Cellule RBL-2H3 - Importanza delle cellule RBL-2H3 nella risposta allergica e negli studi immunologici
La linea cellulare RBL-2H3 è una linea cellulare di leucemia basofila derivata dal ratto utilizzata nella ricerca immunologica. Funge da sistema modello per lo studio della fisiologia, del comportamento e delle funzioni dei mastociti. Queste cellule vengono impiegate anche per lo studio delle reazioni allergiche, dei processi immunologici, nonché per la sperimentazione e lo sviluppo di farmaci.
- Terreno di coltura
- Per la coltura delle cellule RBL-2H3 si utilizza un terreno EMEM contenente il 10% di FBS, 2 mM di L-glutammina, 2,2 g/L di NaHCO₃ e sale EBSS. Il terreno deve essere sostituito da 2 a 3 volte alla settimana.
- Tempo di raddoppio
- Il tempo di raddoppio dei mastociti RBL-2H3 è di circa 50-60 ore.
- Tipo di crescita
- La linea cellulare RBL-2H3 è di tipo aderente.
- Livello di biosicurezza
- BSL-2
- Disponibile presso
- Cytion — Ordina RBL-2H3
- Cellule RBL-2H3: Origine e caratteristiche generali
- Cellule RBL-2H3: informazioni sulla coltura
- Vantaggi e limiti della linea cellulare di basofili RBL-2H3
- Linea cellulare RBL-2H3: una pietra miliare nella ricerca immunologica
- Linea cellulare RBL-2H3: domande frequenti essenziali per i ricercatori
- Riferimenti
- Linea cellulare RBL-2H3 per la ricerca immunologica avanzata
- Cellule RBL-2H3: pubblicazioni di ricerca
- Risorse per la linea cellulare RBL-2H3: protocolli, video e altro
- Domande frequenti
Cellule RBL-2H3: origine e caratteristiche generali
Prima di utilizzare una linea cellulare di basofili nella vostra ricerca, è opportuno conoscerne l’origine e le caratteristiche generali. Questa sezione dell’articolo vi fornirà informazioni di base sulle cellule RBL-2H3, ad esempio: cosa sono i mastociti RBL-2H3? Perché utilizzare le cellule RBL-2H3? Cosa sono le cellule RBL-2H3 nella leucemia basofilica del ratto? Qual è la morfologia delle cellule RBL-2H3? Le cellule RBL-2H3 sono immortali?
- Le RBL-2H3 sono cellule di leucemia basofila derivate da cellule basofile di ratto Wistar nel 1978 presso il Laboratorio di Immunologia dell’Istituto Nazionale di Ricerca Odontoiatrica.
- Le cellule RBL-2H3 possiedono il recettore tirosin-chinasi c-kit e i recettori della proteasi II dei mastociti (RMCP-II), il che le rende un potenziale modello di mastociti. Pertanto, sono comunemente chiamate mastociti nonostante la loro origine dai basofili di ratto [1].
- Una volta attivate, rilasciano istamina e altri mediatori ed esprimono recettori IgE ad alta affinità.
- Le cellule RBL-2H3 presentano una morfologia simile a quella dei fibroblasti.
Cellule RBL-2H3: Informazioni sulla coltura
Questa sezione ti aiuterà a comprendere alcuni aspetti fondamentali della coltura della linea cellulare RBL-2H3. Imparerai: qual è il tempo di raddoppio delle cellule RBL-2H3? Qual è la densità di semina delle cellule RBL-2H3? Qual è il protocollo di coltura delle cellule RBL-2H3? Qual è il terreno di congelamento della linea cellulare RBL-2H3?
Punti chiave per la coltura delle cellule RBL-2H3
Tempo di raddoppio della popolazione:
Il tempo di raddoppio dei mastociti RBL-2H3 è di circa 50-60 ore.
Aderenzi o in sospensione:
La RBL-2H3 è una linea cellulare aderente.
Rapporto di subcoltura:
Per le cellule RBL-2H3, il rapporto di subcoltura è compreso tra 1:2 e 1:4. Le cellule aderenti vengono lavate con una soluzione PBS 1x priva di magnesio e calcio. Si aggiunge la soluzione di passaggio Accutase e le cellule vengono mantenute a temperatura ambiente per 10 minuti affinché si distacchino dal fondo della provetta di coltura. Si aggiunge terreno fresco e le cellule vengono centrifugate. Le cellule raccolte vengono accuratamente risospese in terreno fresco e trasferite in nuove fiasche contenenti terreno di crescita.
Terreno di crescita:
Per la coltura delle cellule RBL-2H3 si utilizza un terreno EMEM contenente 10% di FBS, 2 mM di L-glutammina, 2,2 g/L di NaHCO₃ e sale EBSS. Il terreno deve essere sostituito 2-3 volte alla settimana.
