HT55 sejtek

430,00 EUR*

A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 ⁶ sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 10⁶ sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial

Termékszám: 305018

Biztonsági adatlap

Terméklap

Anyagátadási megállapodás

Leírás	Az HT55 egy emberi rektális adenokarcinóma sejtvonal, amelyet egy 54 éves kaukázusi nő elsődleges rektális daganatából állítottak elő. A sejtvonal adhezív monorétegként növekszik, epiteliális jellegű morfológiával rendelkezik, és a Cellosaurus adatbázisban CVCL_1294 kód alatt szerepel. Az HT55 számos heterozigóta és homozigóta funkcióvesztéses mutációt hordoz az APC (adenomatous polyposis coli) tumor szuppresszor génben, beleértve a p.Gln1131Ter, p.Gln1303Ter, p.Arg1463Ser, p.Asn581Tyr és p.Lys241Ter (mind heterozigóta), valamint egy homozigóta p.Arg213Leu szubsztitúciót hordoz. Ez a mutációs profil az HT55-öt az APC által vezérelt kolorektális karcinogenezis biológiailag releváns modelljévé teszi, tükrözve a kanonikus WNT-útvonal szabályozási zavarát, amely az emberi kolorektális rákok többségét okozza. Az HT55-öt széles körben használják a kolorektális rák kutatásában a WNT/β-katenin jelátvitel, az APC tumor-szupresszor funkciója, a gyógyszerérzékenység és -rezisztencia vizsgálatához, valamint a WNT-útvonal komponensei ellen irányuló célzott szerek preklinikai értékeléséhez. A vonal alkalmas in vitro farmakológiai vizsgálatokra és immunhiányos egérmodellekben végzett xenotranszplantációs vizsgálatokra, így tapadó, kezelhető in vitro platformot biztosít a kolorektális rák mechanisztikus és transzlációs kutatásához. A többszörös APC-trunkációs mutációk jelenléte miatt az HT55 reprezentatív példája annak a mikroszatellit-stabil, kromoszómálisan instabil kolorektális rák altípusnak, amelyet általában az APC funkcióvesztése okoz. Az HT55-öt EMEM-ben (MEM Eagle, w: 2 mM L-glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO₃, w: EBSS; Cytion cikkszám: 820100a) tápközegben, 10% FBS-kiegészítéssel, 37 °C-on, 5% CO₂-tartalmú párásított légkörben. A sejteket Accutase segítségével szubkultiváljuk, amikor a sejtek körülbelül 80–90%-ban konfluensek, az ajánlott osztási arány 1:3–1:5, a beültetési sűrűség pedig 1–3 × 10⁴ sejt/cm². A tápközeget 2–3 naponta cseréljük. A duplázódási idő körülbelül 28 óra.
Szervezet	Emberi
Szövet	Végbél
Betegség	Adenokarcinóma
Alkalmazások	Vastagbél- és végbélrák kutatása; a WNT/APC jelátviteli útvonal vizsgálata; gyógyszerérzékenységi és -rezisztencia vizsgálatok; preklinikai onkológia; xenotranszplantációs modellek; célzott terápiák értékelése
Szinonimák	HT55

Kor	54 év
Gender	Női
Etnicitás	Kaukázusi
Morfológia	Epithelszerű
Sejttípus	Epithel sejtek
Növekedési tulajdonságok	Adherent

Idézet	HT55 (Cytion katalógusszám: 305018)
Biológiai biztonsági szint	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_1294

Mutációs profil	Mutáció: p.Gln1131Ter, heterozigóta; Mutáció: p.Gln1303Ter, heterozigóta; Mutáció: p.Arg1463Ser, heterozigóta; Mutáció: p.Asn581Tyr, heterozigóta; Mutáció: p.Lys241Ter, heterozigóta; Mutáció: p.Arg213Leu, homozigóta

