Celulele KC

777,00 EUR*

Prețuri fără taxe plus costuri de expediere

cryovial

Numărul produsului: 300604

Fișă cu date de securitate

Fișa produsului

Acord de transfer de materiale

Descriere	KC (Kc167) este o linie celulară embrionară de Drosophila melanogaster derivată dintr-un embrion feminin aflat în stadiul de închidere dorsală, înregistrată în Cellosaurus sub denumirea CVCL_Z833. Linia a fost inițial stabilită și a fost utilizată pe scară largă în biologia celulară a Drosophila, în screening-urile genetice și în genomica funcțională. Celulele Kc167 au fost imortalizate cu SV40 și cresc semi-aderent, formând o populație mixtă de celule atașate și celule care plutesc liber. Acestea se numără printre cele mai bine caracterizate linii celulare de Drosophila și sunt pe deplin susceptibile la silențierea genică mediată de RNAi, ceea ce le face un model fundamental pentru screeningurile de tip RNAi la nivel de genom în biologia nevertebratelor. Celulele KC sunt aplicabile în biologia celulară a Drosophila, screening-urile la nivel de genom cu RNAi și CRISPR, studiile privind căile de transducție a semnalului (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), cercetarea imunității înnăscute și studiile comparative ale căilor conservate din punct de vedere evolutiv. Genomul Drosophila, complet secvențiat și adnotat, combinat cu baze de date publice extinse de reactivi RNAi (de exemplu, DRSC/TRiP), face ca celulele KC să fie deosebit de puternice pentru descoperiri genomice funcționale imparțiale. Se aplică clasificarea BSL-2 datorită imortalizării cu SV40. Celulele KC sunt cultivate în mediu Schneider pentru Drosophila, suplimentat cu 2 mM glutamină și 10% FBS. Un aspect esențial este faptul că liniile celulare de Drosophila sunt cultivate la 25 °C în aer ambiant fără CO₂ (nu la 37 °C / 5% CO₂, ca în cazul celulelor de mamifere). Celulele sunt repicate prin resuspendare și diluare ușoară (creștere semi-aderentă). Mediul este reînnoit sau celulele sunt diluate la fiecare 2–3 zile.
Organism	Drosophila melanogaster (musca fructelor)
Țesut	Embrion
Boala	Normal
Sit metastatic	Embrion (stadiul de închidere dorsală)
Aplicații	Biologia celulară a speciei Drosophila; analize de tip RNAi la nivel de genom; analize CRISPR; transducția semnalului (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); imunitatea înnăscută; genomica funcțională a nevertebratelor
Sinonime	KC, K C

Vârsta	Etapa de închidere dorsală
Gen	Femei
Morfologie	De tip epitelial semi-aderent
Tip de celulă	Celule embrionare
Proprietăți de creștere	semi-aderent

Mențiune	KC (număr de catalog Cytion 300604)
Nivelul de biosecuritate	2
NCBI_TaxID	7227
CellosaurusAccesiune	CVCL_Z833
Statutul OMG	GMO-S2: Această linie celulară de Drosophila conține o casetă de imortalizare SV40 integrată în mod stabil. Este necesară o măsură de izolare de nivel BSL-2. Această clasificare se aplică numai pe teritoriul Germaniei și poate diferi în alte țări.

