อระบบประสาท การปกป้องระบบประสาท และกลไกที่อยู่เบื้องหลังโรคความเสื่อมของระบบประสาท
  • ประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนสูง:แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพการถ่ายโอนยีนสูง ซึ่งช่วยอำนวยความสะดวกในการจัดการทางพันธุกรรมและทำให้เหมาะสมสำหรับการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการแสดงออกและการทำงานของยีน

ข้อจำกัด

  • มีต้นกำเนิดจากสิ่งที่ไม่ใช่มนุษย์:มีต้นกำเนิดจากเนื้องอกเฟโอโครโมไซโตมาของหนู ซึ่งทำให้ข้อจำกัดในการนำไปใช้ในบางสาขาการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับมนุษย์โดยเฉพาะ และอาจไม่สามารถแสดงถึงสรีรวิทยาของระบบประสาทของมนุษย์ได้อย่างสมบูรณ์
  • ความไม่สม่ำเสมอ:เมื่อเซลล์ PC-12 ถูกกระตุ้นให้เกิดการแยกตัว เซลล์เหล่านี้อาจแสดงความไม่สม่ำเสมออย่างมีนัยสำคัญในรูปร่างและหน้าที่ ซึ่งอาจทำให้การตีความผลการทดลองซับซ้อนขึ้น
  • อายุการใช้งานจำกัด:แม้ว่าเซลล์ PC-12 จะเพาะเลี้ยงได้ค่อนข้างง่าย แต่ก็มีอายุการใช้งานจำกัด ซึ่งอาจก่อให้เกิดความท้าทายสำหรับการทดลองระยะยาว

PC-12 Cell Line: เครื่องมืออเนกประสงค์ในการวิจัยทางชีววิทยาประสาทและมะเร็ง

เซลล์ไลน์ PC12 ซึ่งมีต้นกำเนิดจากเนื้องอกเฟโอโครโมไซโตมาของหนู มีบทบาทสำคัญอย่างยิ่งในการวิจัยทางชีววิทยาประสาท โดยได้รับการยอมรับในด้านการแสดงออกของลักษณะเฉพาะของเซลล์ประสาท เช่น การเจริญของเส้นใยประสาทที่ตอบสนองต่อปัจจัยการเจริญของเส้นประสาท (NGF)ความหลากหลายของเซลล์ PC12 ถูกนำมาใช้ประโยชน์อย่างกว้างขวางในทางชีววิทยาประสาทเพื่อสำรวจการแยกตัวเป็นเซลล์ประสาท, การตอบสนองต่อปัจจัยที่ส่งเสริมการเจริญเติบโตของเซลล์ประสาท, และการประเมินความเป็นพิษต่อเซลล์ประสาท ความสามารถพิเศษในการแยกตัวเป็นเซลล์คล้ายเซลล์ประสาทเมื่อได้รับ NGF ทำให้เซลล์เหล่านี้กลายเป็นทรัพยากรที่ขาดไม่ได้สำหรับนักวิจัยที่ศึกษาความซับซ้อนของระบบประสาท

การฟื้นฟูระบบประสาทและการเปลี่ยนแปลงของเซลล์

ที่น่าสนใจคือ การศึกษาหนึ่งได้สำรวจอิทธิพลของเซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อฟันและปัจจัยที่ได้จากเซลล์เหล่านี้ต่อการเปลี่ยนแปลง การอยู่รอด และการขยายตัวของเซลล์ PC12 ซึ่งเปิดเผยแนวทางที่มีแนวโน้มสำหรับการฟื้นฟูระบบประสาท [3] อีกการศึกษาหนึ่งได้เน้นไปที่ Osteocalcin ซึ่งเป็นโปรตีนที่ได้จากกระดูกซึ่งมีคุณสมบัติในการจับแคลเซียม เป็นตัวส่งเสริมการอยู่รอด การเพิ่มจำนวน และการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ PC12 [4] ซึ่งเน้นย้ำถึงศักยภาพของโปรตีนนี้ในการเสริมสร้างคุณสมบัติของเซลล์ประสาท

การตรวจคัดกรองสารเสพติดและการปกป้องระบบประสาท

ประโยชน์ของเซลล์ PC12 ขยายไปถึงการคัดกรองยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการประเมินสารที่มีฤทธิ์ปกป้องและยับยั้งการเสื่อมของระบบประสาท ซึ่งถือเป็นขั้นตอนสำคัญในการแสวงหายารักษาโรคทางระบบประสาทเสื่อมชนิดใหม่ตัวอย่างเช่น งานวิจัยได้เน้นย้ำถึงคุณสมบัติในการปกป้องระบบประสาทของ α-bisabolol ในแบบจำลองโรคพาร์กินสันที่ใช้เซลล์ PC12 ซึ่งแสดงให้เห็นว่า α-bisabolol มีความสามารถในการลดการเกิดอะไมลอยด์และการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส รวมถึงการปรับสมดุลผลกระทบที่เป็นพิษต่อระบบประสาทของอะไมลอยด์เบต้า [5]

