Cellule MM.1S-Luc

Vi presentiamo il terreno Ham's F-12K (Kaighn's), una modifica specializzata del terreno Ham's F-12 progettata per soddisfare i requisiti unici della ricerca biologica. Questo terreno avanzato offre vantaggi distinti, migliorando la coltivazione di epatociti umani primari, nonché di cellule epatiche di ratto e di pollo, in particolare in condizioni di siero ridotto.

Il terreno Ham's F-12K (Kaighn's) è stato accuratamente formulato per ottimizzare le condizioni di coltura cellulare. Presenta una composizione arricchita, che fornisce livelli elevati di componenti essenziali come aminoacidi e piruvato di sodio, oltre a elementi aggiuntivi come putrescina, timidina, ipoxantina e zinco. Queste aggiunte consentono ai ricercatori di integrare il terreno di coltura con una quantità minima di siero o di componenti definiti per specifici tipi di cellule, facilitando condizioni sperimentali precise.

In particolare, il terreno Ham's F-12K (Kaighn's) non contiene proteine o fattori di crescita. Di conseguenza, spesso è necessaria un'integrazione con fattori di crescita e siero bovino fetale (FBS), consentendo ai ricercatori di adattare il terreno di coltura ai requisiti delle loro specifiche linee cellulari. Per ottenere prestazioni ottimali, la concentrazione di FBS deve essere accuratamente ottimizzata per ogni linea cellulare, garantendo una crescita e una funzionalità ottimali.

Per mantenere il pH fisiologico, il terreno Ham's F-12K (Kaighn's) impiega un sistema tampone di bicarbonato di sodio (2,5 g/L), che richiede un ambiente controllato al 5-10% di CO2 durante la coltivazione. Ciò garantisce che il pH del terreno rimanga nell'intervallo ideale per la crescita e la vitalità delle cellule
Controllo di qualità

pH = 7,2 +/
- 0,02 a 20-25°C.
Ogni lotto è stato testato per verificare la sterilità e l'assenza di micoplasmi e batteri.

Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Il congelamento e il riscaldamento fino a +37°C riducono la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura a più di 37°C e non utilizzare fonti di calore incontrollabili (ad esempio, apparecchi a microonde).
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare questa quantità dal flacone e riscaldarla a temperatura ambiente.
La durata di conservazione di qualsiasi terreno di coltura, tranne quello di base, è di 8 settimane dalla data di produzione.

