DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glucoză, w: 2.5 mM L-Glutamină, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Piruvat de sodiu, w: 1.2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 este un mediu de bază larg recunoscut și utilizat pe scară largă în culturile celulare pentru cercetarea biologică. Acesta servește ca sursă fundamentală de nutrienți pentru creșterea diverselor linii celulare de mamifere, în special atunci când este suplimentat cu ser fetal bovin (FBS).
Această formulă unică combină mediul Eagle modificat de Dulbecco (DMEM) și Ham's F-12 (amestecul nutritiv F-12 al lui Ham) într-un raport precis de 1:1. Adăugarea de L-glutamină îmbunătățește și mai mult compoziția sa.
DMEM, derivat din mediul minim esențial al lui Eagle (EMEM), oferă o concentrație mai mare de aminoacizi și vitamine în comparație cu predecesorul său. În schimb, Ham's F-12 se bazează pe mediul Ham's F-10, furnizând un set complementar de componente esențiale.
Pentru a susține creșterea optimă a celulelor, se obișnuiește suplimentarea DMEM:Ham's F12 cu FBS la o concentrație tipică de 5-10%. Această adăugare este necesară, deoarece mediul nu conține hormoni de creștere, lipide și proteine esențiale pentru dezvoltarea celulară.
DMEM:Ham's F12 include un sistem tampon de pH și este adesea suplimentat cu roșu de fenol, un indicator de pH. Celulele cultivate în DMEM:Ham's F12, sau în orice mediu care utilizează sistemul tampon cu bicarbonat, necesită un mediu cu concentrație controlată de CO₂ de 5-10% pentru a menține nivelurile adecvate de pH.
Controlul calității
- Filtrat steril
Depozitare și termen de valabilitate
- A se păstra la temperaturi cuprinse între +2 °C și +8 °C, ferit de lumină.
- Odată deschis, a se păstra la 4 °C și a se utiliza în termen de 6–8 săptămâni.
Condiții de transport
- Temperatura ambiantă
Întreținere
- A se păstra la frigider, la o temperatură cuprinsă între +2 °C și +8 °C, la întuneric. Evitați înghețarea și încălzirea frecventă la +37 °C, deoarece aceasta reduce calitatea produsului.
- Nu încălziți mediul peste 37 °C și nu utilizați surse de căldură necontrolate, cum ar fi cuptorul cu microunde.
- Dacă se utilizează doar o parte din mediu, prelevați cantitatea necesară și încălziți-o la temperatura camerei înainte de utilizare.
Compoziție
| Categorie | Componente | Concentrație (mg/L) |
| Aminoacizi | Glicină | 18,75 |
| L-alanină | 4,45 | |
| L-arginină HCl | 147,50 | |
| L-asparagină H₂O | 7,50 | |
| Acid L-aspartic | 6,65 | |
| L-cisteină HCl H₂O | 17,56 | |
| L-cistină 2 HCl | 31,29 | |
| Acid L-glutamic | 7,35 | |
| L-glutamină | 365,00 | |
| L-histidină HCl H₂O | 31,48 | |
| L-izoleucină | 54,47 | |
| L-leucină | 59,05 | |
| L-lizină HCl | 91,25 | |
| L-metionină | 17,24 | |
| L-fenilalanină | 35,48 | |
| L-prolină | 17,25 | |
| L-serină | 26,25 | |
| L-treonină | 53,45 | |
| L-triptofan | 9,02 | |
| L-tirozină 2 Na 2 H2O | 55,79 | |
| L-valină | 52,85 | |
| Vitamine | D-biotină | 0,0035 |
| Clorură de colină | 8,98 | |
| D-pantotenat de calciu | 2,24 | |
| Acid folic | 2,66 | |
| mio-inositol | 12,60 | |
| Nicotinamidă | 2,02 | |
| Clorhidrat de piridoxină | 0,031 | |
| Clorhidrat de piridoxal | 2,00 | |
| Riboflavină | 0,219 | |
| Clorhidrat de tiamină | 2,17 | |
| Vitamina B12 | 0,68 | |
| Săruri anorganice | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄ 7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂ 6 H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄ 7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄ 7 H₂O | 0,432 | |
| Alte componente | D-glucoză | 3151,00 |
| Hipoxantină | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Acid linoleic | 0,042 | |
| Acid lipoic | 0,105 | |
| Sare de sodiu a roșului de fenol | 8,63 | |
| Putrescina 2 HCl | 0,081 | |
| Piruvat de sodiu | 55,00 | |
| Timidină | 0,365 |