Cellule CHO-BCMA
Informazioni generali
| Descrizione | Avviso legale: I prezzi indicati per le linee cellulari sono riservati esclusivamente a clienti del settore accademico o senza scopo di lucro. Per le entità commerciali il prezzo è di circa 6.250 €. CHO-BCMA è una linea cellulare ricombinante stabile derivata dall’ovaio del criceto cinese (CHO), ingegnerizzata per esprimere l’antigene di maturazione delle cellule B umane (BCMA; TNFRSF17/CD269) in forma integrale. La linea cellulare è stata generata utilizzando un sistema di ricombinazione con landing pad sito-specifico che consente un’integrazione genomica riproducibile e un’espressione stabile del gene bersaglio. Il BCMA è un recettore transmembranario espresso prevalentemente sulle cellule B mature e sui plasmacelluli, dove regola la sopravvivenza e la proliferazione cellulare attraverso l’interazione con i ligandi BAFF e APRIL. Il recettore riveste grande importanza nel mieloma multiplo e in altre neoplasie a cellule B, rendendo le cellule CHO-BCMA utili per lo screening di anticorpi terapeutici, lo sviluppo di CAR-T e di engager bispecifici per cellule T, studi sul legame recettoriale e lo sviluppo di saggi basati sulla citometria a flusso. |
|---|---|
| Organismo | Criceto cinese |
| Tessuto | Ovaio |
| Malattia | Ovaio di criceto cinese, non neoplastico; geneticamente modificato per l'espressione di superficie del BCMA (CD269/TNFRSF17) |
| Applicazioni | Screening degli anticorpi; sviluppo di terapie mirate al BCMA; validazione delle cellule CAR-T; ricerca sul mieloma multiplo; citometria a flusso |
Caratteristiche
| Morfologia | Simile all'epitelio |
|---|---|
| Tipo di cellula | Cellule epiteliali |
| Proprietà di crescita | Aderente/sospeso |
Dati normativi
| Citazione | CHO-BCMA (codice catalogo Cytion 305972) |
|---|---|
| Livello di biosicurezza | 1 |
| NCBI_TaxID | 10029 |
| CellosauroAccesso | CVCL_A8V3 |
| Stato degli OGM | GMO-S1: Questa linea cellulare CHO contiene una cassetta di espressione del gene BCMA che consente di effettuare analisi della funzione del recettore. Questa classificazione è valida solo in Germania e potrebbe variare in altri paesi. |
Dati biomolecolari
| Recettori espressi | BCMA, TNFRSF17/CD269 |
|---|
Manipolazione
| Terreno di coltura | Per colture aderenti: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a) Per colture in sospensione: CHO Growth Medium A (da InSCREENeX; numero di catalogo InSCREENeX INS-ME-1039) |
|---|---|
| Integratori | Per colture aderenti: Integrare il terreno di coltura con il 5% di FBS. Aggiungere Geneticina (G418-Sulfat) per ottenere una concentrazione finale di 0,5 mg/mL. |
| Reagente di dissociazione | Per colture aderenti: Tripsina-EDTA |
| Tempo di raddoppio | circa 14-16 ore |
| Sottocoltura | Per la coltura di routine di cellule aderenti: Aspirare il vecchio terreno di coltura dalle cellule aderenti e lavarle con PBS per rimuovere il terreno residuo. Dopo aver aspirato il PBS, aggiungere il volume appropriato di soluzione di tripsina/EDTA in base alle dimensioni del recipiente di coltura (ad esempio, 1 ml per una fiasca T25, 3 ml per una fiasca T75) e incubare a temperatura ambiente o a 37°C per 5-10 minuti, o finché le cellule non si staccano. Monitorare il distacco al microscopio e, se necessario, picchiettare delicatamente il contenitore per liberare le cellule. Una volta staccate, aggiungere terreno completo per inattivare la tripsina/EDTA, risospendere delicatamente le cellule e trasferire un'aliquota della sospensione cellulare in un nuovo recipiente di coltura contenente terreno fresco. Porre il recipiente in un incubatore a 37°C con il 5% diCO2 e cambiare il terreno ogni 2-3 giorni. |
| Rapporto di divisione | Si consiglia un rapporto da 1:5 a 1:10 |
| Densità di semina | da 2 a 4 × 10⁵ cellule/mL |
| Rinnovo del fluido | da 2 a 3 volte alla settimana |
| Atmosfera di incubazione | 37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata. |
Controllo qualità e analisi molecolare
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