Celulele RBL-2H3 – Importanța liniei celulare RBL-2H3 în răspunsul alergic și în studiile imunologice
Linia celulară RBL-2H3 este o linie celulară de leucemie bazofilă derivată din șobolan, utilizată în cercetarea imunologică. Aceasta servește ca sistem model pentru studierea fiziologiei, comportamentului și funcțiilor mastocitelor. Aceste celule sunt utilizate, de asemenea, pentru studierea reacțiilor alergice, a proceselor imunologice, precum și pentru testarea și dezvoltarea medicamentelor.
- Mediu de creștere
- Pentru cultivarea celulelor RBL-2H3 se utilizează mediu EMEM conținând 10% FBS, 2 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO3 și sare EBSS. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
- Timp de dublare
- Timpul de dublare a mastocitelor RBL-2H3 este de aproximativ 50–60 de ore.
- Tipul de creștere
- RBL-2H3 este o linie celulară aderentă.
- Nivel de biosecuritate
- BSL-2
- Disponibil de la
- Cytion — Comandați RBL-2H3
- Celulele RBL-2H3: Origine și caracteristici generale
- Celule RBL-2H3: Informații privind cultivarea
- Avantajele și limitările liniei celulare de bazofile RBL-2H3
- Linia celulară RBL-2H3: o piatră de temelie în cercetarea imunologică
- Linia celulară RBL-2H3: Întrebări frecvente esențiale pentru cercetători
- Referințe
- Linia celulară RBL-2H3 pentru cercetarea imunologică avansată
- Celulele RBL-2H3: publicații de cercetare
- Resurse pentru linia celulară RBL-2H3: protocoale, videoclipuri și multe altele
- Întrebări frecvente
Celulele RBL-2H3: Origine și caracteristici generale
Înainte de a utiliza o linie celulară bazofilă în cercetarea dumneavoastră, ar trebui să cunoașteți originea și caracteristicile generale ale acesteia. Această secțiune a articolului vă va oferi informații de bază despre celulele RBL-2H3. De exemplu: Ce sunt mastocitele RBL-2H3? De ce să utilizați celulele RBL-2H3? Ce sunt celulele RBL-2H3 în leucemia bazofilă la șobolan? Care este morfologia celulelor RBL-2H3? Sunt celulele RBL-2H3 nemuritoare?
- Celulele RBL-2H3 sunt celule de leucemie bazofilă derivate din celule bazofile de șobolan Wistar în 1978, la Laboratorul de Imunologie al Institutului Național de Cercetări Stomatologice.
- Celulele RBL-2H3 posedă receptorul tirozinkinazei c-kit și receptorii proteazei II a mastocitelor (RMCP-II), ceea ce le face un potențial model de mastocite. Prin urmare, ele sunt denumite în mod obișnuit mastocite, în ciuda originii lor din bazofile de șobolan [1].
- La activare, acestea eliberează histamină și alți mediatori și exprimă receptori IgE de înaltă afinitate.
- Celulele RBL-2H3 prezintă o morfologie asemănătoare fibroblastelor.
Celulele RBL-2H3: Informații privind cultivarea
Această secțiune vă va ajuta să aflați câteva aspecte cheie privind cultivarea liniei celulare RBL-2H3. Veți afla: Care este timpul de dublare a celulelor RBL-2H3? Care este densitatea de însămânțare a celulelor RBL-2H3? Care este protocolul de cultivare a celulelor RBL-2H3? Care este mediul de congelare al liniei celulare RBL-2H3?
Puncte cheie pentru cultivarea celulelor RBL-2H3
Timpul de dublare a populației:
Timpul de dublare a mastocitelor RBL-2H3 este de aproximativ 50-60 de ore.
Aderentă sau în suspensie:
RBL-2H3 este o linie celulară aderentă.
