Celule RBL-2H3 - Semnificația RBL-2H3 în răspunsul alergic și în studiile imunologice
Linia celulară RBL-2H3 este o linie celulară de leucemie bazofilă derivată de șobolan utilizată în cercetarea imunologică. Aceasta servește drept sistem model pentru studiul fiziologiei, comportamentului și funcțiilor mastocitelor. Aceste celule sunt, de asemenea, utilizate pentru a studia reacțiile alergice, procesele imunologice și testarea și dezvoltarea medicamentelor.
Articolul va oferi informații despre originea RBL-2H3, atributele generale, cerințele de cultură și aplicațiile de cercetare.
Celule RBL-2H3: Origine și caracteristici generale
Înainte de a utiliza o linie de celule bazofile în cercetarea dumneavoastră, trebuie să cunoașteți originea și atributele generale ale acesteia. Această secțiune a articolului vă va informa despre elementele de bază ale celulelor RBL-2H3. Cum ar fi, Ce sunt mastocitele RBL-2H3? De ce se utilizează celulele RBL-2H3? Ce sunt celulele RBL-2H3 în leucemia bazofilică a șobolanului? Care este morfologia celulelor RBL-2H3? Sunt celulele RBL-2H3 nemuritoare?
- RBL-2H3 sunt celule de leucemie bazofilă derivate din celule bazofile de șobolan Wistar în 1978 la Institutul Național de Cercetare Dentară Laboratorul de Imunologie.
- Celulele RBL-2H3 posedă receptorii c-kit ai tirozin kinazei și ai proteazei II a mastocitelor (RMCP-II), ceea ce le face un potențial model de mastocite. Prin urmare, ele sunt denumite în mod obișnuit mastocite, în ciuda originii lor din bazofilele de șobolan [1].
- Acestea eliberează histamină și alți mediatori la activare și exprimă receptori IgE de mare afinitate.
- Celulele RBL-2H3 prezintă o morfologie asemănătoare fibroblastului.
Celule RBL-2H3: Informații privind cultivarea
Această secțiune vă va ajuta să aflați câteva aspecte cheie pentru cultivarea liniei celulare RBL-2H3. Veți ști: Care este timpul de dublare a celulelor RBL-2H3? Care este densitatea de însămânțare a celulelor RBL-2H3? Care este protocolul de cultură a celulelor RBL-2H3? Ce este mediul de congelare a liniei celulare RBL-2H3?
Puncte-cheie pentru cultivarea celulelor RBL-2H3
|
Timpul de dublare a populației: |
Timpul de dublare a mastocitelor RBL-2H3 este de aproximativ 50- 60 de ore. |
|
Aderente sau în suspensie: |
RBL-2H3 este o linie celulară aderentă. |
|
Raport de subcultivare: |
Pentru celulele RBL-2H3, raportul de divizare se menține între 1:2 și 1:4. Celulele aderente sunt spălate cu soluție 1 x PBS fără magneziu și calciu. Se adaugă soluția de trecere Accutase, iar celulele sunt menținute la temperatura ambiantă timp de 10 minute pentru a se desprinde de fundul vasului de cultură. Se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate. Celulele recoltate sunt resuspendate cu grijă în mediu proaspăt și turnate în flacoane noi care conțin mediu de creștere. |
|
Mediu de creștere: |
Pentru cultivarea celulelor RBL-2H3 se utilizează mediul EMEM care conține 10% FBS, 2 mM L-Glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și sare EBSS. Mediul trebuie înlocuit de 2 până la 3 ori pe săptămână. |
|
Condiții de creștere: |
Celulele RBL-2H3 sunt cultivate într-un incubator umidificat, setat la temperatura de 37 °C și conectat la o sursă de 5%CO2. |
|
Depozitare: |
Celulele sunt stocate în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură sub -150 °C într-un congelator electric pentru a proteja viabilitatea celulelor pe termen lung. |
|
Procesul de congelare și mediul: |
Mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF este utilizat pentru a congela celulele RBL-2H3 printr-un proces de congelare lentă. Pe scurt, această metodă permite o scădere a temperaturii cu 1 °C pe minut și protejează celulele de șoc. |
|
Procesul de decongelare: |
Celulele RBL-2H3 sunt decongelate într-o baie de apă prestabilită (37 °C) timp de aproximativ 60 de secunde. Ulterior, celulele sunt adăugate în mediu de cultură proaspăt și centrifugate. Această etapă este esențială pentru eliminarea componentelor mediului de congelare. În continuare, peletul celular este resuspendat într-un mediu de creștere, iar celulele sunt distribuite într-un balon pentru cultivare. |
|
Nivelul de biosecuritate: |
Celulele RBL-2H3 trebuie menținute în laboratoare de biosecuritate 1. |
Avantaje și limitări ale liniei de celule bazofile RBL-2H3
Celulele RBL-2H3 sunt utilizate frecvent în cercetarea imunologică. Această secțiune prezintă principalele avantaje și limitări ale acestora.
