เซลล์ 4T1 - ข้อมูลสำคัญในการวิจัยและการประยุกต์ใช้เซลล์มะเร็งเต้านม
4T1เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเต้านมในหนูที่สามารถปลูกถ่ายได้ สายพันธุ์นี้ถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองเนื้องอกในหลอดทดลองที่มีความเหมือนกันทางพันธุกรรมเพื่อศึกษาเกี่ยวกับมะเร็งเต้านมในมนุษย์ เซลล์ 4T1 มีความสามารถในการรุกรานและก่อเนื้องอกสูง มีแนวโน้มที่จะแพร่กระจายจากตำแหน่งเนื้องอกหลักในต่อมน้ำนมไปยังตำแหน่งอื่น ๆ รวมถึงตับ ต่อมน้ำเหลือง ปอด กระดูก และสมอง จึงเหมาะสำหรับการศึกษาการแพร่กระจายของมะเร็งเต้านม [1]
ลักษณะทั่วไปและแหล่งกำเนิดของเซลล์ 4T1
ความรู้เกี่ยวกับต้นกำเนิดและลักษณะทั่วไปของสายเซลล์เป็นสิ่งสำคัญอย่างยิ่งก่อนเริ่มทำงานกับมัน ในส่วนนี้ เราได้กล่าวถึงพื้นฐานของเซลล์มะเร็งเต้านม 4T1 ตัวอย่างเช่น เซลล์ 4T1 คืออะไร? ลักษณะของสายเซลล์ 4t1 คืออะไร? ต้นกำเนิดของสายเซลล์ 4T1 คืออะไร? รูปร่างของสายเซลล์ 4T1 เป็นอย่างไร?
- 4T1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเต้านมที่มีต้นกำเนิดจากเนื้องอกเต้านมซึ่งเกิดขึ้นเองในหนูสายพันธุ์ BALB/c เซลล์เหล่านี้มีความรุกรานสูงและก่อให้เกิดเนื้องอกได้ง่าย โดยจำลองพฤติกรรมของมะเร็งเต้านมในมนุษย์ได้อย่างใกล้ชิดทั้งในแง่ของการเจริญเติบโตและการแพร่กระจายไปยังอวัยวะอื่น โดยเฉพาะอย่างยิ่ง แบบจำลองเนื้องอก 4T1 นี้ถูกนำมาใช้ในการศึกษาวิจัยมะเร็งเต้านมชนิดทริปเปิลเนกาทีฟ (TNBC)
- เซลล์ 4T1 เป็นเซลล์ที่เกาะติดและมีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิว
เซลล์ไลน์ 4T1 เทียบกับ EMT-6
4T1 และ EMT-6 เป็นโมเดลเซลล์หนูที่ไม่ก่อให้เกิดภูมิคุ้มกัน สำหรับการศึกษาโรคมะเร็งเต้านมชนิดทริปเปิลเนกาทีฟ ในที่นี้ 4T1 เป็นเซลล์เนื้องอกที่มีความก้าวร้าวและรุกรานมากกว่า EMT-6 โดยมีคุณสมบัติการรุกรานน้อยกว่า [2]
เซลล์ 4T1 เทียบกับเซลล์ 4T07
4T07 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งจากหนูเช่นกัน ความแตกต่างหลักระหว่างเซลล์ 4T1 และ 4T07 คือ เซลล์ 4T1 สามารถออกจากตำแหน่งเนื้องอกหลักและแพร่กระจายไปก่อให้เกิดการแพร่กระจายทุติยภูมิที่มองเห็นได้ ในขณะที่เซลล์ 4T07 ไม่สามารถก่อให้เกิดการแพร่กระจายทุติยภูมิที่มองเห็นได้แม้ว่าจะออกจากตำแหน่งเนื้องอกหลักก็ตาม [3]
การเพาะเลี้ยงข้อมูลของเซลล์ไลน์ 4T1
สายพันธุ์เซลล์มะเร็งเต้านม 4T1 มีศักยภาพในการนำไปใช้ในงานวิจัยทางชีวการแพทย์อย่างกว้างขวาง สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์เหล่านี้ คุณควรศึกษาประเด็นสำคัญต่อไปนี้ ได้แก่ อะไรคือระยะเวลาการเพิ่มจำนวนสองเท่าของเซลล์ 4T1? วิธีการเพาะเลี้ยงเซลล์ 4T1 เป็นอย่างไร? ความหนาแน่นในการเพาะเลี้ยงเซลล์ 4T1 ควรเป็นเท่าใด?
