Celulele SiHa - fac lumină în cercetarea cancerului de col uterin

CeluleleSiHa sunt celule de cancer cervical utilizate pe scară largă în cercetarea biomedicală. Ele sunt gazde excelente pentru transfecție și, prin urmare, sunt potrivite pentru studiile privind expresia genelor. Datorită originii lor umane și relevanței cancerului de col uterin, aceste celule sunt utilizate în principal în studiile de biologie a cancerului, virologie și dezvoltare a medicamentelor.

Caracteristicile generale și originea celulelor SiHa

Înțelegerea originii și a atributelor generale ale unei linii celulare este esențială, deoarece influențează utilizarea acesteia în cadrul cercetării dumneavoastră. În această secțiune a articolului, veți afla despre originea liniei celulare SiHa, caracteristicile distinctive și multe altele: Ce este linia celulară canceroasă SiHa? Ce sunt celulele SiHa HPV? Care este originea liniei celulare SiHa? Care este morfologia SiHa?

SiHa, linia celulară de carcinom cervical, a fost derivată din fragmente ale unei biopsii uterine primare a unei femei asiatice (55 de ani) cu cancer cu celule scuamoase [1].
Linia celulară SiHa prezintă un cariotip hipertriploid. Majoritatea celulelor au un număr mediu de cromozomi cuprins între 69 și 72. Cu toate acestea, aproximativ 24% din celule au un număr cromozomial modal de 71.
Celulele SiHa sunt pozitive la virusul papiloma uman 16. Ele prezintă o integrare de aproximativ 1 până la 2 copii ale genomului HPV per celulă [2].
Aceste celule canceroase cervicale prezintă o morfologie epitelială.

Diviziunea la microscop a celulelor canceroase de col uterin HeLa.

Linia celulară SiHa: Informații despre cultură

Menținerea unei culturi de linie celulară nu este ușoară până când nu cunoașteți toate punctele cheie pentru cultivarea acesteia. Ar trebui să știți: Care este timpul de dublare al celulei SiHa? Ce este mediul celular SiHa? Cum se cultivă linia celulară SiHa?

Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor SiHa

Timpul de dublare:	Timpul de dublare pentru celulele SiHa este de aproximativ 17 ore.
Aderente sau în suspensie:	SiHa este o linie celulară aderentă.
Raport de subcultivare:	Raportul de subcultivare pentru celulele SiHa este de 1:2 până la 1:4. Pentru transfer, celulele aderente sunt clătite cu 1x PBS. Se adaugă soluție de Accutase, iar celulele sunt incubate timp de 8 până la 10 minute la temperatura ambiantă. Apoi, se adaugă mediul de cultură, iar celulele sunt centrifugate. Peletul celular se resuspendă, iar celulele se toarnă în flaconul nou pentru cultură.
Mediu de creștere:	Pentru creșterea ideală a celulelor SiHa se utilizează mediul minim esențial Eagle (EMEM) care conține 10% FBS, 2 mM L-Glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și Earle's Balanced Salt Solution (EBSS). Mediul este înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:	Celulele SiHa sunt menținute într-un incubator umidificat la 37°C, cu un aport de 5% CO2.
Depozitare:	Fiolele congelate ale liniei de celule SiHa pentru cancerul de col uterin sunt depozitate la temperaturi sub -150°C într-un congelator electric sau în faza de vapori a azotului lichid pentru o perioadă mai lungă.
Procesul și mediul de congelare:	Mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF este utilizat pentru congelarea celulelor SiHa. Celulele sunt congelate folosind o metodă de congelare lentă care permite o scădere de numai 1 °C pe minut pentru a proteja viabilitatea celulelor.
Procesul de decongelare:	Celulele congelate sunt menținute timp de 40 până la 60 de secunde într-o baie de apă la 37 °C până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Ulterior, se adaugă mediu de creștere proaspăt, iar celulele sunt centrifugate pentru a elimina componentele mediului de congelare. Peletul celular este resuspendat, iar celulele sunt distribuite într-un balon de cultură pentru creștere.
Nivelul de biosecuritate:	Pentru manipularea și întreținerea culturilor de celule SiHa este necesar un laborator de nivel 1 de biosecuritate.