Condizioni di crescita:
Le cellule RBL-2H3 vengono coltivate in un incubatore umidificato impostato a una temperatura di 37 °C e collegato a una fonte di CO₂ al 5%.
Conservazione:
Le cellule vengono conservate nella fase vapore dell’azoto liquido o a una temperatura inferiore a -150 °C in un congelatore elettrico per preservarne la vitalità a lungo termine.
Processo di congelamento e terreno di coltura:
Per congelare le cellule RBL-2H3 si utilizzano i terreni di congelamento CM-1 o CM-ACF, impiegando un processo di congelamento lento. In breve, questo metodo consente un abbassamento della temperatura di 1 °C al minuto e protegge le cellule dallo shock termico.
Processo di scongelamento:
Le cellule RBL-2H3 vengono scongelate in un bagno d'acqua prestabilito (37 °C) per circa 60 secondi. Successivamente, le cellule vengono aggiunte a un terreno di coltura fresco e centrifugate. Questa fase è essenziale per rimuovere i componenti del mezzo di congelamento. Successivamente, il pellet cellulare viene risospeso in un terreno di crescita e le cellule vengono trasferite in una fiasca per la coltura.
Livello di biosicurezza:
Le cellule RBL-2H3 devono essere conservate in laboratori di biosicurezza di livello 1.
Pubblicato: 2023 | Ultima revisione: maggio 2026
Vantaggi e limiti della linea cellulare di basofili RBL-2H3
Le cellule RBL-2H3 sono comunemente utilizzate nella ricerca immunologica. Questa sezione illustra i loro principali vantaggi e limiti.
Vantaggi
- Facili da coltivare: le cellule RBL-2H3 possono essere facilmente coltivate e mantenute in ambiente di laboratorio. Ciò facilita la conduzione di esperimenti economici e riproducibili, rendendole una scelta popolare per gli studi iniziali in immunologia.
Limiti
- Origine non umana: provenendo dai basofili di ratto, le cellule RBL-2H3 potrebbero non riprodurre accuratamente i processi biologici umani, il che può limitarne l’applicabilità negli studi di ricerca specifici sull’uomo. Ciò richiede un’interpretazione cauta dei dati quando si estrapolano i risultati ai sistemi umani.
- Modello semplificato dei mastociti: sebbene queste cellule forniscano un modello di base per lo studio delle funzioni dei mastociti, non rappresentano appieno la natura complessa delle interazioni dei mastociti all’interno del sistema immunitario umano. Di conseguenza, potrebbero non riprodurre adeguatamente i ruoli sfaccettati dei mastociti nelle risposte immunitarie o nelle condizioni patologiche in vivo.
Linea cellulare RBL-2H3: una pietra miliare nella ricerca immunologica
Ricerca sui basofili e sui mastociti che utilizza la linea cellulare RBL-2H3
La linea cellulare RBL-2H3, derivata dal Rattus norvegicus, funge da modello chiave per lo studio della biologia dei basofili e dei mastociti. Questi mastociti di ratto forniscono informazioni essenziali sul rilascio dei mediatori dei mastociti, fondamentali per comprendere condizioni allergiche quali la rinite allergica. Attraverso queste cellule, i ricercatori esplorano le dinamiche dei recettori cellulari e la formazione delle sinapsi immunologiche, che sono fondamentali per la risposta del sistema immunitario agli allergeni. Un interessante studio pubblicato nel 2019 ha utilizzato la linea cellulare RBL-2H3 per indagare i meccanismi alla base delle reazioni pseudo-allergiche indotte dall’iniezione di Qingkailing. Lo studio ha rilevato che la cascata di segnalazione PI3K-RAC1 induce parzialmente questa risposta allergica nelle cellule [2].
Dinamica delle sinapsi immunologiche nella ricerca sulle allergie
Ampiamente impiegate nella ricerca immunologica, le cellule RBL-2H3 sono particolarmente efficaci per lo studio delle dinamiche delle sinapsi immunologiche. Ciò contribuisce a chiarire i processi di comunicazione del sistema immunitario, con applicazioni nello studio sia dei mastociti del sangue periferico che di quelli peritoneali. Tale ricerca è fondamentale per una comprensione completa della risposta immunitaria sia in contesti sistemici che localizzati.
