Celulele MM.1S-Luc

Vă prezentăm mediul Ham's F-12K (Kaighn's), o modificare specializată a mediului Ham's F-12 conceput pentru a satisface cerințele unice ale cercetării biologice. Acest mediu avansat oferă avantaje distincte, îmbunătățind cultivarea hepatocitelor umane primare, precum și a celulelor hepatice de șobolan și pui, în special în condiții de ser redus.

Mediul Ham's F-12K (Kaighn's) este atent formulat pentru a optimiza condițiile de cultură celulară. Acesta are o compoziție îmbogățită, oferind niveluri ridicate de componente esențiale, cum ar fi aminoacizii și piruvatul de sodiu, precum și elemente suplimentare, inclusiv putrescina, timidina, hipoxantina și zincul. Aceste adaosuri permit cercetătorilor să completeze mediul cu ser minim sau cu componente definite pentru anumite tipuri de celule, facilitând condiții experimentale precise.

În special, mediul Ham's F-12K (Kaighn's) nu conține proteine sau factori de creștere. În consecință, suplimentarea cu factori de creștere și ser fetal bovin (FBS) este adesea necesară, permițând cercetătorilor să adapteze mediul la cerințele liniilor lor celulare specifice. Pentru o performanță optimă, concentrația de FBS trebuie să fie atent optimizată pentru fiecare linie celulară, asigurând creșterea și funcționalitatea optime.

Pentru a menține pH-ul fiziologic, mediul Ham's F-12K (Kaighn's) utilizează un sistem tampon de bicarbonat de sodiu (2,5 g/L), necesitând un mediu controlat cu 5-10% CO2 în timpul cultivării. Acest lucru asigură menținerea pH-ului mediului în intervalul ideal pentru creșterea și viabilitatea celulelor
Controlul calității

pH = 7,2 +/
- 0,02 la 20-25°C.
Fiecare lot a fost testat pentru sterilitate și absența micoplasmei și a bacteriilor.

Păstrare

A se păstra la frigider între +2°C și +8°C în întuneric. Înghețarea, precum și încălzirea până la +37°C minimizează calitatea produsului.
Nu încălziți mediul la mai mult de 37°C și nu utilizați surse necontrolabile de căldură (de exemplu, aparate cu microunde).
În cazul în care urmează să se utilizeze doar o parte din mediu, scoateți această cantitate din flacon și încălziți-o la temperatura camerei.
Termenul de valabilitate pentru orice mediu, cu excepția mediului de bază, este de 8 săptămâni de la data fabricării.