จุดสำคัญในการเพาะเลี้ยงเซลล์ 4T1
|
เวลาสองเท่า: |
เวลาเฉลี่ยที่ประชากรเพิ่มขึ้นเป็นสองเท่าที่รายงานสำหรับเซลล์มะเร็งเต้านม 4T1 คือ 14 ชั่วโมง |
|
ติดกันหรือแขวนลอย: |
4T1 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่เกาะติด |
|
อัตราส่วนการเพาะปลูกย่อย: |
แนะนำให้ใช้สัดส่วนการแบ่งเซลล์ 1:6 และ 1:8 สำหรับเซลล์มะเร็งเต้านมชนิด 4T1 triple-negative ในการแบ่งเซลล์ ให้ล้างเซลล์ด้วย PBS และบ่มกับเอนไซม์ Accutase เป็นเวลา 8 ถึง 10 นาที จากนั้นแยกเซลล์ที่หลุดออกด้วยการปั่นเหวี่ยง และแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ นำเซลล์ที่แขวนลอยแล้วไปแบ่งลงในขวดเลี้ยงเซลล์ใหม่เพื่อเพาะเลี้ยงต่อไป |
|
อาหารเลี้ยงเชื้อ: |
RPMI 1640 เป็นอาหารเลี้ยงเซลล์ที่ใช้สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ 4T1 โดยเติมเซรั่มจากเลือดวัวตัวเมียที่ยังไม่เจริญพันธุ์ 10% (FBS), โซเดียมไฮโดรเจนคาร์บอเนต 2.0 กรัมต่อลิตร (NaHCO3) และกลูตามีนชนิดเสถียร 2.1 มิลลิโมลาร์ (mM) ลงในอาหารเลี้ยงเซลล์เพื่อให้เหมาะสมกับการเจริญเติบโตของเซลล์ |
|
เงื่อนไขการเจริญเติบโต: |
เซลล์มะเร็ง 4T1 ถูกเก็บไว้ในตู้เพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37°C พร้อมความชื้นและมีการเติมก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์5% |
|
การเก็บรักษา: |
เซลล์ 4T1 ควรเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำกว่า -150°C หรือในตู้แช่แข็งไฟฟ้าหรือในสถานะไอของไนโตรเจนเหลว เพื่อรักษาความมีชีวิตของเซลล์ |
|
กระบวนการแช่แข็งและตัวกลาง: |
CM-1 หรือ CM-ACF แนะนำสำหรับเซลล์ไลน์ 4T1 วิธีการแช่แข็งช้าเป็นวิธีที่ต้องการ เนื่องจากช่วยปกป้องความมีชีวิตของเซลล์โดยการลดอุณหภูมิลงอย่างค่อยเป็นค่อยไปที่ 1°C |
|
กระบวนการละลาย |
หลอดบรรจุเซลล์แช่แข็งจะถูกเก็บไว้ในอ่างน้ำที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลาไม่กี่วินาทีจนกว่าเซลล์จะละลายและมีเพียงก้อนน้ำแข็งขนาดเล็กเหลืออยู่ จากนั้นเซลล์เหล่านี้จะถูกแขวนลอยในอาหารเลี้ยงเชื้อใหม่และเทลงในขวดเพาะเลี้ยง หลังจากบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง อาหารเลี้ยงเชื้อจะถูกเปลี่ยนเพื่อกำจัดส่วนประกอบของอาหารเลี้ยงเชื้อที่ใช้ในการแช่แข็ง |
|
ระดับความปลอดภัยทางชีวภาพ: |
ห้องปฏิบัติการความปลอดภัยทางชีวภาพระดับ 1 แนะนำสำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์มะเร็งเต้านม 4T1 |
สายเซลล์ 4T1: ข้อดีและข้อเสีย
ส่วนนี้จะครอบคลุมถึงข้อดีและข้อเสียที่เกี่ยวข้องกับแบบจำลองการแพร่กระจาย 4T1
ข้อดี
ข้อได้เปรียบหลักของเซลล์ไลน์ 4T1 คือ:
- การก่อให้เกิดเนื้องอก:
4T1 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่มีความสามารถในการก่อเนื้องอกสูง เซลล์เหล่านี้มีความสามารถในการสร้างแบบจำลองหนูทดลองมะเร็งเต้านมชนิด 4T1 syngeneic เมื่อฉีดเข้าไปในหนู ดังนั้น แบบจำลอง 4T1 จึงเหมาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาการพัฒนา การเจริญเติบโต และการแพร่กระจายของเนื้องอก นอกจากนี้ ยังมีประโยชน์ในการคัดกรองและประเมินประสิทธิภาพของยาในการรักษา
- แบบจำลองการแพร่กระจายในหลอดทดลอง:
แบบจำลอง 4T1 มีแนวโน้มการแพร่กระจายตามธรรมชาติซึ่งช่วยให้นักวิจัยสามารถศึกษาและวิเคราะห์กลไกและเส้นทางที่เกี่ยวข้องในกระบวนการแพร่กระจายได้อย่างมีประสิทธิภาพ นอกจากนี้ เซลล์ 4T1 ยังมีความต้านทานต่อ 6-thioguanine ซึ่งช่วยให้การตรวจจับเซลล์แพร่กระจายขนาดเล็กมีความแม่นยำมากขึ้นเมื่อเทียบกับแบบจำลองอื่น ๆ เนื่องจากไม่จำเป็นต้องชั่งน้ำหนักอวัยวะเป้าหมายและนับก้อนเนื้อ
ข้อเสีย
ข้อเสียที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ไลน์ 4T1 คือ:
- ความก้าวร้าว/อัตราการเติบโตอย่างรวดเร็ว:
สายพันธุ์เซลล์ 4T1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเต้านมชนิดทริปเปิลเนกาทีฟที่มีความรุนแรงสูงมาก เนื่องจากอัตราการเจริญเติบโตที่รวดเร็ว การใช้สายพันธุ์เซลล์นี้ในการทดลองระยะยาวและการควบคุมตัวแปรในการทดลองจึงเป็นเรื่องที่ท้าทาย
ซื้อสายพันธุ์เซลล์ 4T1: แบบจำลองมะเร็งเต้านมคุณภาพสูง
4T1 Cell Line: การประยุกต์ใช้ในงานวิจัยมะเร็ง
สายเซลล์ของหนูโมเดล 4T1 เป็นเครื่องมือวิจัยที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งและการประเมินการรักษาใหม่ ๆ การประยุกต์ใช้หลักของเซลล์ 4T1 มีดังนี้:
ชีววิทยาของมะเร็ง
เซลล์ไลน์ 4T1 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาการพัฒนาและการเจริญเติบโตของมะเร็ง เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่เหมาะสมสำหรับการตรวจสอบและสำรวจกลไกทางเซลล์และโมเลกุลต่างๆ ที่เกี่ยวข้องกับการลุกลามของเนื้องอกและการแพร่กระจายของมะเร็ง นอกจากนี้ ยังอาจเปิดเผยบทบาทของเส้นทางการส่งสัญญาณของเซลล์ สภาพแวดล้อมจุลภาค และการแสดงออกของยีนในกระบวนการเหล่านี้ได้อีกด้วยการวิจัยที่ดำเนินการในปี 2019 ได้ใช้เซลล์ 4T1 เพื่อค้นหาสาเหตุที่อยู่เบื้องหลังการบุกรุกและการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็ง ผลการศึกษาพบว่ายีน STAT3, MMP2, และ MMP9 มีส่วนเกี่ยวข้อง และการยับยั้งยีนเหล่านี้สามารถจำกัดการแพร่กระจายและการบุกรุกของเซลล์มะเร็งได้อย่างมีนัยสำคัญ [4] การศึกษาที่คล้ายกันยังชี้ให้เห็นถึงเส้นทางการส่งสัญญาณอื่น ๆ ที่เกี่ยวข้องกับการพัฒนาของก้อนมะเร็งและการแพร่กระจายของมะเร็ง
นอกจากนี้ แบบจำลอง 4T1 มีบทบาทสำคัญในการทำความเข้าใจสภาพแวดล้อมของมะเร็งเต้านม รวมถึงการแทรกซึมของเซลล์ภูมิคุ้มกันและการเจริญเติบโตของเนื้องอกหลักการศึกษาที่มุ่งเน้นไปที่สภาพแวดล้อมของเนื้องอก 4T1 ได้แสดงให้เห็นถึงข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญเกี่ยวกับบทบาทของเซลล์ภูมิคุ้มกันและไซโตไคน์ เช่น การแสดงออกของ CXCL13 ในการเจริญเติบโตของเนื้องอก นอกจากนี้ โมเดลนี้ยังช่วยในการตรวจสอบพื้นที่เฉพาะสำหรับการแพร่กระจายของมะเร็งและการแพร่กระจายของเนื้องอก โดยเฉพาะอย่างยิ่งในมะเร็งเต้านมระยะสุดท้ายที่มีการตั้งถิ่นฐานของมะเร็งเต้านมแพร่หลาย
