Celulele SiHa – O perspectivă asupra cercetării în domeniul cancerului de col uterin
Celulele SiHa sunt celule de cancer de col uterin utilizate pe scară largă în cercetarea biomedicală. Acestea constituie gazde excelente pentru transfecție și, prin urmare, sunt potrivite pentru studiile privind expresia genică. Datorită originii lor umane și relevanței pentru cancerul de col uterin, aceste celule sunt utilizate în principal în studiile de biologie a cancerului, virologie și dezvoltarea de medicamente.
- Mediu de creștere
- Pentru creșterea ideală a celulelor SiHa se utilizează mediul minim esențial Eagle (EMEM) conținând 10% FBS, 2 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și soluția salină echilibrată Earle (EBSS). Mediul se înlocuiește de 2-3 ori pe săptămână.
- Timpul de dublare
- Timpul de dublare pentru celulele SiHa este de aproximativ 17 ore.
- Tipul de creștere
- SiHa este o linie celulară aderentă.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-1
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați SiHa
Caracteristici generale și originea celulelor SiHa
Înțelegerea originii și a caracteristicilor generale ale unei linii celulare este esențială, deoarece aceasta influențează utilizarea sa în cadrul cercetării dumneavoastră. În această secțiune a articolului, veți afla despre originea liniei celulare SiHa, caracteristicile sale distinctive și multe altele: Ce este linia celulară canceroasă SiHa? Ce sunt celulele SiHa HPV? Care este originea liniei celulare SiHa? Care este morfologia SiHa?
- SiHa, linia celulară de carcinom cervical, a fost derivată din fragmente ale unei biopsii uterine primare prelevate de la o femeie asiatică (în vârstă de 55 de ani) cu cancer cu celule scuamoase [1].
- Linia celulară SiHa prezintă un cariotip hipertriploid. Majoritatea celulelor au un număr mediu de cromozomi cuprins între 69 și 72. Cu toate acestea, aproximativ 24% dintre celule au un număr modal de cromozomi de 71.
- Celulele SiHa sunt pozitive pentru virusul papilomului uman de tip 16. Acestea prezintă integrarea a aproximativ 1-2 copii ale genomului HPV pe celulă [2].
- Aceste celule de cancer cervical prezintă o morfologie epitelială.
Linia celulară SiHa: Informații privind cultivarea
Menținerea unei culturi de linie celulară nu este ușoară până când nu cunoașteți toate aspectele esențiale ale cultivării acesteia. Trebuie să știți: Care este timpul de dublare al liniei celulare SiHa? Care este mediul de cultură pentru celulele SiHa? Cum se cultivă linia celulară SiHa?
Aspecte esențiale pentru cultivarea celulelor SiHa
Timpul de dublare:
Timpul de dublare pentru celulele SiHa este de aproximativ 17 ore.
Aderente sau în suspensie:
SiHa este o linie celulară aderentă.
Raportul de subcultivare:
Raportul de subcultivare pentru celulele SiHa este de 1:2 până la 1:4. Pentru pasare, celulele aderente sunt clătite cu PBS 1x. Se adaugă soluție de Accutase, iar celulele sunt incubate timp de 8 până la 10 minute la temperatura camerei. Apoi, se adaugă mediu de cultură, iar celulele sunt centrifugate. Peleta celulară este resuspendată, iar celulele sunt transferate într-un flacon nou pentru cultivare.
Mediu de creștere:
Pentru creșterea optimă a celulelor SiHa se utilizează mediul minim esențial al lui Eagle (EMEM) conținând 10% FBS, 2 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și soluția salină echilibrată a lui Earle (EBSS). Mediul se înlocuiește de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:
Celulele SiHa sunt menținute într-un incubator umidificat la 37 °C, cu un flux de CO₂ de 5%.
Depozitare:
Flacoanele congelate cu linia celulară SiHa de cancer cervical sunt depozitate la o temperatură sub -150 °C într-un congelator electric sau în faza de vapori a azotului lichid pentru o perioadă mai îndelungată.
Procesul de congelare și mediul:
Pentru congelarea celulelor SiHa se utilizează mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF. Celulele sunt congelate folosind o metodă de congelare lentă, care permite o scădere de numai 1 °C pe minut, pentru a proteja viabilitatea celulelor.
Procesul de decongelare:
Celulele congelate sunt menținute timp de 40 până la 60 de secunde într-o baie de apă la 37 °C până când rămâne doar un mic aglomerat de gheață. Ulterior, se adaugă mediu de creștere proaspăt, iar celulele sunt centrifugate pentru a îndepărta componentele mediului de congelare. Peleta celulară este resuspendată, iar celulele sunt transferate într-un flacon de cultură pentru creștere.
