EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS
Az Eagle’s Minimum Essential Medium (EMEM) az egyik legszélesebb körben használt alapközeg számos emlős sejt, különösen az adhezív sejtvonalak tenyésztéséhez. Az eredetileg Harry Eagle által kifejlesztett klasszikus készítmény tartalmazza azokat az esszenciális aminosavakat, vitaminokat és szervetlen sókat, amelyek szükségesek az elsődleges sejtek és a kialakult sejtvonalak növekedésének támogatásához standard tenyésztési körülmények között.
Ez a használatra kész, steril szűrt folyékony készítmény Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS) oldattal, 2 mM L-glutaminnal, D-glükózzal (1,0 g/l) és 2,2 g/l nátrium-hidrogén-karbonáttal (NaHCO3) van kiegészítve, így alkalmas CO2-szabályozott inkubátorban (jellemzően 5 % CO2) történő használatra. A készítményben található fenolvörös pH-indikátorként működik, lehetővé téve a tápközeg állapotának kényelmes vizuális ellenőrzését a sejtkultúra során.
Főbb jellemzők
- Klasszikus Eagle’s MEM készítmény Earle’s Balanced Salt Solution (EBSS)
- 2 mM L-glutamin tartalommal – azonnal felhasználható
- 2,2 g/l nátrium-hidrogén-karbonát – 5 %-os CO2-inkubációra pufferelve
- D-glükóz (1,0 g/l) mint elsődleges szénforrás
- Fenolvörös pH-indikátorral
- HEPES és nátrium-piruvát nélkül
- Steril szűrt folyékony táptalaj, használatra kész
- pH 7,0 – 7,6
Jellemző alkalmazások
Az EMEM számos emlős sejtvonal tenyésztését támogatja, beleértve a HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 és számos primer sejtet. Gyakori alkalmazások:
- Adherens sejtvonalak rutin karbantartása és szaporítása
- Vírusok szaporítása és vakcinaelőállítási munkafolyamatok
- Citotoxicitási és biológiai vizsgálati alkalmazások
- Transzfekciós és fehérjeexpressziós vizsgálatok
- Alapkutatás a sejtbiológiában és a molekuláris biológiában
Az optimális sejtnövekedés érdekében az EMEM-et általában 5–10 %-os borjúszérummal (FBS) egészítik ki, és a sejtvonal függvényében nem esszenciális aminosavakkal (NEAA) és antibiotikumokkal, például penicillinnel/streptomicinnel.
Kezelés és tárolás
A bontatlan palackot +2 °C és +8 °C között, fénytől védve tárolja. A felnyitás után aszeptikus körülmények között használja. Az oldatban lévő L-glutamin fokozatosan lebomlik – a legjobb teljesítmény érdekében javasoljuk, hogy a tápközeget a felnyitástól számított 4 héten belül használja fel, vagy ha hosszabb ideig tárolja, használat előtt friss L-glutaminnal egészítse ki. A tápközeget hagyja 37 °C-ra melegedni, mielőtt a sejtekhez adagolja.
Minőség
Szigorú minőségi előírások szerint gyártva. Minden tétel sterilitását, pH-értékét, ozmolalitását és endotoxin-szintjét ellenőrizzük, hogy biztosítsuk az állandó teljesítményt a sejtkultúra-alkalmazásokban.
Termékjellemzők
| Műszaki adatok | Részlet |
|---|---|
| Terméktípus | MEM |
| Termékkategória | Sejtkultúra-táptalajok |
| Formátum | Folyékony |
| Steril | Igen |
| Méret | 500 ml |
| L-glutamin | L-glutaminnal (2 mM) |
| Glükóz | Glükózzal (1,0 g/l) |
| Nátrium-hidrogén-karbonát | NaHCO3-mal (2,2 g/l) |
| HEPES | HEPES nélkül |
| Nátrium-piruvát | Nátrium-piruvát nélkül |
| Fenolvörös | Fenolvörössel |
| Sóoldat | Earle kiegyensúlyozott sóoldat (EBSS) |
| pH | 7,0 – 7,6 |
| Endotoxin-tartalom | Nem meghatározva |
| Tárolás | +2 °C és +8 °C között |
Összetétel (literenkénti összetétel)
| Összetevő | Koncentráció (mg/l) |
|---|---|
| Szervetlen sók | |
| Kalcium-klorid · 2H2O | 265,00 |
| Magnézium-szulfát | 97,72 |
| Kálium-klorid | 400,00 |
| Nátrium-klorid | 6 800,00 |
| Nátrium-dihidrogén-foszfát, vízmentes | 122,00 |
| Nátrium-hidrogén-karbonát (NaHCO3) | 2 200,00 |
| Aminosavak | |
| L-arginin · HCl | 126,00 |
| L-cisztin · 2HCl | 31,30 |
| L-glutamin | 292,00 |
| L-hisztidin · HCl · H2O | 42,00 |
| L-izoleucin | 52,00 |
| L-leucin | 52,00 |
| L-lizin · HCl | 72,50 |
| L-metionin | 15,00 |
| L-fenilalanin | 32,00 |
| L-treonin | 48,00 |
| L-triptofán | 10,00 |
| L-tirozin · 2Na · 2H2O | 51,90 |
| L-valin | 46,00 |
| Vitaminok | |
| D-kalcium-pantotenát | 1,00 |
| Kolin-klorid | 1,00 |
| Folsav | 1,00 |
| mio-inozitol | 2,00 |
| Nikotinamid | 1,00 |
| Piridoxál · HCl | 1,00 |
| Riboflavin | 0,10 |
| Tiamin · HCl | 1,00 |
| Egyéb összetevők | |
| D(+)-glükóz | 1 000,00 |
| Fenolvörös | 10,00 |