การวิจัยการบำบัดโรคมะเร็ง
สายเซลล์ 4T1 ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยการรักษามะเร็งสำหรับการคัดกรองและประเมินการรักษาใหม่ ๆ การศึกษาหนึ่งได้สำรวจศักยภาพในการเป็นพิษต่อเซลล์ของอนุภาคนาโนเหล็กที่สังเคราะห์ด้วยวิธีสีเขียวจากสารสกัดโรสแมรี่ (Rosemary-FeNPs) และสารสกัดบริสุทธิ์จากโรสแมรี่ต่อสายเซลล์ 4T1 ผลการวิจัยเสนอว่า Rosemary-FeNPs มีแนวโน้มที่ดีกว่าสารสกัดบริสุทธิ์ [5]ในทำนองเดียวกัน การศึกษาที่ดำเนินการในปี 2021 ได้ตรวจสอบศักยภาพในการต้านเนื้องอกของสารสกัดจากขิงในเซลล์มะเร็งเต้านม 4T1 และแบบจำลองหนู 4T1 [6]
นอกเหนือจากสารสกัดจากธรรมชาติแล้ว สายพันธุ์เซลล์ 4T1 ยังถูกใช้ในการประเมินประสิทธิภาพของยาเคมีบำบัดแบบดั้งเดิมอีกด้วย ตัวอย่างเช่น งานวิจัยที่ศึกษาการผสมผสานระหว่างซิสพลาตินกับวิธีการรักษาอื่น ๆ พบว่าสามารถเพิ่มอัตราการตายของเซลล์มะเร็งและลดการลุกลามของเนื้องอกในแบบจำลอง 4T1 ได้ การนำไฟร์ฟลายลูซิเฟอเรสเข้าสู่เซลล์ 4T1 ยังช่วยให้สามารถถ่ายภาพการเจริญเติบโตของเนื้องอกและลักษณะการแพร่กระจายแบบเรียลไทม์ได้ ซึ่งช่วยให้ประเมินผลกระทบของการรักษาต่าง ๆ ได้ง่ายขึ้น
นอกจากนี้ ความต้านทานของเซลล์ไลน์ 4T1 ต่อ 6-thioguanine ยังช่วยอำนวยความสะดวกในการศึกษาเซลล์ไมโครเมตาสตาซิส ซึ่งช่วยปรับปรุงการตรวจจับและการวิเคราะห์การแพร่กระจายของมะเร็ง เซลล์ไลน์นี้ยังมีบทบาทสำคัญในการศึกษาภูมิคุ้มกันต้านมะเร็งและผลของการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกัน โดยเฉพาะในบริบทของแบบจำลองหนูที่มีการปลูกถ่ายเนื้องอกในตำแหน่งปกติ ซึ่งนักวิจัยสามารถจำลองมะเร็งในมนุษย์ได้อย่างใกล้ชิด
โดยรวมแล้ว สายพันธุ์เซลล์ 4T1 ยังคงเป็นเครื่องมือที่ขาดไม่ได้ในงานวิจัยด้านมะเร็งวิทยา ตั้งแต่การทำความเข้าใจกลไกพื้นฐานของชีววิทยาของมะเร็ง ไปจนถึงการพัฒนาและทดสอบกลยุทธ์การรักษาใหม่ๆ
เซลล์ 4T1: สิ่งพิมพ์งานวิจัย
บทความส่วนนี้จะครอบคลุมสิ่งพิมพ์ที่น่าสนใจและมีการอ้างอิงมากที่สุดเกี่ยวกับเซลล์ 4T1
บทความนี้ได้รับการตีพิมพ์ในปี 2018 ในวารสาร Journal of Photochemistry and Photobiology งานวิจัยนี้เสนอว่าอนุภาคนาโนเงินสังเคราะห์จากMadhuca longifolia มีฤทธิ์ต้านการเพิ่มจำนวน เซลล์ในเซลล์มะเร็ง 4T1 ผ่านการย่อยสลายผนังเซลล์และการสร้าง ROS
ความเป็นพิษต่อเซลล์และการเกิดอะพอพโทซิสของเวอร์บาสโคไซด์ต่อเซลล์มะเร็งเต้านมสายพันธุ์ 4T1
การศึกษาในวารสาร BMC Pharmacology and Toxicology (2021) ได้เสนอว่า เวอร์บาสโคไซด์ ซึ่งเป็นสารประกอบธรรมชาติ ก่อให้เกิดผลของการตายแบบอะพอพโทซิสในเซลล์มะเร็งเต้านม 4T1 ผ่านการส่งสัญญาณ TLR4
