Cellule CTX

CTX (nota anche come CTX0E03) è una linea cellulare di cellule staminali neurali umane immortalizzate in modo condizionale, derivata dal neuroepitelio corticale fetale umano del primo trimestre. La linea è stata generata mediante integrazione retrovirale di un transgene di fusione c-mycER^TAM, che stimola la proliferazione cellulare solo in presenza di 4-idrossitamoxifene (4-OHT). In assenza di 4-OHT e in terreno privo di mitogeni, le cellule CTX0E03 subiscono un arresto della crescita e si differenziano in neuroni e astrociti, conservando la capacità di differenziazione multipotente. La linea è clonale, presenta un cariotipo umano normale (46,XY) ed è stata sviluppata in condizioni conformi alle norme GMP in vista di una potenziale applicazione clinica.

La linea CTX0E03 è stata valutata in modelli preclinici di ictus ischemico (modello di ratto MCAo), in cui le cellule impiantate hanno favorito un significativo recupero della funzione sensomotoria. La linea è entrata nella fase di sperimentazione clinica per la terapia dell’ictus. Viene inoltre utilizzata come modello in vitro per la biologia delle cellule staminali neurali, la differenziazione dei neuroni corticali, la ricerca sul morbo di Alzheimer (studi sulla tossicità dell’Abeta) e lo screening neurofarmacologico. Il sistema di immortalizzazione condizionale rende CTX0E03 particolarmente adatto agli studi di sicurezza ed efficacia, poiché la proliferazione può essere disattivata rimuovendo il 4-OHT prima del trapianto.

CTX0E03 viene espanso in DMEM/F12 integrato con supplemento N2, EGF (20 ng/ml) e FGF-2 (20 ng/ml) con 4-OHT (1 μM) su superfici rivestite di laminina a 37 °C in 5% di CO₂. Per la differenziazione, i fattori di crescita e il 4-OHT vengono rimossi. La linea è classificata al livello di biosicurezza 1 (GMO-S1 in Germania a causa del transgene c-mycERTAM integrato). Gli utenti devono attenersi alle normative vigenti in materia di OGM nella propria giurisdizione.