การเปลี่ยนแปลงระดับเซลล์และเครือข่ายประสาท

กระบวนการเปลี่ยนแปลงจากเซลล์ PC-12 ไปเป็นเซลล์คล้ายเซลล์ประสาทเริ่มต้นด้วย NGF ซึ่งเป็นโปรตีนที่สำคัญอย่างยิ่งต่อการเจริญเติบโตและการดำรงชีวิตของเซลล์ประสาท การที่เซลล์ PC-12 ถูกกระตุ้นให้สัมผัสกับ NGF จะทำให้เกิดการกระตุ้นเส้นทางภายในเซลล์ที่ซับซ้อน ซึ่งเป็นการเตรียมฐานสำหรับการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ การเปลี่ยนแปลงนี้เป็นการเปิดเผยศักยภาพของเซลล์อย่างค่อยเป็นค่อยไป ซึ่งสามารถสังเกตได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เมื่อเซลล์เริ่มขยายเส้นใยประสาทและสร้างการเชื่อมต่อที่คล้ายกับเครือข่ายของเซลล์ประสาท

การเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาและฟีโนไทป์ของเซลล์ประสาท

การแยกแยะทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาและการทำงานที่สำคัญต่อเซลล์ PC-12 จากรูปแบบเริ่มต้นที่เป็นทรงกลมหรือยืดออกเล็กน้อย ซึ่งเติบโตในสภาพแขวนลอยหรือเป็นชั้นเดียวที่เกาะติด การรักษาด้วย NGF จะทำให้เซลล์เหล่านี้แสดงนิวไรต์ที่ยื่นออกมา ซึ่งบ่งชี้ถึงการเปลี่ยนแปลงอย่างลึกซึ้งไปสู่ลักษณะของเซลล์ประสาท การเจริญเติบโตของนิวไรต์เหล่านี้มีความสำคัญต่อการสื่อสารและการโต้ตอบระหว่างเซลล์ สะท้อนถึงความเชื่อมโยงที่มีอยู่ในเนื้อเยื่อประสาท

การวิจัยมะเร็งและกลไกเซลล์

ในการวิจัยโรคมะเร็ง โมเดลเซลล์ประสาทที่ได้จากเซลล์ PC12 มีความเกี่ยวข้องเนื่องจากมีต้นกำเนิดจากเนื้องอก เซลล์เหล่านี้มีบทบาทสำคัญในการศึกษาการเพิ่มจำนวน การรุกราน และการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็ง งานวิจัยในปี 2020 ได้ศึกษาผลกระทบของสารสกัดจาก Ferula assa-foetida ต่อการเพิ่มจำนวนของเซลล์ PC12 ซึ่งช่วยเปิดเผยถึงศักยภาพในการนำไปใช้เป็นยา [7]

การวิจัยโรคหลอดเลือดสมองและกลยุทธ์การปกป้องระบบประสาท

นอกจากนี้ เซลล์ PC12 ADH ซึ่งเป็นสายพันธุ์ที่เกาะติดกับพื้นผิวของภาชนะเพาะเลี้ยง ยังช่วยให้สามารถวิเคราะห์ลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์และตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้น เช่น การขาดออกซิเจนและกลูโคส ได้อย่างละเอียดลึกซึ้ง จึงเป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการวิจัยโรคหลอดเลือดสมองและการประเมินสารปกป้องระบบประสาท เวลาในการเพิ่มจำนวนเซลล์เป็นสองเท่าอย่างรวดเร็วของเซลล์ PC12 ซึ่งอยู่ในช่วง 24 ถึง 48 ชั่วโมง ยังเน้นย้ำถึงประสิทธิภาพในการศึกษาแบบไดนามิกที่อัตราการเพิ่มจำนวนของเซลล์มีความสำคัญอย่างยิ่ง

ข้อสรุปเกี่ยวกับแอปพลิเคชันเซลล์ PC12

โดยสรุป เซลล์ PC12 และอนุพันธ์ของเซลล์เหล่านี้เป็นแบบจำลองที่มีความหลากหลายสำหรับการประยุกต์ใช้ในงานวิจัยที่หลากหลาย ตั้งแต่ชีววิทยาประสาท การค้นคว้ายา ไปจนถึงการศึกษาโรคมะเร็ง แต่ละการประยุกต์ใช้ให้ข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญเกี่ยวกับการตอบสนองของเซลล์ ซึ่งช่วยเปิดทางให้เกิดนวัตกรรมทางการรักษา และเพิ่มความเข้าใจของเราเกี่ยวกับกระบวนการทางชีวภาพที่ซับซ้อน