Sensibilitatea la virus	SV40 imortalizat

Mediu de cultură	Mediu Schneider pentru Drosophila + 2 mM glutamină + 10 % ser fetal bovin (FBS).
Suplimente	Adăugați în mediu 2 mM glutamină și 10% FBS
Reactiv de disociere	Nu este necesar (semi-aderență; resuspendeți cu grijă)
Timp de dublare	aproximativ 24–48 de ore
Subcultură	Pipetați cu grijă cultura pentru a resuspende celulele semi-aderente. Transferați un volum adecvat într-un flacon nou și adăugați mediu Schneider proaspăt, preîncălzit. Diluați până la o densitate de 5 × 10⁵ până la 1 × 10⁶ celule/ml. Incubați la 25 °C în aer ambiant, fără CO₂.
Rata de divizare	1–3
Densitatea de însămânțare	5 × 10⁵ până la 1 × 10⁶ celule/ml
Reînnoirea lichidului	La fiecare 2 sau 3 zile
Înghețați mediul	Ca mediu de crioconservare, folosim mediu de creștere complet (inclusiv FBS) + 10% DMSO pentru o viabilitate adecvată după dezghețare sau CM-1 (număr de catalog Cytion 800100), care include osmoprotectanți optimizați și stabilizatori metabolici pentru a spori recuperarea și a reduce stresul indus de criogenie.
Decongelarea și cultivarea celulelor	Confirmați că flaconul rămâne profund înghețat la livrare, deoarece celulele sunt expediate pe gheață carbonică pentru a menține temperaturi optime în timpul transportului. La primire, fie depozitați crioviola imediat la temperaturi sub -150 °C pentru a asigura păstrarea integrității celulare, fie treceți la etapa 3 dacă este necesară cultivarea imediată. Pentru cultivarea imediată, dezghețați rapid flaconul prin scufundarea acestuia într-o baie de apă la 37 °C cu apă curată și un agent antimicrobian, agitându-l ușor timp de 40-60 de secunde până când rămâne o mică aglomerare de gheață. Se efectuează toate etapele ulterioare în condiții sterile, într-o hotă cu flux, dezinfectând crioviola cu etanol 70% înainte de deschidere. Se deschide cu grijă flaconul dezinfectat și se transferă suspensia celulară într-un tub de centrifugare de 15 ml care conține 8 ml de mediu de cultură la temperatura camerei, amestecând ușor. Se centrifughează amestecul la 300 x g timp de 3 minute pentru a separa celulele și se aruncă cu grijă supernatantul care conține mediul de congelare rezidual. Se resuspendă ușor peletul celular în 10 ml de mediu de cultură proaspăt. Pentru celulele aderente, împărțiți suspensia între două flacoane de cultură T25; pentru culturile în suspensie, transferați tot mediul într-un flacon T25 pentru a promova interacțiunea și creșterea celulară eficientă. Respectați protocoalele de subcultură stabilite pentru creșterea și menținerea continuă a liniei celulare, asigurând rezultate experimentale fiabile.
Atmosfera de incubație	25 °C, aerul din încăpere (nu este necesar CO₂).
Condiții de expediere	Liniile celulare crioconservate sunt expediate pe gheață carbonică în ambalaje izolate, validate, cu suficient agent frigorific pentru a menține aproximativ -78 °C pe toată durata transportului. La primire, se inspectează imediat recipientul și se transferă fără întârziere fiolele în depozitul corespunzător.
Condiții de depozitare	Pentru conservarea pe termen lung, flacoanele se plasează în azot lichid în fază de vapori la o temperatură cuprinsă între -150 și -196 °C. Păstrarea la -80 °C este acceptabilă doar ca o scurtă etapă intermediară înainte de transferul în azot lichid.

Dacă intenționați să utilizați liniile celulare Cytion exclusiv pentru cercetare internă într-un singur centru de cercetare, vă rugăm să completați și să semnați Acordul nostru de transfer de materiale (MTA) și să îl trimiteți împreună cu comanda dumneavoastră.

Pentru orice aplicații comerciale - inclusiv, dar fără a se limita la, lucrări contra cost, teste de control al calității, lansarea de produse, utilizare în scopuri diagnostice sau studii de reglementare - vă rugăm să completați Formularul de utilizare prevăzută, astfel încât să putem pregăti un acord adecvat, adaptat proiectului dumneavoastră.

Vă rugăm să rețineți: MTA se aplică numai anumitor linii celulare. Dacă această notificare și documentul MTA apar pe pagina unui produs, acordul este aplicabil. Pentru liniile celulare care nu sunt acoperite de MTA, nu va fi afișată nicio referință la acord. MTA nu este valabil pentru clienții din America, China sau Taiwan. Vă rugăm să contactați entitatea noastră din S.U.A. pentru a primi acordul corespunzător.

Celulele KC

Informații generale

Caracteristici

Date de reglementare

Date biomoleculare

Manipulare

Controlul calității / Profil genetic / HLA

Acord de transfer de materiale