Cellule HaCaT
Fatti essenziali sulle cellule Hacat
| Descrizione | Le cellule HaCaT sono un modello fondamentale nella ricerca dermatologica, in quanto offrono approfondimenti sui complessi meccanismi della biologia e della patologia della pelle. La linea cellulare HaCaT immortalizzata spontaneamente deriva da cellule epidermiche umane adulte e conserva la capacità di proliferare e di subire differenziazione, in modo simile ai cheratinociti basali in vivo. Le cellule HaCaT costituiscono una solida piattaforma per indagare il processo di differenziazione epidermica e studiare i marcatori di differenziazione epidermica essenziali per mantenere l'integrità della pelle. La suscettibilità delle cellule HaCaT all'apoptosi e la loro sensibilità agli agenti che inducono l'apoptosi sono ampiamente studiate, in particolare nel contesto di agenti citotossici come la RIPL. I ricercatori valutano la citotossicità di questi agenti e l'entità della citotossicità usando cellule HaCaT, utilizzando tecniche come la microscopia a fluorescenza per visualizzare i cambiamenti cellulari. I ricercatori hanno sfruttato le cellule HaCaT per esaminare gli effetti di vari agenti, compresi i substrati antimicrobici e la loro influenza sulla vitalità cellulare. Queste cellule sono un substrato eccellente per testare biomateriali antimicrobici e substrati di atelocollagene antimicrobico, fondamentali per la riparazione della pelle e le applicazioni mediche. La linea epidermica HaCaT svolge inoltre un ruolo cruciale nello studio della senescenza cellulare, delle citochine e dei profili di espressione genica legati all'invecchiamento e alle malattie croniche. I profili trascrizionali delle cellule HaCaT, compreso il ruolo di κB e dei microRNA, forniscono informazioni sui meccanismi di regolazione a livello molecolare. La linea di cheratinociti HaCaT, con le sue caratteristiche di cheratinociti epidermici, offre un sistema praticabile per analizzare l'intricata interazione tra cellule epidermiche e sistema immunitario, in particolare il ruolo dei cheratinociti negli stati patologici. Esse consentono di esplorare le modifiche epigenetiche e la loro influenza sulla differenziazione dei cheratinociti, compresa la formazione dell'involucro cornificato, una caratteristica chiave della funzione di barriera della pelle. In sintesi, le cellule HaCaT sono un modello indispensabile nella ricerca dermatologica, in quanto facilitano una comprensione più approfondita della biologia e della patologia della pelle grazie alla loro somiglianza con i cheratinociti basali e alla loro capacità di subire crescita e differenziazione cellulare. La loro applicazione spazia dallo studio della differenziazione epidermica e degli effetti antimicrobici all'esplorazione delle risposte cellulari come l'apoptosi, rendendoli una pietra miliare della biologia cellulare e della ricerca biomedica. |
|---|---|
| Organismo | Umano |
| Tessuto | La pelle |
Dettagli
| Età | 62 anni |
|---|---|
| Genere | Uomo |
| Etnia | Caucasico |
| Tipo di cellula | Cheratinociti con un diametro di 20-25 micrometri. |
| Proprietà di crescita | Aderente |
Documentazione
| Citazione | HaCaT (catalogo Cytion numero 300493) |
|---|---|
| Livello di biosicurezza | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosauroAccesso | CVCL_0038 |
| Depositante | DKFZ, Heidelberg |
Genetica della linea cellulare di cheratinociti HaCaT
| Tumorigenico | No |
|---|---|
| Cariotipo | Aneuploide (ipotetraploide) |
Gestione della linea cellulare Hacat
| Terreno di coltura | DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a) |
|---|---|
| Integratori | Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS |
| Reagente di dissociazione | La miscela 1:1 di EDTA (stock: 0,05%) e tripsina (stock: 0,1%) deve essere preparata ogni volta prima del distacco delle cellule usando PBS senza Ca2+ e Mg2+ per fornire un'osmolarità fisiologica. Si sconsiglia di utilizzare miscele pronte all'uso di tripsina/EDTA, che potrebbero causare la formazione di grumi di cellule. In alternativa, è possibile utilizzare TrypLE Express (Life Technologies) al posto di tripsina/EDTA. Seguire il protocollo del produttore. |
| Tempo di raddoppio | Il tempo di raddoppio delle cellule HaCaT è di 28 ore. |
| Sottocoltura |
|
| Rapporto di divisione | Si consiglia un rapporto da 1:5 a 1:10 |
| Densità di semina | 1 x 104 cellule/cm2 |
| Rinnovo del fluido | 2 volte a settimana |
| Prodotto da congelare | Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto. |
| Scongelamento e coltura delle cellule |
|
| Atmosfera di incubazione | 37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata. |
| Rivestimento del pallone | Per un attaccamento e una vitalità ottimali dopo lo scongelamento, si consiglia di utilizzare fiasche o piastre rivestite di collagene. |
| Procedura di congelamento | Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato. |
| Condizioni di spedizione | Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato. |
| Condizioni di conservazione | Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido. |
Garanzia di qualità
| Sterilità | La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza. Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane. |
|---|---|
| Profilo STR |
Amelogenina: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 9.3
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
Penta E: 7,12
Penta D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| Alleli HLA |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: '03:04:01, '15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: '01:03:01, '01:03:02
|
Certificato di analisi (CoA)
| Numero di lotto | Tipo di certificato | Data | Numero di catalogo |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | Certificato di analisi | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | Certificato di analisi | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | Certificato di analisi | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | Certificato di analisi | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | Certificato di analisi | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | Certificato di analisi | 23. May. 2025 | 300493 |