Cellule HT55

430,00 €*

I prodotti vengono spediti congelati in ghiaccio secco in criotubi. Ogni criotubo contiene in genere 3 × 10 ⁶ cellule per le linee aderenti o 5 × 10⁶ cellule per le linee in sospensione (per ulteriori dettagli, consultare il certificato di analisi del lotto).

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cryovial

Numero di prodotto: 305018

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Descrizione	HT55 è una linea cellulare di adenocarcinoma rettale umano ottenuta da un tumore rettale primario di una donna caucasica di 54 anni. La linea cresce sotto forma di monostrato aderente con morfologia di tipo epiteliale ed è registrata su Cellosaurus con il codice CVCL_1294. HT55 presenta molteplici mutazioni eterozigoti e omozigoti con perdita di funzione nel gene oncosoppressore APC (poliposi adenomatosa coli), tra cui p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr e p.Lys241Ter (tutte eterozigoti), oltre a una sostituzione omozigote p.Arg213Leu. Questo profilo mutazionale rende HT55 un modello biologicamente rilevante della carcinogenesi colorettale guidata dall’APC, riflettendo la disregolazione della via WNT canonica che è all’origine della maggior parte dei tumori colorettali umani. La linea HT55 è ampiamente utilizzata nella ricerca sul carcinoma colorettale per studi sulla segnalazione WNT/β-catenina, sulla funzione del soppressore tumorale APC, sulla sensibilità e resistenza ai farmaci e sulla valutazione preclinica di agenti mirati contro i componenti della via di segnalazione WNT. La linea è adatta per saggi farmacologici in vitro e studi su xenotrapianti in modelli murini immunocompromessi, fornendo una piattaforma in vitro aderente e maneggevole per la ricerca meccanicistica e traslazionale sul cancro del colon-retto. La presenza di molteplici mutazioni da troncamento del gene APC rende la linea HT55 rappresentativa del sottotipo di tumore del colon-retto microsatellite-stabile e cromosomicamente instabile, comunemente causato dalla perdita di funzione di APC. La linea HT55 viene mantenuta in EMEM (MEM Eagle, p: 2 mM L-glutammina, p: 2,2 g/L NaHCO₃, p: EBSS; codice articolo Cytion 820100a) integrato con il 10% di FBS a 37 °C in un’atmosfera umidificata con il 5% di CO₂. Le cellule vengono sottoposte a subcoltura utilizzando Accutase quando raggiungono una confluenza di circa l’80–90%, con un rapporto di divisione raccomandato compreso tra 1:3 e 1:5 e una densità di semina di 1–3 × 10⁴ cellule/cm². Il terreno di coltura viene rinnovato ogni 2–3 giorni. Il tempo di raddoppio è di circa 28 ore.
Organismo	Umano
Tessuto	Retto
Malattia	Adenocarcinoma
Applicazioni	Ricerca sul cancro del colon-retto; studi sulla via di segnalazione WNT/APC; test di sensibilità e resistenza ai farmaci; oncologia preclinica; modelli di xenotrapianto; valutazione delle terapie mirate
Sinonimi	HT55

Età	54 anni
Genere	Donna
Etnia	Caucasico
Morfologia	Simile all'epitelio
Tipo di cellula	Cellule epiteliali
Proprietà di crescita	Aderente

Citazione	HT55 (codice Cytion 305018)
Livello di biosicurezza	1
NCBI_TaxID	9606
CellosauroAccesso	CVCL_1294

Profilo mutazionale	Mutazione: p.Gln1131Ter, eterozigote; Mutazione: p.Gln1303Ter, eterozigote; Mutazione: p.Arg1463Ser, eterozigote; Mutazione: p.Asn581Tyr, eterozigote; Mutazione: p.Lys241Ter, eterozigote; Mutazione: p.Arg213Leu, omozigote

Terreno di coltura	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Integratori	Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione	Accutase
Tempo di raddoppio	28 ore
Sottocoltura	Rimuovere il vecchio terreno di coltura dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS, mentre per le fiasche T75 utilizzare 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per quelle T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per distaccarle. Dopo l’incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno di coltura per risospenderle, quindi centrifugare a 300×g per 3 minuti. Eliminare il surnatante, risospendere le cellule in terreno di coltura fresco e trasferirle in nuove fiasche che contengano già terreno di coltura fresco.
Rapporto di divisione	Da 1 a 5
Densità di semina	Da 1 a 3 x 10⁴ ^cellule/cm²
Rinnovo del fluido	Ogni 2 o 3 giorni
Prodotto da congelare	Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Scongelamento e coltura delle cellule	Verificare che la fiala rimanga profondamente congelata al momento della consegna, poiché le cellule vengono spedite con ghiaccio secco per mantenere le temperature ottimali durante il trasporto. Al ricevimento, conservare immediatamente la criovial a temperature inferiori a -150°C per garantire la conservazione dell'integrità cellulare, oppure procedere al punto 3 se è necessaria una coltura immediata. Per la coltura immediata, scongelare rapidamente la fiala immergendola in un bagno d'acqua a 37°C con acqua pulita e un agente antimicrobico, agitando delicatamente per 40-60 secondi finché non rimane un piccolo grumo di ghiaccio. Eseguire tutte le fasi successive in condizioni di sterilità in una cappa a flusso, disinfettando la criovial con etanolo al 70% prima dell'apertura. Aprire con cautela la fiala disinfettata e trasferire la sospensione cellulare in una provetta da centrifuga da 15 ml contenente 8 ml di terreno di coltura a temperatura ambiente, mescolando delicatamente. Centrifugare la miscela a 300 x g per 3 minuti per separare le cellule e scartare con cura il surnatante contenente il terreno di coltura residuo. Risospendere delicatamente il pellet cellulare in 10 ml di terreno di coltura fresco. Per le cellule aderenti, dividere la sospensione tra due fiasche di coltura T25; per le colture in sospensione, trasferire tutto il terreno in una fiasca T25 per promuovere l'interazione e la crescita delle cellule. Attenersi ai protocolli di subcoltura stabiliti per la crescita e il mantenimento continui della linea cellulare, garantendo risultati sperimentali affidabili.
Atmosfera di incubazione	37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.
Condizioni di spedizione	Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.
Condizioni di conservazione	Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Se si intende utilizzare le linee cellulari Cytion esclusivamente per la ricerca interna in un unico sito di ricerca, si prega di compilare e firmare il nostro Accordo di trasferimento dei materiali (MTA) e di inviarlo insieme all'ordine.

Per qualsiasi applicazione commerciale, inclusi, a titolo esemplificativo ma non esaustivo, lavori a pagamento, test di controllo qualità, rilascio di prodotti, uso diagnostico o studi normativi, compilate il Modulo di uso previsto in modo che possiamo preparare un accordo adeguato su misura per il vostro progetto.

Nota: l'MTA si applica solo a determinate linee cellulari. Se questa nota e il documento MTA compaiono su una pagina di prodotto, l'accordo è applicabile. Per le linee cellulari non coperte dall'MTA, non verrà mostrato alcun riferimento all'accordo. L'MTA non è valido per i clienti nelle Americhe, in Cina o a Taiwan. Contattate la nostra entità statunitense per ricevere l'accordo appropriato.

Cellule HT55

Informazioni generali

Caratteristiche

Dati normativi

Dati biomolecolari

Manipolazione

Controllo qualità e analisi molecolare

Contratto di trasferimento di materiale