Cellule HCC827-Luc

Soluzione per il distacco cellulare Accutase con EDTA e rosso fenolo – 100 ml

Accutase è una soluzione per il distacco cellulare pronta all'uso e filtrata sterilmente, progettata come alternativa delicata alla tripsina/EDTA per la dissociazione delle cellule mammifere aderenti da strumenti standard in plastica per coltura tissutale e da superfici rivestite per l'adesione. Combina l'attività degli enzimi proteolitici e collagenolitici in una soluzione salina bilanciata per garantire una dissociazione efficace ma controllata, preservando le proteine della superficie cellulare e favorendo un'elevata vitalità post-passaggio e un rapido riattaccamento.

La formulazione di Accutase si basa sulla soluzione salina tamponata con fosfato di Dulbecco (DPBS) con EDTA e rosso fenolo come indicatore visivo del pH. Gli enzimi sono di origine non mammifera e non batterica, rendendo Accutase particolarmente adatto alla ricerca sulle cellule staminali, ai flussi di lavoro relativi ai vaccini e a qualsiasi applicazione in cui sia necessario ridurre al minimo i contaminanti di origine animale o microbica. La soluzione si autoinibisce a 37 °C, quindi dopo il distacco non sono necessari reagenti neutralizzanti o terreni di coltura contenenti siero: le cellule possono essere trasferite direttamente in un terreno fresco.

Caratteristiche principali

Liquido 1x filtrato sterile pronto all'uso – non richiede diluizione o ricostituzione
Attività enzimatica combinata proteolitica e collagenolitica per una dissociazione delicata
Ogni lotto è standardizzato a un'attività di dissociazione definita per garantire l'uniformità tra i lotti
Enzimi di origine non mammifera e non batterica
Autoinibizione a 37 °C – non è necessaria alcuna soluzione neutralizzante
Formulato in PBS di Dulbecco con EDTA
Fenolo rosso incluso come indicatore visivo del pH
pH 6,8 – 7,8


Applicazioni tipiche
Accutase dissocia delicatamente un'ampia varietà di tipi di cellule aderenti e sensibili, tra cui cellule staminali embrionali umane (hESC), cellule staminali pluripotenti indotte umane (iPSC), cellule staminali neurali, neuroni primari e linee aderenti coltivate di routine come HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 e A549. I casi d'uso tipici includono:

Subcoltura e passaggi di routine di cellule mammifere aderenti
Delicata dissociazione di singole cellule di hESC, iPSC e altre linee sensibili
Preparazione dei campioni per la citometria a flusso e l'analisi FACS
Analisi dei marcatori di superficie cellulare in cui l'integrità dell'epitopo è fondamentale
Test di migrazione, proliferazione e apoptosi cellulare
Test di quiescenza mediante privazione di siero e studi di trasfezione di oncogeni
Test di migrazione delle cellule tumorali e delle cellule della cresta neurale
Aumento della produzione nei flussi di lavoro dei bioreattori

Per il lavoro di routine, applicare circa 10 ml di Accutase per 75 cm2 di superficie di coltura e incubare per 5-10 minuti a temperatura ambiente. Il tempo di incubazione ottimale deve essere determinato per ciascuna linea cellulare e non deve superare un'ora. Prima dell'aggiunta, risciacquare lo strato cellulare con una soluzione salina priva di Ca2+/Mg2+, come il DPBS senza calcio e magnesio, per rimuovere il siero residuo e i cationi bivalenti.

Manipolazione e conservazione
Conservare il flacone chiuso congelato a -15 °C o a temperature inferiori. Scongelare a temperatura ambiente o durante la notte a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C. Non scongelare Accutase in un bagno d’acqua a 37 °C, poiché le temperature elevate riducono l’attività enzimatica. Dopo lo scongelamento, la soluzione può essere conservata per un massimo di 2 mesi a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C; non conservare a temperatura ambiente. Non preriscaldare il reagente a 37 °C prima dell'applicazione: aggiungerlo direttamente alle cellule lavate a temperatura ambiente. Per una conservazione a lungo termine, si raccomanda l'aliquotazione monouso per evitare cicli di scongelamento ripetuti. Lavorare sempre in condizioni asettiche.

Qualità
Prodotto secondo rigorosi standard di qualità. Ogni lotto di Accutase viene filtrato in modo sterile e testato per sterilità, pH, aspetto e attività di dissociazione per garantire prestazioni costanti e riproducibili da lotto a lotto.