Avantaje
- Ușor de cultivat: Celulele RBL-2H3 pot fi ușor cultivate și menținute în mediul de laborator. Acest lucru facilitează experimentele rentabile și reproductibile, făcându-le o alegere populară pentru studiile inițiale în imunologie.
Limitări
- Origine non-umană: Originare din bazofile de șobolan, celulele RBL-2H3 pot să nu imite cu exactitate procesele biologice umane, ceea ce poate limita aplicabilitatea lor în studiile de cercetare specifice omului. Acest lucru necesită o interpretare prudentă a datelor atunci când se extrapolează rezultatele la sistemele umane.
- Model simplificat de mastocite: Deși aceste celule oferă un model de bază pentru studierea funcțiilor mastocitelor, ele nu reprezintă pe deplin natura complexă a interacțiunilor mastocitelor în cadrul sistemului imunitar uman. În consecință, este posibil ca acestea să nu modeleze în mod adecvat rolurile multifațetate ale mastocitelor în răspunsurile imune sau în condițiile de boală in vivo.
Linia celulară RBL-2H3: O piatră de temelie în cercetarea imunologică
Cercetarea bazofililor și mastocitelor utilizând linia celulară RBL-2H3
Linia celulară RBL-2H3, derivată din Rattus norvegicus, servește drept model-cheie pentru studiul biologiei bazofilelor și mastocitelor. Aceste mastocite de șobolan oferă informații esențiale cu privire la eliberarea mediatorilor de către mastocite, esențială pentru înțelegerea afecțiunilor alergice, cum ar fi rinita alergică. Prin intermediul acestor celule, cercetătorii explorează dinamica receptorilor celulari și stabilirea sinapselor imunologice, care sunt esențiale pentru răspunsul sistemului imunitar la alergeni. un studiu interesant publicat în 2019 a utilizat linia celulară RBL-2H3 și a investigat mecanismele din spatele reacțiilor pseudoalergice produse de injectarea Qingkailing. Studiul a constatat că cascada de semnalizare PI3K-RAC1 provoacă parțial acest răspuns alergic în celule [2]
Dinamica sinapselor imunologice în cercetarea alergiilor
Angajate pe scară largă în cercetarea imunologică, celulele RBL-2H3 sunt deosebit de eficiente pentru investigarea dinamicii sinapselor imunologice. Aceasta ajută la elucidarea proceselor de comunicare ale sistemului imunitar, cu aplicații în studiul mastocitelor din sângele periferic și peritoneal. Astfel de cercetări sunt vitale pentru o înțelegere cuprinzătoare a răspunsului imun atât în context sistemic, cât și localizat
Depistarea medicamentelor și testarea toxicității
În screeningul și testarea medicamentelor, se exploatează capacitatea de reacție a celulelor RBL la diferiți stimuli, inclusiv studiul modului în care H2O2 inhibă răspunsurile mediate de IgE. Aceste celule joacă un rol esențial în dezvoltarea de tratamente pentru boli precum infecțiile streptococice, unde streptococii din grupul mitis inhibă activarea mastocitelor. Pe lângă aceasta, cercetătorii evaluează efectele toxice ale diferitelor substanțe, inclusiv substanțe chimice, medicamente și nanoparticule, utilizând acest model mc RBL 2H3. Cum ar fi un studiu recent (2022) a evaluat citotoxicitatea microplasticelor din polistiren asupra celulelor RBL 2H3. Ei au constatat că microplasticele deteriorează organitele celulelor RBL-2H3 și promovează moartea celulară [3]. Un alt studiu din 2021 a evaluat potențialul antialergic și antiinflamator al unui produs natural, neferina, utilizând modelul mc RBL 2H3. Studiul a evidențiat bunele proprietăți antialergice și antiinflamatorii ale compusului [4]
Metodologii avansate în măsurarea imunologică
Eliberarea consistentă și măsurabilă de mediatori din celulele RBL-2H3 le face ideale pentru fluorimetrie convenabilă, facilitând măsurători precise și exacte cruciale pentru studiul bolilor și evaluarea agenților terapeutici.
