Cellule PIEC
Informazioni generali
| Descrizione | PIEC (Porcine Iliac Endothelial Cells) è una linea cellulare endoteliale immortalizzata spontaneamente derivata dall'endotelio dell'arteria iliaca di un maiale giovane. La linea cellulare presenta una morfologia tipica a ciottoli quando cresce fino alla confluenza e forma monostrati aderenti in condizioni di coltura standard. Le PIEC conservano caratteristiche endoteliali fondamentali, tra cui l'inibizione da contatto, l'espressione di marcatori endoteliali come il fattore von Willebrand (vWF) e la capacità di formare strutture simili a capillari in appropriati test in vitro. Grazie alla loro origine vascolare, le PIEC sono ampiamente utilizzate come modello per lo studio della biologia endoteliale suina e delle interazioni ospite-patogeno. Dal punto di vista funzionale, le PIEC mostrano caratteristiche coerenti con le cellule endoteliali macrovascolari, tra cui la reattività agli stimoli infiammatori e la capacità di esprimere molecole di adesione coinvolte nel reclutamento dei leucociti. Sono state ampiamente utilizzate nella ricerca virologica, in particolare per la propagazione e lo studio di virus suini come il virus della peste suina classica (CSFV), il virus della peste suina africana (ASFV) e il virus della sindrome riproduttiva e respiratoria dei suini (PRRSV). La loro elevata permissività a determinate infezioni virali e le caratteristiche di crescita stabile li rendono un prezioso sistema in vitro per studi sulla replicazione virale, screening antivirale e ricerca sui vaccini. Oltre alle applicazioni nel campo delle malattie infettive, le PIEC fungono da modello endoteliale di grandi animali per lo studio della funzione di barriera vascolare, dell'attivazione endoteliale, dell'angiogenesi e delle vie di segnalazione infiammatorie. In quanto linea endoteliale di origine suina, le PIEC forniscono rilevanza traslazionale per la ricerca cardiovascolare comparativa e gli studi preclinici in cui vengono comunemente utilizzati modelli suini. |
|---|---|
| Organismo | Maiale |
| Tessuto | Endotelio vascolare |
Caratteristiche
| Morfologia | Epiteliale |
|---|---|
| Proprietà di crescita | Aderente |
Dati normativi
| Citazione | PIEC (numero di catalogo Cytion 305213) |
|---|---|
| Livello di biosicurezza | 1 |
| NCBI_TaxID | 9823 |
| CellosauroAccesso | CVCL_C0W5 |
Dati biomolecolari
Manipolazione
| Terreno di coltura | RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a) |
|---|---|
| Integratori | Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente |
| Reagente di dissociazione | Accutase |
| Sottocoltura | Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco. |
| Rapporto di divisione | da 1:2 a 1:4 |
| Rinnovo del fluido | da 2 a 3 volte alla settimana |
| Prodotto da congelare | Come terreno di crioconservazione, utilizzare un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, oppure CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto. |
| Scongelamento e coltura delle cellule |
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| Atmosfera di incubazione | 37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata. |
| Rivestimento del pallone | Per un attaccamento e una vitalità ottimali dopo lo scongelamento, si consiglia di utilizzare fiasche o piastre rivestite di collagene. |
| Procedura di congelamento | Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato. |
| Condizioni di spedizione | Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato. |
| Condizioni di conservazione | Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido. |
Controllo di qualità / Profilo genetico / HLA
| Sterilità | La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza. Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane. |
|---|
Certificato di analisi (CoA)
| Numero di lotto | Tipo di certificato | Data | Numero di catalogo |
|---|---|---|---|
| 305213-070524 | Certificato di analisi | 23. May. 2025 | 305213 |
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