Nivel de biosecuritate:
Pentru manipularea și întreținerea culturilor celulare SiHa este necesar un laborator de nivel 1 de biosecuritate.
Avantajele și dezavantajele liniei celulare SiHa
La fel ca alte linii celulare de carcinom uman, SiHa prezintă, de asemenea, câteva caracteristici distincte asociate cu anumite avantaje și dezavantaje. În continuare, vom discuta câteva dintre cele mai semnificative.
Avantajele liniei celulare SiHa de cancer cervical
- Model de cancer de col uterin
- Derivată din carcinomul cu celule scuamoase de col uterin.
- Utilizată pentru studierea mecanismelor, creșterii și dezvoltării cancerului de col uterin.
- Exprimă genele p53+ și pRB+, care sunt legate de repararea ADN-ului, reglarea ciclului celular și supresia tumorală.
- Potențial tumorigene
- Celulele SiHa sunt tumorigene și pot induce tumori epidermoide de gradul III, slab diferențiate, la șoarecii nude.
- Utilizate pentru cercetarea cancerului in vivo și testarea tratamentelor împotriva cancerului.
Dezavantajele celulelor SiHa
- Rata de proliferare
- Celulele SiHa se multiplică rapid, ceea ce duce la o creștere excesivă.
- Necesită pasaje frecvente, ceea ce crește riscul de instabilitate genetică, care poate afecta comportamentul celular în timp.
Aplicații ale liniilor celulare SiHa în cercetare
Linia celulară SiHa este utilizată pe scară largă în cercetarea cancerului de col uterin. În continuare sunt discutate câteva aplicații specifice ale acestei linii celulare.
- Studii legate de virusul papiloma uman (HPV): Celulele SiHa sunt pozitive pentru HPV 16, fiind astfel resurse valoroase pentru studierea infecției cu virusul papiloma uman, a mecanismelor sale moleculare și a rolului său în dezvoltarea și progresia cancerului de col uterin. Cercetătorii utilizează, de asemenea, aceste celule pentru a investiga replicarea virală, integrarea și impactul acesteia asupra proceselor celulare ale gazdei. Un studiu realizat în 2020 a utilizat linia celulară SiHa pentru a examina rolul oncoproteinelor E6/E7 ale HPV în dezvoltarea cancerului de col uterin, prin țintirea acestora cu tehnologia CRISPR. Rezultatele au arătat că suprimarea genelor E6/E7 a determinat inhibarea creșterii celulelor SiHa și apoptoza. Prin urmare, aceste gene virale pot servi drept ținte terapeutice cruciale pentru dezvoltarea de terapii împotriva cancerului de col uterin asociat cu HPV [3].
- Biologia cancerului: Celulele SiHa servesc drept model de neprețuit pentru studierea biologiei cancerului de col uterin, inclusiv dezvoltarea, progresia, metastazarea și invazia cancerului. Cercetătorii utilizează aceste celule pentru a explora mutațiile genetice și căile moleculare subiacente care contribuie la dezvoltarea și creșterea cancerului de col uterin; de exemplu, un studiu a utilizat celule SiHa și a constatat că SEC61G (subunitatea gamma a transloconului SEC61) supraexprimată încurajează proliferarea celulelor canceroase de col uterin prin activarea cascadei MAPK [4].
- Screeningul și testarea medicamentelor: SiHa este o linie celulară de cancer cervical utilizată pe scară largă pentru a evalua eficacitatea potențialelor medicamente anticanceroase specifice cancerului de col uterin asociat cu HPV. Cercetătorii explorează potențialul antiproliferativ, apoptotic și antimetastatic al medicamentelor folosind aceste celule. Un exemplu în acest sens este un studiu realizat în 2019, care a investigat potențialul citotoxic al extractelor din fructele Vatica diospyroides Symington tip SS asupra liniei celulare de cancer de col uterin SiHa [5].
Celule SiHa pentru cercetarea dumneavoastră!
Publicații științifice care au ca subiect celulele SiHa
Unele publicații științifice importante și frecvent citate au ca subiect linia celulară SiHa de carcinom scuamos cervical.
Această publicație din revista „OncoTargets and Therapy” (2019) a sugerat că un compus natural, aloe-emodina, exercită efecte apoptotice asociate cu HPV E6/E7 și cu metabolismul glucozei în celulele canceroase cervicale SiHa.
Acest articol a fost publicat în revista „Future Journal of Pharmaceutical Sciences” în 2022. Studiul a investigat activitățile antitumorale ale extractului din frunze de Excoecaria agallocha (L.) asupra liniei celulare de cancer cervical SiHa.
Acest studiu, publicat în Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), a sugerat că molecula de 1,10-fenantrolină, prin cuplarea cu nanoparticule de sulfat de zinc, exercită efecte antiproliferative semnificative asupra celulelor SiHa.
