SW-620 sejtek – Hatásuk a vastagbélrák kutatására és kísérletezésére
Az SW-620 sejtek a Dukes C stádiumú humán vastagbélrák sejtvonalát alkotják. Magas tumorigenikus és metasztatikus potenciállal rendelkeznek. Ezért széles körben alkalmazzák őket rák- és toxikológiai vizsgálatokban. Ez a cikk az SW-620 vastagbélrák-sejtvonal alapvető jellemzőit tárja fel.
- Növekedési tápközeg
- Az SW-620 sejtek ideális növekedéséhez 10% borjúszérummal, 4,5 g/l glükózzal, 4 mM L-glutaminnal, 1,5 g/l NaHCO3-mal és 1,0 mM nátrium-piruváttal kiegészített DMEM táptalajt használnak. A tápközeget hetente kétszer kell cserélni.
- Duplázódási idő
- Az SW-620 sejtek duplázódási ideje 20 és 26 óra között mozog.
- Növekedési típus
- Az SW-620 sejtvonal adhezív. A sejtek monoréteget képeznek a tenyésztőedény felületén.
- Biológiai biztonsági szint
- BSL-1
- Kapható
- Cytion — SW-620 megrendelése
Az SW-620 sejtek eredete és általános jellemzői
A származás és az általános jellemzők a sejtvonalról szóló legfontosabb információk. Ezek előzetes ismerete elengedhetetlen azoknak a kutatóknak, akik fontolóra veszik a sejtvonal bevonását kutatási tanulmányukba. A cikk ezen szakasza a SW-620 sejtvonal legfontosabb jellemzőit és származását ismerteti. Főként a következőket fogja megtudni: Mi az a SW620 sejtvonal? Melyek az SW-620 sejtvonal jellemzői? Mi az SW-620 eredete? Mekkora az SW-640 sejtek mérete? És mi a különbség az SW-620 és az SW-480 között?
- Az SW-620, egy kolorektális karcinóma sejtvonal, egy 51 éves, vastagbél-adenokarcinómában szenvedő kaukázusi férfi mediatizált nyirokcsomó-elváltozásából származik [1]. Ezt a sejtvonalat A. Leibovitz és munkatársai helyezték letétbe.
- Az SW-620 sejtek epiteliális morfológiával rendelkeznek. Kis, kerek, bipoláris sejtekből állnak, amelyek mikrovillusokhoz hasonlítanak.
- Az SW-620 sejtek átmérője 14,4 ± 0,3 μm.
- Ezek a vastagbélráksejtek hiperdiploid kariotípussal rendelkeznek. Az SW-620 sejtek modális kromoszómaszáma 50, amely 45 és 53 között változhat.
SW-480 és SW-620 összehasonlítása
Az SW480 és az SW620 kolorektális rákos sejtvonalak. Az SW-480-at egy primer daganatból nyerték, míg az SW-620-at egy áttétes nyirokcsomóból állították elő. Ezenkívül az ebből a sejtvonalból kialakított xenotranszplantátumok is eltérnek egymástól. Az SW-620-as xenotranszplantátumok tumorsejt-rétegeket képeznek, míg az SW-480-as xenotranszplantátumok mirigyszerű struktúrákat alkotnak [2]. Mindkét sejtvonal mutációs profilja megegyezik.
SW-620 sejtek: Tenyésztési információk
A sejtvonal tenyésztésének alapvető fogalmainak megértése elengedhetetlen, mivel ez biztosítja a megfelelő kezelést és fenntartást. Ebben a szakaszban néhány fontos szempontot említünk az SW-620 tenyésztésével kapcsolatban, amelyek segíthetnek a következő kérdések megválaszolásában: Mi az SW-620 táptalaj? Mennyi az SW-620 sejtek duplázódási ideje? Hogyan tenyésztjük az SW-620 sejteket?
A SW-620 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő:
Az SW-620 sejtek duplázódási ideje 20 és 26 óra között mozog.
Adherens vagy szuszpenziós:
Az SW-620 sejtvonal adhezív. A sejtek monoréteget képeznek a tenyésztőedény felületén.
Átültetési arány:
Az SW-620 sejteket 1:3 osztási arányban szubkultiválják. A tapadó sejteket magnézium- és kalciummentes foszfátos sóoldattal (1X) öblítik le. Ezután hozzáadják az Accutase átültető oldatot, és a sejteket szobahőmérsékleten 8–10 percig inkubálják. Friss táptalajt adunk hozzá, majd a sejteket centrifugáljuk. Ezután a leszedett sejteket óvatosan újra szuszpendáljuk a növekedési táptalajban, és új lombikokba osztjuk szét a további növekedéshez.