Kultúrközeg	EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Kiegészítők	A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Dissociációs reagens	Accutase
Megduplázási idő	28 óra
Szubkultúrázás	Távolítsuk el a régi táptalajt a tapadó sejtekről, majd mossuk le őket kalcium- és magnéziummentes PBS-sel. T25-ös lombikok esetén 3–5 ml PBS-t, T75-ös lombikok esetén pedig 5–10 ml-t használjunk. Ezután teljesen fedje be a sejteket Accutase-szel, T25-ös lombikok esetén 1–2 ml-t, T75-ös lombikok esetén pedig 2,5 ml-t használva. Hagyja a sejteket szobahőmérsékleten 8–10 percig inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverje össze a sejteket 10 ml tápközeggel, hogy újra szuszpendálódjanak, majd centrifugálja őket 300×g-n 3 percig. Öntse le a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápközegben, és helyezze át őket olyan új lombikokba, amelyek már friss tápközeget tartalmaznak.
Megosztási arány	1–5
Vetési sűrűség	1–3 x 10⁴ sejt/cm²
Folyadék megújítása	2-3 naponta
Fagyasztási közeg	Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
A sejtek felolvasztása és tenyésztése	Ellenőrizze, hogy az injekciós üveg a szállításkor mélyhűtött marad-e, mivel a sejteket szárazjégen szállítják, hogy a szállítás során az optimális hőmérsékletet fenntartsák. Átvételt követően vagy azonnal tárolja a krioampullát -150 °C alatti hőmérsékleten a sejtek integritásának megőrzése érdekében, vagy folytassa a 3. lépéssel, ha azonnali tenyésztésre van szükség. Azonnali tenyésztés esetén gyorsan fel kell olvasztani az injekciós üveget úgy, hogy tiszta vízzel és antimikrobiális szerrel ellátott 37 °C-os vízfürdőbe merítjük, és 40-60 másodpercig óvatosan kevergetjük, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Az összes további lépést steril körülmények között, áramlásos elszívóban végezzük el, és nyitás előtt fertőtlenítsük a kriofülkét 70%-os etanollal. Óvatosan nyissa fel a fertőtlenített fiolát, és a sejtszuszpenziót óvatosan összekeverve helyezze át egy 15 ml-es centrifugacsőbe, amely 8 ml szobahőmérsékletű táptalajt tartalmaz. Centrifugáljuk az elegyet 300 x g-n 3 percig a sejtek szétválasztásához, és óvatosan dobjuk el a maradék fagyasztóközeget tartalmazó felülúszót. Óvatosan szuszpendáljuk újra a sejtpelletet 10 ml friss táptalajban. Adhezív sejtek esetében ossza a szuszpenziót két T25-ös tenyésztőlombik között; szuszpenziós kultúrák esetében az összes tápfolyadékot tegye át egy T25-ös lombikba a hatékony sejtkölcsönhatás és növekedés elősegítése érdekében. A sejtvonal folyamatos növekedése és fenntartása érdekében tartsa be a megállapított szubkultúra protokollokat, biztosítva a megbízható kísérleti eredményeket.
Inkubációs légkör	37°C, 5%_CO2, párásított légkör.
Szállítási feltételek	A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
Tárolási feltételek	Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Ha a Cytion sejtvonalakat kizárólag egyetlen kutatási helyszínen végzett belső kutatáshoz kívánja felhasználni, kérjük, töltse ki és írja alá anyagátadási megállapodásunkat (MTA), majd küldje el azt megrendelésével együtt.

Bármilyen kereskedelmi célú felhasználás esetén – ideértve, de nem kizárólagosan a díjszabásos munkát, a minőség-ellenőrzési tesztelést, a termékforgalomba hozatalt, a diagnosztikai felhasználást vagy a szabályozási tanulmányokat – kérjük, töltse ki a tervezett felhasználási űrlapot, hogy elkészíthessük a projektjéhez igazodó megfelelő megállapodást.

Megjegyzés: Az MTA csak bizonyos sejtvonalakra vonatkozik. Ha ez a megjegyzés és az MTA dokumentum megjelenik egy termékoldalon, akkor a megállapodás alkalmazandó. Az MTA hatálya alá nem tartozó sejtvonalak esetében a megállapodásra való hivatkozás nem jelenik meg. Az MTA nem érvényes az amerikai, kínai vagy tajvani ügyfelek számára. Kérjük, vegye fel a kapcsolatot amerikai képviseletünkkel, hogy megkapja a megfelelő megállapodást.

HT55 sejtek

Általános információk

Jellemzők

Szabályozási adatok

Biomolekuláris adatok

A kezelése

Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA

Anyagátadási megállapodás