Compoziție




Componente
mg/L


Săruri anorganice
Clorură de calciu x 2H2O
135,24



Sulfat de cupru(II) x 5H2O
0,00



Sulfat de fier (II) x 7H2O
0,83



Clorură de magneziu x 6H2O
105,72



Sulfat de magneziu x 7H2O
394,49



Clorură de potasiu
283,29



Dihidrogenfosfat de potasiu
58,52



Clorură de sodiu
7597,20



hidrogenofosfat de di-sodiuanhidru
115,02



Sulfat de zinc x 7H2O
0,14


Alte componente
D(+)-Glucoză anhidră
1260,00



Hipoxantină
4,08



Acid DL-α-Lipoic
0,21



Fenol roșu
3,00



Putrescină x 2HCl
0,32



Pirovat de sodiu
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidină
0,73


Aminoacizi
L-Alanină
17,82



L-arginină x HCl
421,40



L-Asparagină x H2O
30,02



Acid L-aspartic
26,62



L-cisteină x HCl x H2O
70,24



L-Glutamină
292,20



Acid L-glutamic
29,42



Glicină
15,01



L-histidină x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucină
7,87



L-leucină
26,24



L-lizină x HCl
73,04



L-Metionină
8,95



L-fenilalanină
9,91



L-Prolină
69,06



L-serină
21,02



L-Treonină
23,82



L-triptofan
4,08



L-tirozină
10,87



L-Valină
23,42


Vitamine
D(+)-Biotină
0,07



Pantotenat de D-calciu
0,48



Clorură de colină
13,96



Acid folic
1,32



mio-Inositol
18,02



Nicotinamidă
0,04



Piridoxină x HCl
0,06



Riboflavină
0,04



Tiamină x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

Soluție de detașare celulară Accutase cu EDTA și roșu fenol – 100 ml

Accutase este o soluție de detașare celulară gata de utilizare, filtrată steril, concepută ca o alternativă delicată la tripsină/EDTA pentru disocierea celulelor mamifere aderente de pe recipientele standard din plastic pentru culturi tisulare și de pe suprafețele acoperite cu strat de aderență. Aceasta combină activitatea enzimelor proteolitice și colagenolitice într-o soluție salină echilibrată pentru a asigura o disociere eficientă, dar controlată, conservând proteinele de la suprafața celulară și favorizând o viabilitate ridicată după pasare și o reatașare rapidă.

Formula Accutase se bazează pe soluția salină tamponată cu fosfat Dulbecco (DPBS) cu EDTA și roșu de fenol ca indicator vizual al pH-ului. Enzimele sunt de origine non-mamiferă și non-bacteriană, ceea ce face ca Accutase să fie deosebit de potrivit pentru cercetarea celulelor stem, fluxurile de lucru pentru vaccinuri și orice aplicație în care contaminanții de origine animală sau microbiană trebuie minimizați. Soluția se autoinhibă la 37 °C, astfel încât nu este necesar niciun reactiv de neutralizare sau mediu conținând ser după detașare – celulele pot fi transferate direct într-un mediu proaspăt.

Caracteristici cheie

Lichid 1x filtrat steril, gata de utilizare – nu este necesară diluarea sau reconstituirea
Activitate enzimatică proteolitică și colagenolitică combinată pentru o disociere delicată
Fiecare lot este standardizat la o activitate de disociere definită pentru a asigura consistența de la lot la lot
Enzime de origine non-mamiferă și non-bacteriană
Se autoinhibă la 37 °C – nu este necesară o soluție de neutralizare
Formulat în PBS Dulbecco cu EDTA
Roșu de fenol inclus ca indicator vizual al pH-ului
pH 6,8 – 7,8


Aplicații tipice
Accutase disociază ușor o gamă largă de tipuri de celule aderente și sensibile, inclusiv celule stem embrionare umane (hESC), celule stem pluripotente induse umane (iPSC), celule stem neuronale, neuroni primari și linii aderente cultivate în mod obișnuit, precum HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 și A549. Cazuri tipice de utilizare includ:

Subcultivarea și pasarea de rutină a celulelor mamifere aderente
Disocierea delicată a celulelor individuale din hESC, iPSC și alte linii sensibile
Pregătirea probelor pentru citometrie în flux și analiza FACS
Analiza markerilor de suprafață celulară în cazul în care integritatea epitopului este importantă
Testele de migrare, proliferare și apoptoză celulară
Teste de repaus prin privare de ser și studii de transfecție cu oncogene
Teste de migrare a celulelor tumorale și a celulelor creastei neurale
Creșterea producției în fluxurile de lucru ale bioreactorului

Pentru lucrările de rutină, aplicați aproximativ 10 ml de Accutase pe 75 cm2 de suprafață de cultură și incubați timp de 5–10 minute la temperatura camerei. Timpul optim de incubare trebuie determinat pentru fiecare linie celulară și nu trebuie să depășească o oră. Înainte de adăugare, clătiți stratul celular cu o soluție salină fără Ca2+/Mg2+, cum ar fi DPBS fără calciu și magneziu, pentru a îndepărta serul rezidual și cationii bivalenți.

Manipulare și depozitare
Depozitați flaconul nedeschis la -15 °C sau mai jos. Decongelați fie la temperatura camerei, fie peste noapte la +2 °C până la +8 °C. Nu decongelați Accutase într-o baie de apă la 37 °C, deoarece temperaturile ridicate reduc activitatea enzimatică. După decongelare, soluția poate fi păstrată până la 2 luni la +2 °C până la +8 °C; nu depozitați la temperatura camerei. Nu preîncălziți reactivul la 37 °C înainte de aplicare – adăugați-l direct la celulele spălate la temperatura camerei. Pentru o durată de valabilitate îndelungată, se recomandă alicotarea de unică folosință pentru a evita ciclurile repetate de decongelare. Lucrați întotdeauna în condiții aseptice.

