CHO-EGFR sejtek

Name: CLS Cell Lines Service GmbH
Address: Dr.-Eckener-Straße 8, Eppelheim, 69214, DE
Telephone: +496221405780
Price range: €€€

1 900,00 EUR*

A termékeket fagyasztva, szárazjégen, kriogenikus csövekben szállítjuk. Minden kriogenikus cső általában 3 × 10 ⁶ sejtet tartalmaz adhezív vonalak esetében, vagy 5 × 10⁶ sejtet szuszpenziós vonalak esetében (a részleteket lásd a tétel CoA-jában).

Árak adók és szállítási költségek nélkül

cryovial

Termékszám: 305977

Biztonsági adatlap

Terméklap

Leírás	Jogi nyilatkozat: A sejtvonalak mellett feltüntetett árak kizárólag tudományos/non-profit ügyfelekre vonatkoznak. Kereskedelmi szervezetek esetében az ár körülbelül 6 250 euró. Amennyiben kereskedelmi szervezetet képvisel, vagy nem biztos abban, hogy melyik kategória vonatkozik Önre, kérjük, vegye fel velünk a kapcsolatot. A CHO-EGFR sejtek olyan rekombináns kínai hörcsög petefészek (CHO) sejtek, amelyeket úgy alakítottak ki, hogy stabilan expresszálják az emberi epidermális növekedési faktor receptort (EGFR/ERBB1/HER1), egy ErbB családba tartozó receptor-tirozin-kinázt. Az EGFR szabályozza a sejtek kulcsfontosságú folyamatait, beleértve a proliferációt, a túlélést, a migrációt és a differenciálódást a downstream jelátviteli útvonalak, például a MAPK/ERK, a PI3K/AKT és a JAK/STAT aktiválása révén. Az EGFR rendellenes expressziója, amplifikációja vagy mutációja gyakran társul számos szilárd tumorral, beleértve a nem kissejtes tüdőrákot, a kolorektális rákot, a glioblastomát, valamint a fej-nyak pikkelyes sejtes karcinómát. A stabil CHO-EGFR modellek ellenőrzött platformot biztosítanak a receptor biológiájának és a terápiás célzásnak a vizsgálatához. A CHO-EGFR sejteket széles körben használják az onkológiai kutatásban és a biológiai gyógyszerek fejlesztésében az anti-EGFR monoklonális antitestek, a tirozin-kináz inhibitorok, a bispecifikus antitestek, az antitest-gyógyszer konjugátumok és a génmódosított immunterápiák jellemzésére. Ezek a sejtek támogatják a ligandkötődés, a receptoraktiválás, az internalizáció, a foszforilációs állapot, a downstream jelátvitel és a terápiás blokád kvantitatív értékelését. Ezeket a sejteket gyakran alkalmazzák áramlási citometriás vizsgálatokban, receptor-foglaltsági tanulmányokban, nagy áteresztőképességű szűrésben és hatékonysági vizsgálati munkafolyamatokban is. Mivel a CHO-sejtek robusztus növekedési jellemzőkkel rendelkeznek és viszonylag alacsony a humán receptor-rendszerek endogén expressziója, reprodukálható hátteret biztosítanak a rekombináns EGFR-expresszióhoz és a szabványosított vizsgálati módszerek fejlesztéséhez.
Szervezet	Kínai hörcsög
Szövet	Petefészek
Betegség	Kínai hörcsög petefészeksejt, nem neoplasztikus; az EGFR felszíni expressziójára génmódosítva
Alkalmazások	Antitest-szűrés; EGFR-célzott terápia fejlesztése; ADCC/CDC-vizsgálatok; tüdő- és vastagbélrák-kutatás; áramlási citometria

Kor	Felnőtt
Gender	Női
Morfológia	Epithelszerű
Sejttípus	A petefészek hámsejtje
Növekedési tulajdonságok	Tapadó/felfüggesztés

Idézet	CHO-EGFR (Cytion katalógusszám: 305977)
Biológiai biztonsági szint	1
NCBI_TaxID	10029
CellosaurusAccession	CVCL_A8W3
GMO-státusz	GMO-S1: Ez a CHO sejtvonal egy EGFR-expressziós kazettát tartalmaz, amely lehetővé teszi a receptorok működésének elemzését. Ez a besorolás kizárólag Németország területén érvényes, más országokban eltérő lehet.