Composizione




Componenti
mg/L


Sali inorganici
Cloruro di calcio x 2H2O
135,24



Solfato di rame(II) x 5H2O
0,00



Solfato di ferro (II) x 7H2O
0,83



Cloruro di magnesio x 6H2O
105,72



Solfato di magnesio x 7H2O
394,49



Cloruro di potassio
283,29



Potassio diidrogeno fosfato
58,52



Cloruro di sodio
7597,20



idrogeno fosfato di sodioanidro
115,02



Solfato di zinco x 7H2O
0,14


Altri componenti
D(+)-Glucosio anidro
1260,00



Ipossantina
4,08



Acido DL-α-Lipoico
0,21



Rosso fenolo
3,00



Putrescina x 2HCl
0,32



Sodio piruvato
220,00



NaHCO3
2500,00



Timidina
0,73


Aminoacidi
L-alanina
17,82



L-Arginina x HCl
421,40



L-Asparagina x H2O
30,02



Acido L-aspartico
26,62



L-cisteina x HCl x H2O
70,24



L-Glutammina
292,20



Acido L-Glutammico
29,42



Glicina
15,01



L-istidina x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucina
7,87



L-leucina
26,24



L-lisina x HCl
73,04



L-metionina
8,95



L-fenilalanina
9,91



L-Prolina
69,06



L-Serina
21,02



L-treonina
23,82



L-triptofano
4,08



L-tirosina
10,87



L-Valina
23,42


Vitamine
D(+)-Biotina
0,07



D-pantotenato di calcio
0,48



Cloruro di colina
13,96



Acido folico
1,32



mio-inositolo
18,02



Nicotinamide
0,04



Piridossina x HCl
0,06



Riboflavina
0,04



Tiamina x HCl
0,34



Vitamina B12
1,36

Soluzione per il distacco cellulare Accutase con EDTA e rosso fenolo – 100 ml

Accutase è una soluzione per il distacco cellulare pronta all'uso e filtrata sterilmente, progettata come alternativa delicata alla tripsina/EDTA per la dissociazione delle cellule mammifere aderenti da strumenti standard in plastica per coltura tissutale e da superfici rivestite per l'adesione. Combina l'attività degli enzimi proteolitici e collagenolitici in una soluzione salina bilanciata per garantire una dissociazione efficace ma controllata, preservando le proteine della superficie cellulare e favorendo un'elevata vitalità post-passaggio e un rapido riattaccamento.

La formulazione di Accutase si basa sulla soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco (DPBS) con EDTA e rosso fenolo come indicatore visivo del pH. Gli enzimi sono di origine non mammifera e non batterica, rendendo Accutase particolarmente adatto alla ricerca sulle cellule staminali, ai flussi di lavoro relativi ai vaccini e a qualsiasi applicazione in cui sia necessario ridurre al minimo i contaminanti di origine animale o microbica. La soluzione si autoinibisce a 37 °C, quindi dopo il distacco non sono necessari reagenti neutralizzanti o terreni di coltura contenenti siero: le cellule possono essere trasferite direttamente in un terreno fresco.

Caratteristiche principali

Liquido 1x filtrato sterile pronto all'uso – non richiede diluizione o ricostituzione
Attività enzimatica combinata proteolitica e collagenolitica per una dissociazione delicata
Ogni lotto è standardizzato a un'attività di dissociazione definita per garantire l'uniformità tra i lotti
Enzimi di origine non mammifera e non batterica
Autoinibizione a 37 °C – non è necessaria alcuna soluzione neutralizzante
Formulato in PBS di Dulbecco con EDTA
Fenolo rosso incluso come indicatore visivo del pH
pH 6,8 – 7,8


Applicazioni tipiche
Accutase dissocia delicatamente un'ampia varietà di tipi di cellule aderenti e sensibili, tra cui cellule staminali embrionali umane (hESC), cellule staminali pluripotenti indotte umane (iPSC), cellule staminali neurali, neuroni primari e linee aderenti coltivate di routine come HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 e A549. I casi d'uso tipici includono:

Subcoltura e passaggi di routine di cellule mammifere aderenti
Delicata dissociazione di singole cellule di hESC, iPSC e altre linee sensibili
Preparazione dei campioni per la citometria a flusso e l'analisi FACS
Analisi dei marcatori di superficie cellulare in cui l'integrità dell'epitopo è fondamentale
Test di migrazione, proliferazione e apoptosi cellulare
Test di quiescenza mediante privazione di siero e studi di trasfezione di oncogeni
Test di migrazione delle cellule tumorali e delle cellule della cresta neurale
Aumento della produzione nei flussi di lavoro dei bioreattori

Per il lavoro di routine, applicare circa 10 ml di Accutase per 75 cm2 di superficie di coltura e incubare per 5-10 minuti a temperatura ambiente. Il tempo di incubazione ottimale deve essere determinato per ciascuna linea cellulare e non deve superare un'ora. Prima dell'aggiunta, risciacquare lo strato cellulare con una soluzione salina priva di Ca2+/Mg2+, come il DPBS senza calcio e magnesio, per rimuovere il siero residuo e i cationi bivalenti.

Manipolazione e conservazione
Conservare il flacone chiuso congelato a -15 °C o a temperature inferiori. Scongelare a temperatura ambiente o durante la notte a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C. Non scongelare Accutase in un bagno d’acqua a 37 °C, poiché le temperature elevate riducono l’attività enzimatica. Dopo lo scongelamento, la soluzione può essere conservata per un massimo di 2 mesi a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C; non conservare a temperatura ambiente. Non preriscaldare il reagente a 37 °C prima dell'applicazione: aggiungerlo direttamente alle cellule lavate a temperatura ambiente. Per una conservazione a lungo termine, si raccomanda l'aliquotazione monouso per evitare cicli di scongelamento ripetuti. Lavorare sempre in condizioni asettiche.