Calitate
Fabricat în conformitate cu standarde stricte de calitate. Fiecare lot de Accutase este filtrat steril și testat pentru sterilitate, pH, aspect și activitate de disociere, pentru a asigura performanțe consistente și reproductibile de la un lot la altul.

Specificații



Specificații
Detalii



Tipul produsuluiReactiv de detașare/disociere celulară
FormatLichid filtrat steril, gata de utilizare
Volum100 ml
Concentrație de lucru1x (gata de utilizare)
Activitate enzimaticăProteolitică și colagenolitică combinată
Originea enzimelorNon-mamiferă și non-bacteriană
Sistem tamponPBS Dulbecco cu EDTA
Indicator de pHRoșu de fenol
Interval de pH6,8 – 7,8
AspectSoluție limpede, de culoare roșu pal până la portocaliu
Temperatura de depozitare-15 °C sau mai puțin
Stabilitate după decongelarePână la 2 luni la +2 °C până la +8 °C
Volum recomandat de utilizare~10 ml per 75 cm² suprafață de cultură
Timp tipic de incubare5 – 10 minute la temperatura camerei
Condiții de transportCongelat în gheață carbonică
Utilizare prevăzutăNumai pentru cercetare și producție ulterioară



Formulă (Compoziție pe litru)



Component
Concentrație (mg/L)




Săruri anorganice

Clorură de sodiu (NaCl)8000,00
Hidrogenofosfat disodic (Na2HPO4)1150,00
Clorură de potasiu (KCl)200,00
Dihidrogenofosfat de potasiu (KH2PO4)200,00

Alte componente

EDTA · 4Na (EDTA tetrasodic)220,00
Roșu de fenol3,00
Amestec enzimatic brevetat (activitate proteolitică și colagenolitică)1x



Accutase este o marcă comercială înregistrată a Innovative Cell Technologies, Inc.

Mediul de congelare CM-1 de la Cytion este un mediu de crioconservare de ultimă generație, conceput pentru a asigura cel mai înalt nivel de viabilitate și funcționalitate celulară după dezghețare. Acest mediu versatil este potrivit pentru un spectru larg de tipuri de celule, inclusiv celule umane și animale, ceea ce îl face un instrument esențial pentru diverse aplicații de cercetare. Formulat cu o combinație meticulos echilibrată de crioprotectanți și nutrienți esențiali, Freeze Medium CM-1 minimizează formarea cristalelor de gheață și stresul celular în timpul procesului de congelare, păstrând astfel integritatea celulară.
Caracteristicile principale ale Freeze Medium CM-1 includ:

Compatibilitate largă: Eficient pentru o gamă largă de tipuri de celule, inclusiv celule primare, celule stem și linii celulare stabilite.
Viabilitate ridicată: Optimizat pentru a maximiza recuperarea și viabilitatea celulelor după dezghețare, asigurând rezultate experimentale fiabile.
Gata de utilizare: Preparate și sterilizate convenabil pentru aplicare imediată, reducând timpul de preparare și riscul de contaminare.
Stabilitate îmbunătățită: Menține performanța constantă în condiții standard de crioconservare, asigurând rezultate reproductibile.
Durată lungă de valabilitate: CM-1 este un mediu de crioconservare care conține ser, gata de utilizare, care poate fi păstrat în frigider timp de până la un an.