Raportul de subcultivare:
Pentru celulele RBL-2H3, raportul de subcultivare este menținut între 1:2 și 1:4. Celulele aderente sunt spălate cu soluție 1x PBS fără magneziu și calciu. Se adaugă soluția de pasare Accutase, iar celulele sunt menținute la temperatura camerei timp de 10 minute pentru a se desprinde de fundul vasului de cultură. Se adaugă mediu proaspăt, iar celulele sunt centrifugate. Celulele recoltate sunt resuspendate cu grijă în mediu proaspăt și turnate în flacoane noi care conțin mediu de creștere.
Mediu de creștere:
Pentru cultivarea celulelor RBL-2H3 se utilizează mediu EMEM conținând 10% FBS, 2 mM L-glutamină, 2,2 g/L NaHCO₃ și sare EBSS. Mediul trebuie înlocuit de 2-3 ori pe săptămână.
Condiții de creștere:
Celulele RBL-2H3 sunt cultivate într-un incubator umidificat, setat la o temperatură de 37 °C și conectat la o sursă de CO₂ de 5%.
Depozitare:
Celulele sunt depozitate în faza de vapori a azotului lichid sau la o temperatură sub -150 °C într-un congelator electric, pentru a proteja viabilitatea celulelor pe termen lung.
Procesul de congelare și mediul:
Pentru congelarea celulelor RBL-2H3 se utilizează mediul de congelare CM-1 sau CM-ACF, printr-un proces de congelare lentă. Pe scurt, această metodă permite o scădere a temperaturii cu 1 °C pe minut și protejează celulele de șocul termic.
Procesul de decongelare:
Celulele RBL-2H3 sunt decongelate într-o baie de apă prestabilită (37 °C) timp de aproximativ 60 de secunde. Ulterior, celulele sunt adăugate într-un mediu de cultură proaspăt și centrifugate. Această etapă este esențială pentru îndepărtarea componentelor mediului de congelare. Apoi, sedimentul celular este resuspendat într-un mediu de creștere, iar celulele sunt transferate într-un balon pentru cultivare.
Nivel de biosecuritate:
Celulele RBL-2H3 trebuie menținute în laboratoare de biosiguranță de nivel 1.
Publicat: 2023 | Ultima revizuire: mai 2026
Avantajele și limitările liniei celulare de bazofile RBL-2H3
Celulele RBL-2H3 sunt utilizate frecvent în cercetarea imunologică. Această secțiune prezintă principalele avantaje și limitări ale acestora.
Avantaje
- Ușor de cultivat: Celulele RBL-2H3 pot fi cultivate și întreținute cu ușurință în mediul de laborator. Acest lucru facilitează experimentarea rentabilă și reproductibilă, făcându-le o alegere populară pentru studiile inițiale în imunologie.
Limitări
- Origine non-umană: provenind din bazofile de șobolan, celulele RBL-2H3 s-ar putea să nu imite cu exactitate procesele biologice umane, ceea ce le poate limita aplicabilitatea în studiile de cercetare specifice omului. Acest lucru necesită o interpretare prudentă a datelor atunci când se extrapolează rezultatele la sistemele umane.
- Model simplificat de mastocite: Deși aceste celule oferă un model de bază pentru studierea funcțiilor mastocitelor, ele nu reprezintă pe deplin natura complexă a interacțiunilor mastocitelor în cadrul sistemului imunitar uman. În consecință, este posibil ca acestea să nu modeleze în mod adecvat rolurile multifacetate ale mastocitelor în răspunsurile imune sau în afecțiunile medicale in vivo.
Linia celulară RBL-2H3: o piatră de temelie în cercetarea imunologică
Cercetarea bazofilelor și a mastocitelor utilizând linia celulară RBL-2H3
Linia celulară RBL-2H3, derivată din Rattus norvegicus, servește drept model cheie pentru studierea biologiei bazofilelor și a mastocitelor. Aceste mastocite de șobolan oferă informații esențiale privind eliberarea mediatorilor mastocitari, critice pentru înțelegerea afecțiunilor alergice, cum ar fi rinita alergică. Prin intermediul acestor celule, cercetătorii explorează dinamica receptorilor celulari și formarea sinapselor imunologice, care sunt esențiale pentru răspunsul sistemului imunitar la alergeni. Un studiu interesant publicat în 2019 a utilizat linia celulară RBL-2H3 și a investigat mecanismele din spatele reacțiilor pseudoalergice produse de injectarea cu Qingkailing. Studiul a constatat că cascada de semnalizare PI3K-RAC1 declanșează parțial această reacție alergică în celule [2].