Qualità
Prodotto secondo rigorosi standard di qualità. Ogni lotto di Accutase viene filtrato in modo sterile e testato per sterilità, pH, aspetto e attività di dissociazione per garantire prestazioni costanti e riproducibili da lotto a lotto.

Specifiche del prodotto



Specifiche
Dettagli



Tipo di prodottoReagente per il distacco/la dissociazione cellulare
FormatoLiquido filtrato sterile, pronto all'uso
Volume100 ml
Concentrazione di lavoro1x (pronto all'uso)
Attività enzimaticaProteolitica e collagenolitica combinata
Origine dell'enzimaNon mammifera e non batterica
Sistema tamponePBS di Dulbecco con EDTA
Indicatore di pHRosso fenolo
Intervallo di pH6,8 – 7,8
AspettoSoluzione limpida, di colore da rosso pallido ad arancione
Temperatura di conservazione-15 °C o inferiore
Stabilità dopo lo scongelamentoFino a 2 mesi a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C
Volume d'uso raccomandato~10 ml per 75 cm² di superficie di coltura
Tempo di incubazione tipico5 – 10 minuti a temperatura ambiente
Condizioni di spedizioneCongelato in ghiaccio secco
Destinazione d'usoSolo per uso di ricerca e ulteriore produzione



Formulazione (Composizione per litro)



Componente
Concentrazione (mg/L)




Sali inorganici

Cloruro di sodio (NaCl)8000,00
Idrogenofosfato disodico (Na2HPO4)1150,00
Cloruro di potassio (KCl)200,00
Dihidrogenofosfato di potassio (KH2PO4)200,00

Altri componenti

EDTA · 4Na (EDTA tetrasodico)220,00
Rosso fenolo3,00
Miscela enzimatica brevettata (attività proteolitica e collagenolitica)1x



Accutase è un marchio registrato di Innovative Cell Technologies, Inc.

Il Freeze Medium CM-1 di Cytion è un mezzo di crioconservazione all'avanguardia, progettato per garantire il massimo livello di vitalità e funzionalità delle cellule dopo il disgelo. Questo terreno versatile è adatto a un ampio spettro di tipi di cellule, comprese quelle umane e animali, ed è quindi uno strumento essenziale per diverse applicazioni di ricerca. Formulato con una combinazione meticolosamente bilanciata di crioprotettori e nutrienti essenziali, Freeze Medium CM-1 riduce al minimo la formazione di cristalli di ghiaccio e lo stress cellulare durante il processo di congelamento, preservando così l'integrità cellulare.
Le caratteristiche principali del Freeze Medium CM-1 includono:

Ampia compatibilità: Efficace per un'ampia gamma di tipi di cellule, tra cui cellule primarie, cellule staminali e linee cellulari consolidate.
Alta vitalità: Ottimizzato per massimizzare il recupero e la vitalità delle cellule dopo lo scongelamento, garantendo risultati sperimentali affidabili.
Pronto all'uso: Comodamente preparato e sterilizzato per l'applicazione immediata, riducendo i tempi di preparazione e il rischio di contaminazione.
Maggiore stabilità: Mantiene prestazioni costanti in condizioni di crioconservazione standard, garantendo risultati riproducibili.
Lunga durata di conservazione: CM-1 è un terreno di crioconservazione contenente siero, pronto all'uso, che può essere conservato in frigorifero fino a un anno.