งานวิจัยนี้ได้รับการตีพิมพ์ในวารสาร Integrative Cancer Therapies ในปี 2020 การศึกษานี้ใช้เซลล์ 4T1 เพื่อพัฒนาแบบจำลองหนูที่มีลักษณะทางพันธุกรรมเดียวกัน (4T1 syngeneic mouse model) และสำรวจศักยภาพในการต้านมะเร็งของยูพาโทริน (Eupatorin) โดยใช้แบบจำลองดังกล่าว ยูพาโทรินสามารถชะลอการเจริญเติบโตของเนื้องอกในแบบจำลองหนู 4T1 ได้
งานวิจัยนี้ซึ่งตีพิมพ์ในวารสาร Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018) ได้เสนอว่าสมุนไพรทางการแพทย์ Viola odorata มีศักยภาพในการออกฤทธิ์ทำลายเซลล์ต่อเซลล์ 4T1
การศึกษานี้เสนอว่า นาโนพาร์ติเคิลไขมันแข็งบรรจุโดเซแทกเซล (DTX-loaded SLNs) สามารถเป็นสารที่มีศักยภาพในการรักษามะเร็งเต้านมและป้องกันการแพร่กระจายของมะเร็ง เนื่องจากสามารถจำกัดการเจริญเติบโตของมะเร็งและการแพร่กระจายไปยังปอดของเซลล์ 4T1
ทรัพยากรสำหรับเซลล์ไลน์ 4T1: โปรโตคอล, วิดีโอ, และอื่น ๆ
ต่อไปนี้คือแหล่งข้อมูลบางส่วนเกี่ยวกับเซลล์ 4T1:
- การสอนการถ่ายยีน 4T1:วิดีโอนี้เป็นคู่มือแบบขั้นตอนต่อขั้นตอนสำหรับการทำการถ่ายยีนในเซลล์ไลน์ 4T1
- การเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ย่อย: วิดีโอนี้อธิบายขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์สายพันธุ์ย่อยสำหรับเซลล์ที่เกาะติด
ลิงก์ต่อไปนี้ประกอบด้วยโปรโตคอลการเพาะเลี้ยงเซลล์สำหรับเซลล์ 4T1:
- สายเซลล์ 4T1: ลิงก์เว็บไซต์นี้มีข้อมูล ที่เป็นประโยชน์ทั้งหมดเกี่ยวกับการจัดการเซลล์เพาะเลี้ยง 4T1 ซึ่งประกอบด้วยข้อมูลเกี่ยวกับอาหารเลี้ยงเชื้อ และขั้นตอนการจัดการสำหรับเซลล์ที่ผ่านการแช่แข็งและเซลล์ที่กำลังเพิ่มจำนวน
คำถามที่พบบ่อยเกี่ยวกับสายเซลล์ 4T1
เอกสารอ้างอิง
- Pulaski, B.A. และ S. Ostrand-Rosenberg,โมเดลเนื้องอกเต้านม 4T1 ในหนูทดลอง.Curr Protoc Immunol, 2001.บทที่ 20: หน้า 20.2.
- แม็กซ์เวลล์, เค.จี.,การปรับเปลี่ยนภูมิคุ้มกันของเซลล์มะเร็งเต้านมเพื่อการฉีดวัคซีนทั้งก้อนเนื้องอก.2016.
- Walker, I., และคณะ,เนื้องอกเต้านมกระตุ้นการแสดงออกของไซโตไคน์ที่ส่งเสริมการอักเสบในสมองส่วนกลาง แต่ไม่ก่อให้เกิดความบกพร่องทางพฤติกรรมในหนู Balb/C.Scientific Reports, 2017.7(1): หน้า 1-13.
- หลี่, ย., และคณะ,การยับยั้งเส้นทางสัญญาณ Stat3 โดยสารสกัดจากธรรมชาติ pectolinarigenin ลดการแพร่กระจายของมะเร็งเต้านม.Frontiers in Pharmacology, 2019.10: หน้า 1195.
- Farshchi, H.K., et al.,การสังเคราะห์อนุภาคนาโนเหล็กด้วยสารสกัดจากโรสแมรี่และการประเมินผลความเป็นพิษต่อเซลล์มะเร็ง.ชีวเร่งปฏิกิริยาและเทคโนโลยีชีวภาพทางการเกษตร, 2018.16: หน้า 54-62.
- โกลิซาเดห์, เอ.พี., และคณะ,ผลกระทบของสารสกัดขิงต่อเซลล์มะเร็งเต้านมสายพันธุ์ 4T1 ในหนู Balb/c.Clinical Cancer Drugs, 2021.8(1): หน้า 43-49.