KC sejtek
Általános információk
| Leírás | A KC (Kc167) egy Drosophila melanogaster embrionális sejtvonal, amelyet egy háti záródási stádiumban lévő nőstény embrióból nyertek ki, és amelyet a Cellosaurus adatbázisban CVCL_Z833 kóddal regisztráltak. A vonalat eredetileg a Drosophila sejtbiológiában, genetikai szűrésekben és funkcionális genomikában hozták létre, és azóta széles körben használják. A Kc167 sejteket SV40-nel tették halhatatlanná, és félig tapadó módon növekednek, tapadó és lazán lebegő sejtekből álló vegyes populációt alkotva. Ezek a legjobban jellemzett Drosophila sejtvonalak közé tartoznak, és teljes mértékben alkalmasak az RNAi-közvetített géncsendesítésre, ami a gerinctelen biológiában a genomszintű RNAi-szűrések alapvető modelljévé teszi őket. A KC sejtek alkalmazhatók a Drosophila sejtbiológiában, a genomszintű RNAi- és CRISPR-szűrésekben, a jelátviteli útvonalak vizsgálatában (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB), a veleszületett immunitás kutatásában, valamint az evolúciósan konzervált útvonalak összehasonlító tanulmányozásában. A teljes mértékben szekvenált és annotált Drosophila-genom, az RNAi-reagensek kiterjedt nyilvános adatbázisaival (pl. DRSC/TRiP) kombinálva, a KC-sejteket különösen hatékonnyá teszi a torzításmentes funkcionális genomikai felfedezésekhez. Az SV40-immortalizáció miatt BSL-2 besorolás vonatkozik rájuk. A KC-sejteket 2 mM glutaminnal és 10% FBS-szel kiegészített Schneider-féle Drosophila-táptalajon tenyésztik. Fontos megjegyezni, hogy a Drosophila-sejtvonalakat 25 °C-on, CO₂-mentes környezeti levegőben tenyésztik (nem 37 °C-on / 5% CO₂-ban, mint az emlőssejtek esetében). A sejteket óvatos reszuszpenzióval és hígítással passzálják (félig adhezív növekedés). A tápközeget 2–3 naponta cserélik, illetve a sejteket hígítják. |
|---|---|
| Szervezet | Drosophila melanogaster (gyümölcsmucha) |
| Szövet | Embrió |
| Betegség | Normál |
| Metasztatikus hely | Embrió (dorsális záródás stádiuma) |
| Alkalmazások | Drosophila sejtbiológia; genomszintű RNAi-szűrések; CRISPR-szűrések; jelátvitel (Wnt/Wingless, Hedgehog, Notch, JAK/STAT, Toll/NF-κB); veleszületett immunitás; gerinctelenek funkcionális genomikája |
| Szinonimák | KC, K C |
Jellemzők
| Kor | A háti záródás szakasza |
|---|---|
| Gender | Női |
| Morfológia | Részben tapadó, hámsejtszerű |
| Sejttípus | Embrionális sejtek |
| Növekedési tulajdonságok | részben tapadó |
Szabályozási adatok
| Idézet | KC (Cytion katalógusszám: 300604) |
|---|---|
| Biológiai biztonsági szint | 2 |
| NCBI_TaxID | 7227 |
| CellosaurusAccession | CVCL_Z833 |
| GMO-státusz | GMO-S2: Ez a Drosophila sejtvonal stabilan integrált SV40-halhatatlansági kazettát tartalmaz. BSL-2 biztonsági szintű elszigetelés szükséges. Ez a besorolás kizárólag Németország területén érvényes, más országokban eltérő lehet. |
Biomolekuláris adatok
| Vírusérzékenység | SV40-vírus által halhatatlanná tett |
|---|
A kezelése
| Kultúrközeg | Schneider-féle Drosophila-táptalaj + 2 mM glutamin + 10% borjúszérum (FBS). |
|---|---|
| Kiegészítők | A tápközeget egészítsük ki 2 mM glutaminnal és 10% FBS-szel |
| Dissociációs reagens | Nem szükséges (részben tapadó; óvatosan keverje fel újra) |
| Megduplázási idő | kb. 24–48 óra |
| Szubkultúrázás | Óvatosan pipettázzuk át a tenyészetet a félig tapadó sejtek újbóli szuszpendálása érdekében. Vigyen át megfelelő mennyiséget egy új lombikba, és adjon hozzá friss, előmelegített Schneider-táptalajt. Hígítsa 5 × 10⁵–1 × 10⁶ sejt/ml sűrűségre. Inkubálja 25 °C-on, CO₂-mentes környezeti levegőn. |
| Megosztási arány | 1–3 |
| Vetési sűrűség | 5 × 10⁵ – 1 × 10⁶ sejt/ml |
| Folyadék megújítása | 2-3 naponta |
| Fagyasztási közeg | Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében. |
| A sejtek felolvasztása és tenyésztése |
|
| Inkubációs légkör | 25 °C, környezeti levegő (nincs szükség CO₂-ra). |
| Szállítási feltételek | A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre. |
| Tárolási feltételek | Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt. |
Minőségellenőrzés és molekuláris elemzés
Anyagátadási megállapodás
Ha a Cytion sejtvonalakat kizárólag egyetlen kutatási helyszínen végzett belső kutatáshoz kívánja felhasználni, kérjük, töltse ki és írja alá anyagátadási megállapodásunkat (MTA), majd küldje el azt megrendelésével együtt.
Bármilyen kereskedelmi célú felhasználás esetén – ideértve, de nem kizárólagosan a díjszabásos munkát, a minőség-ellenőrzési tesztelést, a termékforgalomba hozatalt, a diagnosztikai felhasználást vagy a szabályozási tanulmányokat – kérjük, töltse ki a tervezett felhasználási űrlapot, hogy elkészíthessük a projektjéhez igazodó megfelelő megállapodást.
Megjegyzés: Az MTA csak bizonyos sejtvonalakra vonatkozik. Ha ez a megjegyzés és az MTA dokumentum megjelenik egy termékoldalon, akkor a megállapodás alkalmazandó. Az MTA hatálya alá nem tartozó sejtvonalak esetében a megállapodásra való hivatkozás nem jelenik meg. Az MTA nem érvényes az amerikai, kínai vagy tajvani ügyfelek számára. Kérjük, vegye fel a kapcsolatot amerikai képviseletünkkel, hogy megkapja a megfelelő megállapodást.