Utilizarea CM-1 pentru congelarea celulelor

Pentru a utiliza CM-1 pentru congelarea celulelor aderente și în suspensie, urmați acești pași

Pentru celulele aderente, spălați-le și disociați-le de substratul de cultură. Pentru celulele în suspensie, treceți direct la pasul următor.
Numărați celulele pentru a vă asigura că sunt la concentrația corespunzătoare.
Centrifugați celulele pentru a le granula, apoi resuspendați-le în mediul de congelare CM-1.
Transferați celulele resuspendate în crioale.
Utilizați o metodă de congelare lentă înainte de a transfera celulele pentru depozitare pe termen lung





Metodă
Descriere
Etape





❄️
Înghețarea manuală

O metodă pas cu pas care implică reducerea treptată a temperaturii pentru a asigura viabilitatea celulelor

1️⃣ Puneți celulele în mediu de congelare într-un congelator la 4°C timp de 40 de minute.
2️⃣ Se transferă la un congelator la -80°C timp de 24 de ore.
3️⃣ Depozitați celulele în azot lichid pentru conservare pe termen lung



❄️
Utilizarea Mr. Frosty

Un dispozitiv convenabil care permite ratele de congelare controlate fără energie electrică

1️⃣ Pregătiți celulele în crioale cu mediu de congelare.
2️⃣ Așezați criovialele în recipientul Mr. Frosty.
3️⃣ Păstrați la -80°C timp de 24 de ore înainte de a transfera în azot lichid



❄️
Congelator cu rată controlată

Un congelator de înaltă precizie de la Thermo Fisher sau de la alți producători conceput pentru reducerea controlată a temperaturii

1️⃣ Programați dispozitivul pentru a reduce treptat temperatura.
2️⃣ Introduceți celulele pregătite în congelator.
3️⃣ După ciclul de congelare, transferați celulele în azot lichid









Depozitați criovialele la temperaturi sub -130°C sau în azot lichid pentru conservare pe termen lung.


Ingrediente

Conține FBS, DMSO, glucoză, săruri
Capacitate de tamponare: pH = 7,2 până la 7,6


Mediul de congelare CM-1 de la Cytion oferă o soluție fiabilă pentru crioconservare, asigurând o viabilitate celulară ridicată și funcționalitate post-dezgheț pentru o gamă largă de aplicații de cercetare.

Prezentare generală a produsului
Volum: 100 ml Depozitare: ≤-15°C Sterilitate: Steril-filtrat
Antibiotic/Antimicotic Solution (100x) este un concentrat steril, gata de utilizare, conceput pentru a reduce riscurile de contaminare microbiană în culturile celulare și în aplicațiile de laborator conexe. Această soluție 100x conține o combinație bine stabilită de penicilină, streptomicină și amfotericină B
- care asigură o activitate antimicrobiană cu spectru larg împotriva bacteriilor Gram-pozitive și Gram-negative, drojdiilor și ciupercilor filamentoase. Formularea este adecvată pentru utilizarea în culturi de celule eucariote, medii bacteriene și alte sisteme sensibile la contaminare, sprijinind operațiunile de laborator curate și consecvente.
Aplicație și beneficii Optimizată pentru protocoalele de cercetare de rutină, această soluție este utilizată pe scară largă pentru menținerea condițiilor aseptice în fluxurile de lucru din culturile celulare. Aceasta oferă performanțe fiabile în medii sensibile la contaminare, ajutând cercetătorii să reducă riscul de creștere microbiană excesivă fără a compromite sănătatea celulelor sau reproductibilitatea experimentelor. Formularea filtrată steril elimină necesitatea unor etape suplimentare de solubilizare, susținând pregătirea raționalizată a mediilor și reducând variabilitatea procedurilor zilnice de laborator.
Utilizare și compatibilitate Pentru a obține concentrații de lucru standard, diluați soluția 1:100 în mediul de cultură complet. Produsul este compatibil cu o gamă largă de linii celulare de mamifere și medii bazale. Datorită disponibilității constante a stocurilor, cercetătorii beneficiază de o continuitate fiabilă a aprovizionării și de o planificare logistică simplificată. Soluția trebuie depozitată la ≤ -15 °C și protejată de cicluri repetate de îngheț-dezgheț pentru a menține stabilitatea. Numai pentru utilizare în cercetare. A nu se utiliza în proceduri diagnostice sau terapeutice. Nu se utilizează la om sau la animale.