Specifiche del prodotto



Specifiche
Dettagli



Tipo di prodottoReagente per il distacco/la dissociazione cellulare
FormatoLiquido filtrato sterile, pronto all'uso
Volume100 ml
Concentrazione di lavoro1x (pronto all'uso)
Attività enzimaticaProteolitica e collagenolitica combinata
Origine dell'enzimaNon mammifera e non batterica
Sistema tamponePBS di Dulbecco con EDTA
Indicatore di pHRosso fenolo
Intervallo di pH6,8 – 7,8
AspettoSoluzione limpida, di colore da rosso pallido ad arancione
Temperatura di conservazione-15 °C o inferiore
Stabilità dopo lo scongelamentoFino a 2 mesi a una temperatura compresa tra +2 °C e +8 °C
Volume d'uso raccomandato~10 ml per 75 cm² di superficie di coltura
Tempo di incubazione tipico5 – 10 minuti a temperatura ambiente
Condizioni di spedizioneCongelato in ghiaccio secco
Destinazione d'usoSolo per uso di ricerca e ulteriore produzione



Formulazione (Composizione per litro)



Componente
Concentrazione (mg/L)




Sali inorganici

Cloruro di sodio (NaCl)8000,00
Idrogenofosfato disodico (Na2HPO4)1150,00
Cloruro di potassio (KCl)200,00
Dihidrogenofosfato di potassio (KH2PO4)200,00

Altri componenti

EDTA · 4Na (EDTA tetrasodico)220,00
Rosso fenolo3,00
Miscela enzimatica brevettata (attività proteolitica e collagenolitica)1x



Accutase è un marchio registrato di Innovative Cell Technologies, Inc.

Panoramica del prodotto
Volume: 100 ml Conservazione: ≤-15°C Sterilità: Filtrato sterile
Lasoluzione antibiotica/antimicotica (100x) è un concentrato sterile pronto all'uso, progettato per ridurre i rischi di contaminazione microbica nelle colture cellulari e nelle relative applicazioni di laboratorio. Questa soluzione 100x contiene una combinazione consolidata di penicillina, streptomicina e amfotericina B, che fornisce un'attività antimicrobica ad ampio spettro contro batteri Gram-positivi e Gram-negativi, lieviti e funghi filamentosi. La formulazione è adatta all'uso in colture cellulari eucariotiche, terreni di coltura batterici e altri sistemi sensibili alla contaminazione, a sostegno di operazioni di laboratorio pulite e coerenti.
Applicazione e vantaggi Ottimizzata per i protocolli di ricerca di routine, questa soluzione è ampiamente utilizzata per mantenere condizioni asettiche nei flussi di lavoro delle colture cellulari. Offre prestazioni affidabili in ambienti sensibili alla contaminazione, aiutando i ricercatori a ridurre il rischio di crescita microbica senza compromettere la salute delle cellule o la riproducibilità degli esperimenti. La formulazione filtrata sterile elimina la necessità di ulteriori fasi di solubilizzazione, favorendo una preparazione semplificata dei terreni di coltura e riducendo la variabilità delle procedure quotidiane di laboratorio.
Uso e compatibilità Per ottenere concentrazioni standard di lavoro, diluire la soluzione 1:100 nel terreno di coltura completo. Il prodotto è compatibile con un'ampia gamma di linee cellulari di mammifero e di terreni di coltura basali. Grazie alla disponibilità costante delle scorte, i ricercatori possono beneficiare di una continuità di approvvigionamento affidabile e di una pianificazione logistica semplificata. La soluzione deve essere conservata a ≤ -15 °C e protetta da ripetuti cicli di congelamento e scongelamento per mantenerne la stabilità. Solo per uso di ricerca. Non per l'uso in procedure diagnostiche o terapeutiche. Non per uso umano o animale.

Soluzione salina tampone con fosfati (PBS)
La soluzione salina fosfato-bufferata (PBS) è una soluzione tampone ampiamente utilizzata nella ricerca biologica e chimica. Svolge un ruolo cruciale nel mantenere l'equilibrio del pH e l'osmolarità durante varie procedure sperimentali, tra cui l'elaborazione dei tessuti e la coltura cellulare. La nostra soluzione PBS è formulata meticolosamente con ingredienti di elevata purezza per garantire stabilità e affidabilità in ogni esperimento. L'osmolarità e le concentrazioni di ioni del nostro PBS imitano fedelmente quelle del corpo umano, rendendolo isotonico e non tossico per la maggior parte delle cellule.

Composizione della nostra soluzione PBS
La nostra soluzione PBS è una miscela regolata in base al pH di tamponi fosfatici e soluzioni saline di grado ultrapuro. A una concentrazione di lavoro 1X, contiene:

8000 mg/L di cloruro di sodio (NaCl)
200 mg/L Cloruro di potassio (KCl)
1150 mg/L Fosfato di sodio bibasico anidro (Na2HPO4)
200 mg/L Fosfato di potassio monobasico anidro (KH2PO4)

Questa composizione garantisce un pH e un equilibrio ionico ottimali, adatti a un'ampia gamma di applicazioni biologiche.