Növekedési tápközeg:
Az SW-620 sejtek ideális növekedéséhez 10% borjúszérummal, 4,5 g/l glükózzal, 4 mM L-glutaminnal, 1,5 g/l NaHCO3-mal és 1,0 mM nátrium-piruváttal kiegészített DMEM táptalajt használunk. A tápközeget hetente kétszer kell cserélni.
Növekedési feltételek:
Az SW-620 vastagbélrákos sejteket 37 °C hőmérsékletű, 5% CO₂-tartalmú, párásított inkubátorban tenyésztik.
Tárolás:
Fagyasztás után az SW-620 sejteket -150 °C alatti hőmérsékleten, ultralow-temperatúra-fagyasztókban vagy folyékony nitrogén gőzfázisában tárolják.
Fagyasztási eljárás és táptalaj:
A CM-1 vagy CM-ACF ideális fagyasztóközeg az SW-620 sejtek számára. Az SW-620 sejtek fagyasztásához lassú fagyasztási eljárást alkalmaznak. Ez percenként csupán 1 °C-os hőmérsékletcsökkenést tesz lehetővé, így védve a sejtek életképességét.
Felolvasztási folyamat:
A fagyasztott SW-620 sejteket 37 °C-ra előre beállított vízfürdőben 40–60 másodpercig felolvasztják. A felolvasztás után tenyésztőközeget adnak hozzá, majd a sejteket centrifugálják, hogy eltávolítsák a fagyasztóközeg maradványait. Ezt követően a kapott sejtpelletet újra szuszpendálják tenyésztőközegben, majd a sejteket egy új lombikba öntik tenyésztés céljából.
Biológiai biztonsági szint:
Az SW-620 tenyészetek kezeléséhez 1. szintű biológiai biztonsági (BSL-1) laboratórium szükséges.
Az SW-620 cellák előnyei
Előnyök
- Vastagbélrák modellezése: Az SW-620 sejtek a vastagbélrák kritikus modelljeként szolgálnak, lehetővé téve a tumor és a metasztázis mechanizmusainak mélyreható tanulmányozását, különösen xenotranszplantációs modellekben.
- Rákkutatás és terápiák: Ezek a sejtek elősegítik a rákbiológia, a kemoterápiás hatékonyság és a sejthalál mechanizmusainak – beleértve az anoikist is – feltárását.
- CD133-expresszió: A CD133-expresszió az SW-620 sejtekben betekintést nyújt a rákos őssejtek biológiájába, valamint annak a tumorogenezisre és a terápiás rezisztenciára gyakorolt hatásába.
- Áramlási citometriai alkalmazások: Ezen sejtek áramlási citometriai elemzése lehetővé teszi a sejtpopulációk, az apoptózis szintje és a proliferáció értékelését.
Az SW-620 sejtvonal kutatási alkalmazásai
Az alábbiakban bemutatjuk azokat a kutatási területeket, ahol az SW-620 sejtek ígéretes alkalmazási lehetőségeket kínálnak:
- Rákkutatás: Az SW-620 felbecsülhetetlen értékű sejtmodell a vastagbélrák biológiájának tanulmányozásához. A kutatók ezt az in vitro modellt használják a ráksejtek növekedését, invázióját és migrációját vezérlő molekuláris mechanizmusok feltárására. Ezenkívül felhasználható az SW620 sejtvonal mutációinak, azaz a p53, APC és KRAS mutációinak vizsgálatára is. Egy 2021-ben végzett kutatás az SW620 sejtvonal KRAS-mutációjának hatását vizsgálta egy új gyógyszer, az FL118 iránti érzékenységre. Megfigyelték, hogy a KRAS túlzott expressziója fokozza az FL118 által kiváltott kolorektális sejtek apoptózisát, míg annak elnémítása csökkenti azt. Ezek az eredmények segíthetnek az FL118 alkalmazásának előrejelzésében KRAS-mutációval rendelkező vastagbélrákos betegek esetében [3].
- Gyógyszerszűrés és -fejlesztés: Az SW-620 sejtvonalat széles körben használják a vastagbélrák elleni potenciális gyógyszerjelöltek szűrésére és tesztelésére. A kutatók ezeket a sejteket használják a gyógyszerek citotoxicitásának és hatékonyságának értékelésére, ami célzott kezelési módszerek kifejlesztéséhez vezethet. Ilyen például egy tanulmány, amely a SW-620 sejtvonal felhasználásával vizsgálta a fahéj és a szegfűszeg egyes illóolaj-összetevőinek vastagbélrák elleni hatását [4].
- Metasztázis-vizsgálatok: Magas metasztatikus potenciáljuknak köszönhetően az SW-620 sejtek felhasználhatók a ráksejtek metasztázisának hátterében álló molekuláris útvonalak feltárására. Például Zhou Yang és munkatársai felfedezték a Grainy-head-like 2 (GRHL2) gén szerepét a vastagbélrák progressziójában és metasztázisában. Felvetették, hogy a GRHL2 gén expressziója az epiteliális-mesenchimális átalakulás (EMT) gátlása révén gátolja a vastagbélrák progresszióját és metasztázisát [5].