Felszíni antigének	EGFR (HER1/ErbB1/CD340)

Kultúrközeg	Adhezív kultúrákhoz: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám) Szuszpenziós kultúrákhoz: CHO Growth Medium A (az InSCREENeX-től; az InSCREENeX katalógusszáma: INS-ME-1039)
Kiegészítők	Adhezív kultúrákhoz: A táptalajt 5% FBS-szel egészítsük ki. Adjunk hozzá geneticint (G418-Sulfat), hogy a végső koncentráció 0,5 mg/ml legyen.
Dissociációs reagens	Adhezív kultúrákhoz: Trypsin-EDTA
Megduplázási idő	kb. 14–16 óra
Szubkultúrázás	Rutinszerű adherens sejtkultúrához: Szívja le a régi táptalajt az adherens sejtekről, és mossa le őket PBS-szel a maradék táptalaj eltávolítása érdekében. A PBS leszívása után adjunk hozzá a tenyésztőedény méretének megfelelő mennyiségű tripszin/EDTA-oldatot (pl. 1 ml T25 lombik esetén, 3 ml T75 lombik esetén), és inkubáljuk szobahőmérsékleten vagy 37°C-on 5-10 percig, vagy amíg a sejtek leválnak. Ellenőrizzük a leválást mikroszkóp alatt, és ha szükséges, óvatosan kopogtassuk meg az edényt a sejtek kiszabadításához. A leválás után adjunk hozzá teljes tápfolyadékot a tripszin/EDTA inaktiválásához, óvatosan szuszpendáljuk újra a sejteket, és a sejtszuszpenzió egy aliquotáját helyezzük át egy új, friss tápfolyadékot tartalmazó tenyésztőedénybe. Helyezze az edényt 37 °C-ra és 5%_CO2-ra beállított inkubátorba, és 2-3 naponta cserélje a tápfolyadékot.
Megosztási arány	1–5
Vetési sűrűség	2–5 x 10⁴ sejt/cm²
Folyadék megújítása	hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállítás	A felolvasztás után osszuk a sejteket 1:2-1:3 arányban T25 lombikokba, és hagyjuk, hogy a sejtek legalább 24 órán keresztül regenerálódjanak a fagyasztásból és megtapadjanak (adhezív kultúrák esetén).
Fagyasztási közeg	Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
A sejtek felolvasztása és tenyésztése	Ellenőrizze, hogy az injekciós üveg a szállításkor mélyhűtött marad-e, mivel a sejteket szárazjégen szállítják, hogy a szállítás során az optimális hőmérsékletet fenntartsák. Átvételt követően vagy azonnal tárolja a krioampullát -150 °C alatti hőmérsékleten a sejtek integritásának megőrzése érdekében, vagy folytassa a 3. lépéssel, ha azonnali tenyésztésre van szükség. Azonnali tenyésztés esetén gyorsan fel kell olvasztani az injekciós üveget úgy, hogy tiszta vízzel és antimikrobiális szerrel ellátott 37 °C-os vízfürdőbe merítjük, és 40-60 másodpercig óvatosan kevergetjük, amíg egy kis jégcsomó nem marad. Az összes további lépést steril körülmények között, áramlásos elszívóban végezzük el, és nyitás előtt fertőtlenítsük a kriofülkét 70%-os etanollal. Óvatosan nyissa fel a fertőtlenített fiolát, és a sejtszuszpenziót óvatosan összekeverve helyezze át egy 15 ml-es centrifugacsőbe, amely 8 ml szobahőmérsékletű táptalajt tartalmaz. Centrifugáljuk az elegyet 300 x g-n 3 percig a sejtek szétválasztásához, és óvatosan dobjuk el a maradék fagyasztóközeget tartalmazó felülúszót. Óvatosan szuszpendáljuk újra a sejtpelletet 10 ml friss táptalajban. Adhezív sejtek esetében ossza a szuszpenziót két T25-ös tenyésztőlombik között; szuszpenziós kultúrák esetében az összes tápfolyadékot tegye át egy T25-ös lombikba a hatékony sejtkölcsönhatás és növekedés elősegítése érdekében. A sejtvonal folyamatos növekedése és fenntartása érdekében tartsa be a megállapított szubkultúra protokollokat, biztosítva a megbízható kísérleti eredményeket.
Inkubációs légkör	37°C, 5%_CO2, párásított légkör.
Szállítási feltételek	A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
Tárolási feltételek	Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Sterilitás	A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják. A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

CHO-EGFR sejtek

Általános információk

Jellemzők

Szabályozási adatok

Biomolekuláris adatok

A kezelése

Minőségellenőrzés / Genetikai profil / HLA