Dinamica sinapselor imunologice în cercetarea alergiilor
Utilizate pe scară largă în cercetarea imunologică, celulele RBL-2H3 sunt deosebit de eficiente pentru investigarea dinamicii sinapselor imunologice. Acest lucru contribuie la elucidarea proceselor de comunicare ale sistemului imunitar, cu aplicații în studierea atât a mastocitelor din sângele periferic, cât și a celor peritoneale. O astfel de cercetare este vitală pentru o înțelegere cuprinzătoare a răspunsului imunitar atât în contexte sistemice, cât și localizate.
Screeningul medicamentelor și testarea toxicității
În screeningul și testarea medicamentelor, se exploatează capacitatea de răspuns a celulelor RBL la diverși stimuli, inclusiv studiul modului în care H₂O₂ inhibă răspunsurile mediate de IgE. Aceste celule joacă un rol esențial în dezvoltarea tratamentelor pentru boli precum infecțiile streptococice, în care streptococii din grupul mitis inhibă activarea mastocitelor. În plus, cercetătorii evaluează efectele toxice ale diverselor substanțe, inclusiv substanțe chimice, medicamente și nanoparticule, folosind acest model RBL 2H3 mc. De exemplu, un studiu recent (2022) a evaluat citotoxicitatea microplasticelor din polistiren asupra celulelor RBL-2H3. Cercetătorii au descoperit că microplasticele afectează organitele celulelor RBL-2H3 și favorizează moartea celulară [3]. Un alt studiu din 2021 a evaluat potențialul antialergic și antiinflamator al unui produs natural, neferina, utilizând modelul RBL 2H3 mc. Studiul a evidențiat proprietățile antialergice și antiinflamatorii bune ale compusului [4].
Metodologii avansate în măsurarea imunologică
Eliberarea consistentă și măsurabilă a mediatorilor din celulele RBL-2H3 le face ideale pentru fluorimetrie, facilitând măsurători precise și exacte, cruciale pentru studiul bolilor și evaluarea agenților terapeutici.
Linia celulară RBL-2H3, provenind din specia Rattus norvegicus, reprezintă un atu de neprețuit atât în cercetarea fundamentală, cât și în cea aplicată din domeniul imunologiei. Aceasta oferă oportunități semnificative pentru aprofundarea cunoștințelor noastre și pentru tratamentul bolilor imunologice.
Linia celulară RBL-2H3 pentru cercetarea imunologică avansată
Celulele RBL-2H3: Publicații de cercetare
Iată câteva publicații de cercetare interesante care au ca subiect mastocitele RBL-2H3:
Activitatea inhibitoare a narirutinei asupra degranulării celulelor RBL-2H3
Acest articol de cercetare a fost publicat în revista „Immunopharmacology and Immunotoxicology” (2021). Studiul a sugerat că narirutina, un compus natural, exercită efecte inhibitoare asupra degranulării celulelor RBL-2H3 prin reglarea NF-κB, MAPK și a căii de semnalizare a tirozin-kinazei.
Această cercetare publicată în International Journal of Molecular Sciences (2020) a sugerat că apigenina suprimă semnificativ răspunsurile alergice și inflamatorii ale celulelor RBL-2H3 și RAW264.7. Prin urmare, aceasta poate servi ca agent potențial pentru combaterea bolilor de origine imunitară.
Acest articol de cercetare publicat în International Journal of Molecular Sciences (2021) a evaluat efectele antialergice și antiinflamatorii ale unui produs natural, saponarina, utilizând diferite linii celulare, inclusiv RBL-2H3.