Linia celulară RBL-2H3, care își are originea în Rattus norvegicus, este un bun inestimabil atât în cercetarea fundamentală, cât și în cea aplicată din domeniul imunologiei. Aceasta oferă oportunități profunde pentru avansarea cunoștințelor noastre și a tratamentului bolilor imunologice
Linie celulară RBL-2H3 pentru cercetare imunologică avansată
Celule RBL-2H3: Publicații de cercetare
Următoarele sunt câteva publicații de cercetare interesante care prezintă mastocitele RBL-2H3:
Activitatea inhibitoare a narirutinului asupra degranulării celulelor RBL-2H3
Această lucrare de cercetare a fost publicată în Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Studiul a propus că narirutin, un compus natural, exercită efecte inhibitoare asupra degranulării celulelor RBL 2H3 prin reglarea NF-κB, MAPK și a căii de semnalizare a tirozin-kinazei.
Această cercetare din International Journal of Molecular Sciences (2020) a propus că compusul apigenin suprimă semnificativ răspunsurile alergice și inflamatorii ale celulelor RBL-2H3 și RAW264.7. Prin urmare, acesta poate servi ca un agent potențial pentru combaterea bolilor legate de imunitate.
Această lucrare de cercetare din International Journal of Molecular Sciences (2021) a evaluat efectele antialergice și antiinflamatorii ale unui produs natural, saponarina, utilizând diferite linii celulare, inclusiv RBL-2H3.
Acest studiu Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2014) a constatat că extractele Benchalokawichian și unele componente active exercită efecte inhibitoare potențiale asupra eliberării ß-hexosaminidazei RBL 2H3.
Această lucrare a fost publicată în 2018 în International Journal of Biological Macromolecules. Studiul a afirmat că spirulina maxima, un produs natural, inhibă degranularea celulelor RBL 2H3 prin prevenirea fosforilării MAPKs și AKT.
Resurse pentru linia celulară RBL-2H3: Protocoale, videoclipuri și multe altele
RBL-2H3 este o linie de mastocite utilizată pe scară largă. Resursele disponibile care acoperă protocoalele de cultivare și transfecție RBL-2H3 sunt menționate aici:
- RBL 2H3 MC model: Acest articol de cercetare cuprinde protocoale pentru menținerea culturilor RBL-2H3 și pentru transfecția RBL-2H3.
Aici sunt prezentate câteva resurse care explică protocolul de cultivare a celulelor RBL-2H3:
- Celule RBL-2H3: Acest site web vă este util pentru a învăța protocoalele de cultură celulară pentru linia celulară RBL-2H3. În plus, acesta cuprinde informații despre mediul celular RBL 2H3 și condițiile de cultivare.
Linia celulară RBL-2H3: Întrebări frecvente esențiale pentru cercetători
Referințe
- Passante, E. și N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q., și colab., Reacție pseudoalergică cauzată de injectarea Qingkailing parțial prin calea de semnalizare PI3K-Rac1 în celulele RBL-2H3. Cercetare toxicologică, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L. și colab., Micro (nano) plasticele din polistiren deteriorează organitele celulelor RBL-2H3 și promovează MOAP-1 pentru a induce apoptoza. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M. și colab., Efectele antialergice și antiinflamatorii ale neferinei asupra celulelor RBL-2H3. Jurnalul internațional de științe moleculare, 2021. 22(20): p. 10994.