Un strat aderent de celule SiHa la măriri de 10× și 20×.

Avantaje și dezavantaje ale liniei celulare SiHa

Ca și alte linii celulare de carcinom uman, SiHa posedă, de asemenea, unele caracteristici distincte asociate cu anumite avantaje și dezavantaje. În cele ce urmează, am discutat câteva dintre cele semnificative.

Avantajele liniei celulare de cancer de col uterin SiHa

Model de cancer de col uterin
- Derivat din carcinomul cervical cu celule scuamoase.
- Utilizată pentru a studia mecanismele, creșterea și dezvoltarea cancerului de col uterin.
- Exprimă genele p53+ și pRB+ care sunt legate de repararea ADN-ului, reglarea ciclului celular și suprimarea tumorilor.
Potențial tumorigen
- Celulele SiHa sunt tumorigene și pot induce tumori epidermoide de gradul III slab diferențiate la șoarecii nude.
- Utilizate pentru cercetarea in vivo a cancerului și testarea tratamentelor anticancer.

Dezavantaje ale celulelor SiHa

Rata de proliferare
- Celulele SiHa proliferează rapid, ducând la o creștere excesivă.
- Necesită pasări frecvente, ceea ce crește riscul de instabilitate genetică, care poate afecta comportamentul celular în timp.

Aplicații de cercetare ale celulelor SiHa

Linia celulară SiHa este utilizată pe scară largă în cercetarea cancerului de col uterin. Câteva aplicații specifice ale acestei linii celulare sunt discutate aici.

Studii legate de papilomavirusul uman (HPV): Celulele SiHa sunt HPV 16 pozitive, fiind astfel entități valoroase pentru studierea infecției cu virusul papiloma uman, a mecanismelor sale moleculare și a rolului său în dezvoltarea și progresia cancerului de col uterin. De asemenea, cercetătorii utilizează aceste celule pentru a studia replicarea virală, integrarea și impactul acesteia asupra proceselor celulelor gazdă. Un studiu efectuat în 2020 a utilizat linia celulară SiHa pentru a examina rolul oncoproteinelor HPV E6/E7 în dezvoltarea cancerului de col uterin prin țintirea acestora cu ajutorul tehnologiei CRISPR. Rezultatele au arătat că knockdown-ul genelor E6/E7 a cauzat inhibarea creșterii și apoptoza celulelor SiHa. Prin urmare, aceste gene virale pot servi drept ținte medicamentoase cruciale pentru dezvoltarea terapiilor împotriva cancerului de col uterin asociat HPV [3].
Biologia cancerului: Celulele SiHa servesc drept model neprețuit pentru studiul biologiei cancerului de col uterin, inclusiv dezvoltarea, progresia, metastaza și invazia cancerului. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a explora mutațiile genetice și căile moleculare subiacente care contribuie la dezvoltarea și creșterea cancerului de col uterin; de exemplu, un studiu a utilizat celulele SiHa și a constatat că SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) suprareglementată încurajează proliferarea celulelor cancerului de col uterin prin activarea cascadei MAPK [4].
Screeningul și testarea medicamentelor: SiHa este o linie de cancer de col uterin utilizată pe scară largă pentru evaluarea eficacității potențialelor medicamente anticancerigene specifice cancerului de col uterin asociat cu HPV. Cercetătorii explorează potențialul antiproliferativ, apoptotic și antimetastatic al medicamentelor utilizând aceste celule. Cum ar fi un studiu efectuat în 2019 care a investigat potențialul citotoxic al extractelor de fructe Vatica diospyroides Symington Type SS pe linia celulară de cancer de col uterin SiHa [5].