Acest studiu publicat în revista „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine” (2014) a constatat că extractele de Benchalokawichian și anumiți constituenți activi exercită potențiale efecte inhibitoare asupra eliberării β-hexozaminidazei din celulele RBL-2H3.
Acest articol a fost publicat în 2018 în revista „International Journal of Biological Macromolecules”. Studiul a arătat că spirulina maxima, un produs natural, inhibă degranularea celulelor RBL 2H3 prin prevenirea fosforilării MAPK și AKT.
Resurse pentru linia celulară RBL-2H3: protocoale, videoclipuri și multe altele
RBL-2H3 este o linie celulară de mastocite utilizată pe scară largă. Resursele disponibile referitoare la protocoalele de cultivare și transfecție ale liniei RBL-2H3 sunt menționate aici:
- Modelul RBL 2H3 MC: Acest articol de cercetare cuprinde protocoale pentru menținerea culturilor RBL-2H3 și pentru transfecția RBL-2H3.
Iată câteva resurse care explică protocolul de cultură celulară RBL-2H3:
- Celulele RBL-2H3: Acest site web vă este de ajutor pentru a învăța protocoalele de cultură celulară pentru linia celulară RBL-2H3. În plus, acesta conține informații despre mediile de cultură și condițiile de cultivare ale celulelor RBL-2H3.
Linia celulară RBL-2H3: Întrebări frecvente esențiale pentru cercetători
Celulele RBL-2H3 sunt o linie celulară derivată inițial din leucemia bazofilică a șobolanului și sunt utilizate în mod obișnuit ca model pentru a studia biologia mastocitelor, în special în contextul reacțiilor alergice și al cercetării imunologice. Aceste celule sunt valoroase pentru analizarea eliberării mediatorilor bazofili și mastocitelor, a dinamicii receptorilor celulari și a formării sinapselor imunologice.
Da, la activare, celulele RBL-2H3 sunt cunoscute pentru eliberarea de histamină și alți mediatori inflamatori. Această caracteristică le face foarte utile pentru studiile legate de răspunsurile alergice, deoarece eliberarea de histamină este o caracteristică esențială a reacțiilor alergice și a proceselor inflamatorii.
Timpul de dublare a celulelor RBL-2H3 variază în funcție de condițiile de cultură, dar este în general de 24 până la 36 de ore. Cu toate acestea, condițiile optime de creștere, cum ar fi temperatura, pH-ul și disponibilitatea nutrienților, pot influența timpul de dublare.
Deși celulele RBL-2H3 sunt de origine șobolan și există diferențe inerente între specii, acestea sunt încă utilizate pe scară largă ca model pentru studierea mecanismelor relevante pentru răspunsurile alergice umane. Cu toate acestea, rezultatele studiilor pe celule RBL-2H3 trebuie interpretate cu atenție atunci când se extrapolează la sistemele umane.
S-a demonstrat că H2O2, sau peroxidul de hidrogen, inhibă degranularea mediată de IgE în celulele RBL-2H3. Acest efect este semnificativ pentru cercetătorii care studiază modularea reacțiilor alergice la nivel celular.
Da, celulele RBL-2H3 sunt utilizate pe scară largă pentru screeningul medicamentelor, în special pentru compușii care vizează căile alergice și inflamatorii. Ele sunt utilizate pentru a evalua eficacitatea și siguranța potențialilor agenți terapeutici, precum și proprietățile lor antialergice și antiinflamatorii.
Referințe
- Passante, E. și N. Frankish, Linia celulară RBL-2H3: proveniența și adecvarea sa ca model pentru mastocite. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
- Li, Q. și colab., Reacție pseudoalergică provocată de injecția cu Qingkailing, parțial prin intermediul căii de semnalizare PI3K-Rac1 în celulele RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
- Liu, L., et al., Microplasticele (nanoplasticele) din polistiren afectează organitele celulelor RBL-2H3 și stimulează MOAP-1 pentru a induce apoptoza. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Efectele antialergice și antiinflamatorii ale neferinei asupra celulelor RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.