Uso del CM-1 per il congelamento delle cellule

Per utilizzare CM-1 per il congelamento di cellule aderenti e in sospensione, procedere come segue

Per le cellule aderenti, lavarle e dissociarle dal substrato di coltura. Per le cellule in sospensione, passare direttamente alla fase successiva.
Contare le cellule per assicurarsi che siano alla giusta concentrazione.
Centrifugare le cellule per pellettizzarle, quindi risospenderle nel terreno di coltura CM-1.
Trasferire le cellule risospese in crioviali.
Utilizzare un metodo di congelamento lento prima di trasferire le cellule alla conservazione a lungo termine





Metodo
Descrizione
Passi





❄️
Congelamento manuale

Un metodo graduale che prevede una riduzione graduale della temperatura per garantire la vitalità delle cellule

1️⃣ Mettere le cellule nel terreno di coltura in un congelatore a 4°C per 40 minuti.
2️⃣ Trasferire in un congelatore a -80°C per 24 ore.
3️⃣ Conservare le cellule in azoto liquido per la conservazione a lungo termine



❄️
Utilizzo di Mr. Frosty

Un comodo dispositivo che consente di controllare la velocità di congelamento senza l'uso di energia elettrica

1️⃣ Preparare le cellule in crioviali con terreno di congelamento.
2️⃣ Collocare le crioviali nel contenitore Mr. Frosty.
3️⃣ Conservare a -80°C per 24 ore prima di trasferire in azoto liquido



❄️
Congelatore a velocità controllata

Un congelatore di alta precisione di Thermo Fisher o di altri produttori progettato per la riduzione controllata della temperatura

1️⃣ Programmare il dispositivo per ridurre gradualmente la temperatura.
2️⃣ Collocare le cellule preparate nel congelatore.
3️⃣ Dopo il ciclo di congelamento, trasferire le cellule in azoto liquido









Conservare le crioviali a temperature inferiori a -130°C o in azoto liquido per la conservazione a lungo termine.


Ingredienti

Contiene FBS, DMSO, Glucosio, Sali
Capacità tampone: pH = 7,2
- 7,6


Il terreno di congelamento CM-1 di Cytion offre una soluzione affidabile per la crioconservazione, garantendo un'elevata vitalità cellulare e funzionalità dopo il disgelo per un'ampia gamma di applicazioni di ricerca.

Panoramica del prodotto
Volume: 100 ml Conservazione: ≤-15°C Sterilità: Filtrato sterile
Lasoluzione antibiotica/antimicotica (100x) è un concentrato sterile pronto all'uso, progettato per ridurre i rischi di contaminazione microbica nelle colture cellulari e nelle relative applicazioni di laboratorio. Questa soluzione 100x contiene una combinazione consolidata di penicillina, streptomicina e amfotericina B, che fornisce un'attività antimicrobica ad ampio spettro contro batteri Gram-positivi e Gram-negativi, lieviti e funghi filamentosi. La formulazione è adatta all'uso in colture cellulari eucariotiche, terreni di coltura batterici e altri sistemi sensibili alla contaminazione, a sostegno di operazioni di laboratorio pulite e coerenti.
Applicazione e vantaggi Ottimizzata per i protocolli di ricerca di routine, questa soluzione è ampiamente utilizzata per mantenere condizioni asettiche nei flussi di lavoro delle colture cellulari. Offre prestazioni affidabili in ambienti sensibili alla contaminazione, aiutando i ricercatori a ridurre il rischio di crescita microbica senza compromettere la salute delle cellule o la riproducibilità degli esperimenti. La formulazione filtrata sterile elimina la necessità di ulteriori fasi di solubilizzazione, favorendo una preparazione semplificata dei terreni di coltura e riducendo la variabilità delle procedure quotidiane di laboratorio.
Uso e compatibilità Per ottenere concentrazioni standard di lavoro, diluire la soluzione 1:100 nel terreno di coltura completo. Il prodotto è compatibile con un'ampia gamma di linee cellulari di mammifero e di terreni di coltura basali. Grazie alla disponibilità costante delle scorte, i ricercatori possono beneficiare di una continuità di approvvigionamento affidabile e di una pianificazione logistica semplificata. La soluzione deve essere conservata a ≤ -15 °C e protetta da ripetuti cicli di congelamento e scongelamento per mantenerne la stabilità. Solo per uso di ricerca. Non per l'uso in procedure diagnostiche o terapeutiche. Non per uso umano o animale.