Applicazioni della nostra soluzione PBS
La nostra soluzione PBS è ideale per diverse applicazioni nella ricerca biologica. Le sue proprietà isotoniche e non tossiche la rendono adatta alla diluizione delle sostanze e al risciacquo dei contenitori cellulari. Le soluzioni PBS contenenti EDTA sono efficaci per staccare le cellule attaccate e raggrumate. Tuttavia, i metalli divalenti come lo zinco non devono essere aggiunti al PBS, poiché possono causare precipitazioni. In questi casi, si consiglia di utilizzare i tamponi Good's. Inoltre, la nostra soluzione di PBS è un'alternativa accettabile al terreno di trasporto virale per il trasporto e la conservazione dei virus a RNA, compreso il SARS-CoV-2.

Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +25°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 2°C
- 25°C e utilizzare entro 24 mesi.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.

Composizione



Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Sali
Cloruro di potassio
200



Potassio fosfato monobasico anidro
200



Cloruro di sodio
8000



Sodio fosfato bibasico anidro
1150

Il terreno RPMI 1640, noto anche come terreno RPMI, è un terreno di coltura cellulare altamente versatile, ampiamente utilizzato nella ricerca biologica per coltivare varie cellule di mammifero. Sviluppato da George E. Moore, Robert E. Gerner e H. Addison Franklin nel 1966 presso il rinomato Roswell Park Comprehensive Cancer Center, questo terreno di coltura deriva il suo nome dalla sua origine presso il Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Inizialmente progettato per supportare la crescita di cellule leucemiche umane in colture in sospensione e monostrato, il terreno RPMI 1640 si è evoluto attraverso le modifiche apportate dai ricercatori e dai fornitori commerciali per diventare adatto a una vasta gamma di cellule di mammifero. È eccezionalmente compatibile con linee cellulari come HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, astrociti e carcinomi.
Il terreno RPMI 1640 si distingue dagli altri terreni di coltura cellulare per la sua composizione unica. Contiene una quantità sostanziale di fosfati, aminoacidi e vitamine. In particolare, contiene biotina, vitamina B12 e PABA, assenti in Eagle's Minimal Essential Medium o Dulbecco's Modified Eagle Medium. Inoltre, RPMI 1640 Medium presenta concentrazioni significativamente elevate di vitamine inositolo e colina. Tuttavia, non contiene proteine, lipidi o fattori di crescita. Di conseguenza, per garantire le condizioni ottimali per la crescita cellulare, è comunemente necessaria un'integrazione con il 10% di siero fetale bovino (FBS).
Il sistema tampone del terreno RPMI 1640 si basa sul bicarbonato di sodio e richiede un ambiente al 5-10% di CO2 per mantenere un pH fisiologicamente appropriato. L'inclusione dell'agente riducente glutatione distingue ulteriormente questo terreno da altri.
Controllo di qualità

Filtrato sterile


Conservazione e durata di conservazione

Conservare a +2°C a +8°C, al riparo dalla luce.
Una volta aperto, conservare a 4°C e utilizzare entro 6-8 settimane.


Condizioni di spedizione

Temperatura ambiente


Manutenzione

Conservare in frigorifero a +2°C a +8°C al buio. Evitare il congelamento e il riscaldamento frequente a +37°C, in quanto riduce la qualità del prodotto.
Non riscaldare il terreno di coltura oltre i 37°C e non utilizzare fonti di calore non controllate come le microonde.
Se si deve utilizzare solo una parte del terreno di coltura, prelevare la quantità necessaria e riscaldarla a temperatura ambiente prima dell'uso.



Composizione




Categoria
Componenti
Concentrazione (mg/L)


Aminoacidi
Glicina
10.00



L-alanil-L-glutammina
434.40



L-Arginina
200.00



L-AsparaginaH2O
56.82



Acido L-Aspartico
20.00



L-cistina 2HCl
65.20



Acido L-Glutammico
20.00



L-istidina HClH2O
20.27



L-idrossi-L-prolina
20.00



L-Isoleucina
50.00



L-Leucina
50.00



L-lisina HCl
40.00



L-metionina
15.00



L-fenilalanina
15.00



L-Prolina
20.00



L-Serina
30.00



L-treonina
20.00



L-triptofano
5.00



L-Tirosina 2Na 2H2O
28.83



L-Valina
20.00


Vitamine
acido p-amino-benzoico
1.00



D-Biotina
0.20



Cloruro di colina
3.00



D-pantotenato di calcio
0.25



Acido folico
1.00



myo-Inositolo
35.00



Nicotinamide
1.00



Piridossina HCl
1.00



Riboflavina
0.20



Tiamina HCl
1.00



Vitamina B12
0.005


Sali inorganici
Ca(NO3)2 4H2O
100.00



KCl
400.00



MgSO4 7H2O
100.00



NaCl
6000.00



NaHCO3
2000.00



Na2HPO4
800.00


Altri componenti
D-Glucosio
2000.00



L-Glutatione ridotto
1.00



Sale sodico di rosso fenolo
5.30