Această cercetare a fost publicată în revista Oncology Reports în 2019. Studiul a relevat că astragalosida IV, un produs natural, suprimă migrația și invazia celulelor SiHa prin modularea căilor de semnalizare PI3K și MAPK mediate de TGF-β1.
Acest studiu publicat în revista „Biomedicine & Pharmacotherapy” (2020) a relevat că IFI16 (proteina 16 inducibilă de interferon-gamma) reglează gena PD-L1 prin activarea căii STING-TBK1-NF-kB, favorizând astfel creșterea celulelor canceroase cervicale SiHa.
Resurse pentru linia celulară SiHa: protocoale, videoclipuri și multe altele
Iată câteva resurse online dedicate celulelor SiHa.
- Transfecția celulelor SiHa: Acest articol de cercetare conține un protocol pentru întreținerea celulelor SiHa de cancer cervical și pentru transfecția acestora.
Următorul link conține informații privind cultura celulară pentru celulele SiHa.
- Linia celulară SiHa: Acest site web conține multe date valoroase despre linia celulară SiHa. Acestea includ informații despre mediile de creștere, condițiile de cultivare, protocoalele pentru subcultivarea celulelor SiHa și manipularea culturilor proliferative și crioconservate ale acestora.
Întrebări frecvente despre celulele de carcinom cervical SiHa
Celulele SiHa sunt o linie celulară canceroasă umană derivată din carcinomul cervical cu celule scuamoase. Acestea sunt utilizate pe scară largă în cercetarea carcinoamelor cervicale, în special în studiile legate de virusul papiloma uman de tip 16 (HPV-16), despre care se știe că joacă un rol crucial în patogeneza cancerului de col uterin.
În celulele SiHa, ADN-ul HPV-16 este de obicei integrat în cromozomii celulei gazdă. Locurile de integrare cromozomială ale HPV pot fi esențiale în înțelegerea progresiei și rezistenței la tratament a carcinomului cervical.
Da, celulele SiHa sunt o componentă esențială a panoului de celule pentru cancerul de col uterin utilizat pentru caracterizarea biologică a celulelor tumorale, examinarea efectelor chimioterapicelor și dezvoltarea de noi medicamente pentru cercetarea științifică.
Absolut. Celulele SiHa, care conțin ADN HPV integrat, sunt neprețuite pentru hibridizarea in situ și alte tehnici de biologie moleculară pentru a studia rolul HPV în dezvoltarea neoplasmelor de col uterin și potențialul de îmbunătățire a efectelor curcuminei asupra tratamentului cancerului.
Celulele SiHa sunt tumorigene la șoarecii imunodeficienți, ceea ce le face un model adecvat pentru studierea patogenității carcinomului cervical și a efectelor in vivo ale potențialelor terapii.
Referințe pentru celulele SiHa pot fi găsite în literatura științifică din reviste precum Cancer Research (Cancer Res), Biochemistry and Cell Biology, Journal of Cellular Physiology și altele. Acestea oferă informații detaliate privind utilizarea celulelor SiHa în contextul studiilor genomului cancerului, fenotipării și examinării funcțiilor genelor.
Profilul genetic al celulelor SiHa, inclusiv expresia mai multor gene și achiziția de CDV, contribuie la înțelegerea cuprinzătoare a etiologiei carcinomului cervical și la dezvoltarea de terapii țintite.
Celulele SiHa sunt menținute în cultură celulară primară, respectând condiții specifice de creștere și cerințe privind mediul pentru a le păstra caracteristicile și funcționalitatea în scopuri de cercetare.
Referințe
- Melzer, C., J. von der Ohe și R. Hass, „Concise review: crosstalk of mesenchymal stroma/stem-like cells with cancer cells provides therapeutic potential”. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
- Ostrowska, K.M. și colab., Investigarea influenței virusului papiloma uman de risc ridicat asupra compoziției biochimice a celulelor canceroase cervicale folosind spectroscopia vibrațională. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
- Chen, Y., et al., Inhibarea creșterii in vitro și in vivo a celulelor canceroase cervicale umane prin clivajul ARNm-urilor E6/E7 ale virusului papiloma uman cu ajutorul sistemului CRISPR/Cas13a. Antiviral Research, 2020. 178: p. 104794.
- Fan, Y., et al., SEC61G favorizează proliferarea cancerului de col uterin prin activarea căii de semnalizare MAPK. Disease Markers, 2022. 2022.
- Chothiphirat, A., et al., Potențialul anticancerigen al extractelor din fructe de Vatica diospyroides tip Symington SS și efectul acestora asupra morții celulare programate a liniilor celulare de cancer cervical. The Scientific World Journal, 2019. 2019.