Screening farmacologico e test di tossicità
Nello screening e nei test farmacologici, viene sfruttata la reattività delle cellule RBL a vari stimoli, compreso lo studio di come l’H₂O₂ inibisca le risposte mediate dalle IgE. Queste cellule svolgono un ruolo essenziale nello sviluppo di trattamenti per malattie come le infezioni da streptococchi, in cui gli streptococchi del gruppo mitis inibiscono l’attivazione dei mastociti. Oltre a ciò, i ricercatori valutano gli effetti tossici di varie sostanze, tra cui sostanze chimiche, farmaci e nanoparticelle, utilizzando questo modello RBL 2H3 mc. Ad esempio, uno studio recente (2022) ha valutato la citotossicità delle microplastiche di polistirene sulle cellule RBL-2H3. È emerso che le microplastiche danneggiano gli organelli delle cellule RBL-2H3 e favoriscono la morte cellulare [3]. Un altro studio del 2021 ha valutato il potenziale antiallergico e antinfiammatorio di un prodotto naturale, la neferina, utilizzando il modello RBL 2H3 mc. Lo studio ha evidenziato le buone proprietà antiallergiche e antinfiammatorie del composto [4].
Metodologie avanzate nella misurazione immunologica
Il rilascio costante e misurabile di mediatori da parte delle cellule RBL-2H3 le rende ideali per la fluorimetria, facilitando misurazioni precise e accurate, fondamentali per lo studio delle malattie e la valutazione degli agenti terapeutici.
La linea cellulare RBL-2H3, derivata dal Rattus norvegicus, rappresenta una risorsa inestimabile sia nella ricerca di base che in quella applicata nel campo dell’immunologia. Offre ampie opportunità per far progredire le nostre conoscenze e il trattamento delle malattie immunologiche.
Linea cellulare RBL-2H3 per la ricerca immunologica avanzata
Cellule RBL-2H3: Pubblicazioni scientifiche
Di seguito sono riportate alcune interessanti pubblicazioni di ricerca che trattano dei mastociti RBL-2H3:
Attività inibitoria della narirutina sulla degranulazione delle cellule RBL-2H3
Questo articolo di ricerca è stato pubblicato sulla rivista *Immunopharmacology and Immunotoxicology* (2021). Lo studio ha ipotizzato che la narirutina, un composto naturale, eserciti effetti inibitori sulla degranulazione delle cellule RBL-2H3 attraverso la regolazione delle vie di segnalazione NF-κB, MAPK e della tirosin-chinasi.
Questa ricerca pubblicata sull’International Journal of Molecular Sciences (2020) ha suggerito che l’apigenina sopprima in modo significativo le risposte allergiche e infiammatorie delle cellule RBL-2H3 e RAW264.7. Pertanto, potrebbe fungere da potenziale agente per combattere le malattie di origine immunitaria.
Questo articolo di ricerca pubblicato sull’International Journal of Molecular Sciences (2021) ha valutato gli effetti antiallergici e antinfiammatori di un prodotto naturale, la saponarina, utilizzando diverse linee cellulari, tra cui la RBL-2H3.
Questo studio pubblicato su *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* (2014) ha rilevato che gli estratti di Benchalokawichian e alcuni dei suoi costituenti attivi esercitano potenziali effetti inibitori sul rilascio della β-esosaminidasi da parte delle cellule RBL-2H3.
Questo articolo è stato pubblicato nel 2018 sull’International Journal of Biological Macromolecules. Lo studio ha affermato che la Spirulina maxima, un prodotto naturale, inibisce la degranulazione delle cellule RBL 2H3 impedendo la fosforilazione delle MAPK e dell’AKT.
Risorse per la linea cellulare RBL-2H3: protocolli, video e altro
La RBL-2H3 è una linea cellulare di mastociti ampiamente utilizzata. Di seguito sono elencate le risorse disponibili relative ai protocolli di coltura e trasfezione della RBL-2H3:
- Modello RBL-2H3 MC: questo articolo di ricerca comprende i protocolli per il mantenimento delle colture di RBL-2H3 e per la trasfezione di RBL-2H3.
Ecco alcune risorse che illustrano il protocollo di coltura cellulare di RBL-2H3:
- Cellule RBL-2H3: questo sito web è utile per apprendere i protocolli di coltura cellulare relativi alla linea cellulare RBL-2H3. Inoltre, contiene informazioni sui terreni di coltura e sulle condizioni di coltura delle cellule RBL-2H3.
Linea cellulare RBL-2H3: domande frequenti fondamentali per i ricercatori
Bibliografia
- Passante, E. e N. Frankish, La linea cellulare RBL-2H3: la sua provenienza e idoneità come modello per i mastociti. Inflamm Res, 2009. 58(11): pagg. 737-45.
- Li, Q., et al., Reazione pseudoallergica causata dall’iniezione di Qingkailing, in parte attraverso la via di segnalazione PI3K-Rac1 nelle cellule RBL-2H3. Toxicology Research, 2019. 8(3): pp. 353-360.
- Liu, L., et al., Le micro (nano)plastiche di polistirene danneggiano gli organelli delle cellule RBL-2H3 e stimolano la MOAP-1 a indurre l’apoptosi. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
- Chiu, K.-M., et al., Effetti antiallergici e antinfiammatori della neferina sulle cellule RBL-2H3. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.