รับสายพันธุ์เซลล์ PC-12 ที่แข็งแกร่งและหลากหลาย: เหมาะสำหรับการวิจัยเซลล์ประสาทและเพาะเลี้ยงได้ง่าย

งานวิจัยที่เน้นการใช้เซลล์ PC-12

เซลล์ PC-12 ซึ่งได้มาจากเนื้องอกต่อมหมวกไตของหนู เป็นแบบจำลองที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในชีววิทยาประสาท โดยให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงของเซลล์ประสาท ความเป็นพิษต่อระบบประสาท และอื่นๆ อีกมากมาย ต่อไปนี้คืองานวิจัยที่น่าสนใจบางชิ้นที่ใช้เซลล์เหล่านี้:

ทรัพยากรที่ครอบคลุมสำหรับการวิจัยเซลล์ PC-12

เข้าถึงแหล่งข้อมูลหลากหลายเพื่อความเข้าใจเชิงลึกและการจัดการเซลล์ PC-12 ครอบคลุมเทคนิคการเพาะเลี้ยงเซลล์ โปรโตคอลการเปลี่ยนสภาพเซลล์ และอื่นๆ:

  • คู่มือการแยกเซลล์ PC-12:บทความนี้ให้ภาพรวมอย่างละเอียดเกี่ยวกับโปรโตคอลการแยกเซลล์ PC12 โดยใช้ NGF รวมถึงวิธีการสำหรับการทดสอบที่เกี่ยวข้องกับการแยกเซลล์.
  • วิดีโอสอนการถ่ายยีนในเซลล์ PC12:ค้นพบความซับซ้อนของการถ่ายยีนในเซลล์ PC12 ผ่านวิดีโอคู่มือฉบับละเอียดนี้ เหมาะสำหรับนักวิจัยทั้งมือใหม่และผู้มีประสบการณ์.
  • การควบคุมการเพาะเลี้ยงเซลล์ PC-12 อย่างเชี่ยวชาญ:สำรวจรายละเอียดปลีกย่อยของการเพาะเลี้ยงเซลล์ PC-12 ด้วยโปรโตคอลที่ครอบคลุมนี้ ซึ่งจำเป็นสำหรับการรักษาการเพาะเลี้ยงเซลล์ให้แข็งแรงและมีสุขภาพดี.

คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับสายเซลล์ PC-12: ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการเพาะเลี้ยง การเปลี่ยนแปลงลักษณะเฉพาะ และการประยุกต์ใช้ในงานวิจัย

เอกสารอ้างอิง

  1. อู๋, ซี., และคณะ,อิคาริอินส่งเสริมการซ่อมแซมเซลล์ PC12 โดยยับยั้งความเครียดของเอนโดพลาสมิกเรติคูลัม.BMC Complement Med Ther, 2021.21(1): หน้า 69.
  2. สุลต่าน, เอ็น., และคณะ,เซลล์ต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อฟันกระตุ้นการแยกตัวเป็นเซลล์ประสาทของเซลล์ PC12.การวิจัยการฟื้นฟูระบบประสาท, 2021.16(9): หน้า 1821.
  3. Ando, E., et al.,Osteocalcin ส่งเสริมการเพิ่มจำนวน การเปลี่ยนแปลงลักษณะเฉพาะ และการอยู่รอดของเซลล์ PC12.Biochemical and Biophysical Research Communications, 2021.557: หน้า 174-179.
  4. Shanmuganathan, B., et al.,ผลของ α-bisabolol ต่อต้านการสร้างอะไมลอยด์และต้านการตายของเซลล์ในเซลล์ PC12 ที่ถูกกระตุ้นด้วย Aβ.European journal of medicinal chemistry, 2018.143: หน้า 1196-1207.
  5. ฟูจิตะ, เค., พี. ลาซารอวิชี, และ จี. กูรอฟฟ์,การควบคุมการแยกตัวของเซลล์มะเร็งต่อมหมวกไตชนิดพีซี12.Environ Health Perspect, 1989.80: หน้า 127-42.
  6. Abroudi, M., และคณะ,ฤทธิ์ต้านการเพิ่มจำนวนเซลล์ของสารสกัดจาก Ferula assa-foetida ต่อเซลล์มะเร็ง PC12 และ MCF7.Int J Biomed Engg Clin Sci, 2020.6(3): หน้า 60-67.

เราตรวจพบว่าคุณอยู่ในประเทศอื่นหรือกำลังใช้ภาษาเบราว์เซอร์ที่แตกต่างจากที่คุณเลือกไว้ปัจจุบัน คุณต้องการยอมรับการตั้งค่าที่แนะนำหรือไม่

ปิด