Celule SiHa pentru cercetarea dumneavoastră!

430,00 EUR*

Conținut: 1.5 milliliter

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 305023

Publicații de cercetare cu celule SiHa

Unele publicații de cercetare semnificative și citate frecvent prezintă linia celulară SiHa de carcinom scuamos cervical.

Efectul antitumoral al aloe-emodin asupra celulelor de cancer de col uterin a fost asociat cu papilomavirusul uman E6/E7 și metabolismul glucozei

Această publicație în OncoTargets and Therapy (2019) a propus că un compus natural aloe-emodin exercită efecte apoptotice asociate HPV E6/E7 și metabolismului glucozei în celulele canceroase cervicale SiHa.

Evaluarea potențialului anticancerigen al extractului de frunze de Excoecaria agallocha (L.) pe linia celulară de cancer de col uterin uman (SiHa) și evaluarea mecanismului de acțiune subiacent

Acest articol a fost publicat în Future Journal of Pharmaceutical Sciences în 2022. Acest studiu a investigat activitățile antitumorale ale extractului de frunze de plante Excoecaria agallocha (L.) în linia celulară de cancer cervical SiHa.

Efectul antiproliferativ al 1, 10-fenantrolinei cuplate la nanoparticulele de ZnO sulfat în linia celulară de cancer de col uterin SiHa

Acest studiu publicat în Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022) a propus că molecula de 1, 10-fenantrolină, la cuplarea cu nanoparticule de sulfat de zinc, exercită efecte antiproliferative semnificative în celulele SiHa.

Astragalosida IV inhibă invazia și metastaza celulelor canceroase cervicale SiHa prin intermediul căilor PI3K și MAPK mediate de TGF-β1

Această cercetare a fost publicată în Oncology Reports în 2019. Studiul a arătat că Astragalosida IV, un produs natural, suprimă migrația și invazia celulelor SiHa prin modularea căilor de semnalizare PI3K și MAPK mediate de TGF-β1.

IFI16 promovează progresia cancerului de col uterin prin upregularea PD-L1 în imunomicroenvironment prin calea STING-TBK1-NF-kB

Acest studiu publicat în Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) a arătat că IFI16 (interferon-gamma inducible protein 16) reglează gena PD-L1 prin activarea căii STING-TBK1-NF-kB pentru a încuraja creșterea celulelor canceroase cervicale SiHa.

Resurse pentru linia celulară SiHa: Protocoale, videoclipuri și multe altele

Iată câteva resurse online care prezintă celulele SiHa.

Transfecția celulelor SiHa: Acest articol de cercetare conține un protocol pentru întreținerea celulelor canceroase cervicale SiHa și pentru transfecția celulelor SiHa.

Următorul link conține informații privind cultura celulară pentru celulele SiHa.

Linia celulară SiHa: Acest site web conține multe date valoroase despre linia celulară SiHa. Acestea includ informații despre mediile de creștere, condițiile de cultură, protocoalele de subcultură a celulelor SiHa și manipularea culturilor proliferative și crioprezervate.

Întrebări frecvente pentru celulele SiHa de carcinom cervical

Referințe

Melzer, C., J. von der Ohe și R. Hass, Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential. Celule stem, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Investigarea influenței papilomavirusului uman cu risc ridicat asupra compoziției biochimice a celulelor canceroase de col uterin utilizând spectroscopia vibrațională. Analiză, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y. și colab., Inhibarea in vitro și in vivo a creșterii celulelor canceroase de col uterin uman prin scindarea ARNm-urilor E6/E7 ale papilomavirusului uman prin sistemul CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., și colab. SEC61G promovează proliferarea cancerului de col uterin prin activarea căii de semnalizare MAPK. Markeri de boală, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Potențialul anticancerigen al extractelor de fructe din Vatica diospyroides symington tip SS și efectul lor asupra morții celulare programate a liniilor celulare de cancer de col uterin. The Scientific World Journal, 2019. 2019.