Biztosítsa az SW620 sejtvonalat
SW-620 sejtek: Publikációk
Ebben a részben bemutatunk néhány érdekes és leggyakrabban hivatkozott kutatási publikációt az SW-620 sejtekről.
A Molecular Carcinogenesis (2017) folyóiratban megjelent tanulmány szerint az urolithin A nevű polifenol kezelés autofágiát indukál az SW620 vastagbélrákos sejtvonalban. Emellett gátolta a ráksejtek metasztázisát is.
Az Oncology Letters (2018) folyóiratban megjelent cikk a SW-620 sejtek felhasználásával vizsgálta a tetrandrine – egy bisz-benzil-izokinolin-alkaloid – metasztázisgátló potenciálját.
Ez a tanulmány a Biochemical and Biophysical Research Communications (2018) folyóiratban jelent meg. A tanulmány azt állítja, hogy a CDCA3 (Cell division cycle associated 3) gén expressziója fokozott a kolorektális ráksejtekben, és az NF-κB jelátvitel aktiválása révén elősegíti azok proliferációját.
Az International Journal of Molecular Sciences (2021) folyóiratban megjelent tanulmány egy bispecifikus antitest (ABL001) és kemoterápiás gyógyszerek szinergikus hatását vizsgálta a tumor progressziójára az SW620 xenotranszplantátumban.
Ez a cikk a Cells (2018) folyóiratban jelent meg. A tanulmányban a Bacopa monnieri-ből nyert Bacopaside II kivonat daganatellenes hatását vizsgálták SW-620 és más vastagbélrákos sejtekben.
Források az SW-620 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyéb anyagok
Az alábbiakban néhány online forrás található, amely az SW-620 vastagbélrákos sejteket mutatja be.
- SW-620 transzfekció: Ez a cikk röviden ismerteti az SW-620 sejtvonal stabil transzfekciójának protokollját.
Az alábbi link az SW-620 sejtkultúra-protokollját tartalmazza.
- SW-620 sejtkultúra-protokoll: Ez a link alapvető információkat nyújt az SW-620 sejtvonalról. Segítséget nyújt továbbá az SW-620 sejtek szubkultiválásának protokolljának elsajátításában, valamint a krioprezervált és proliferáló SW-620 kultúrák kezelésében.
- Sejtkultúra-protokollok: Ez a videó kiváló forrás az adhezív sejtek átültetésére, fagyasztására és felolvasztására vonatkozó protokollok elsajátításához.
Gyakran ismételt kérdések az SW620 cellákról
Az SW620 sejtek humán vastagbélrákos adenokarcinóma sejtek, amelyeket egy vastagbélrákos beteg nyirokcsomó-metasztázisából nyertek, így jelentősek a rákkutatásban.
Az SW620 sejtek átmérője általában 15 és 30 mikrométer között mozog, bár ez a tenyésztési körülményektől függően változhat.
Az SW620 sejtek számos mutációt mutatnak, többek között a TP53 génben. Ezek a mutációk befolyásolhatják a sejtek morfológiáját, ami a populáción belül változatos formákat és méreteket eredményez.
Az SW620 és az SW480 sejtek mindkettő vastagbél adenokarcinómából származik, de az SW620 sejtek áttétes helyről származnak, míg az SW480 sejtek az elsődleges tumorból. Ez a különbség befolyásolhatja genetikai felépítésüket, a tenyésztésben való viselkedésüket és a kezelésekre adott válaszukat.
Az SW620 sejtek fontos szerepet játszanak a tumorigenezis tanulmányozásában, különösen azért, mert képesek daganatot képezni xenograft egérmodellekben, és olyan rákos őssejt-markereket expresszálnak, mint a CD133.
Igen, az SW620 sejteket a sejthalál útjainak, köztük az apoptózisnak és az anoikisznak a tanulmányozására használják, ahogyan azok különböző rákterápiákra és környezeti körülményekre reagálnak.
Az SW620 sejtek nagy metasztatikus potenciálja és metasztatikus nyirokcsomóból való származásuk miatt fontos modellnek számítanak a vastagbélrák terjedésének tanulmányozásához.
Az áramlási citometria lehetővé teszi a kutatók számára, hogy elemezzék az SW620 sejtek tulajdonságait, beleértve a CD133 expressziós mintázatát és az apoptózis mértékét vagy az anoikisz iránti érzékenységet.
Az SW620 sejtek immunhiányos xenograft egérmodellekbe juttatva nagy tumorigén potenciállal rendelkeznek, így értékesnek bizonyulnak a rák progressziójának in vivo vizsgálatához.
Hivatkozások
- Siekmann, W. és munkatársai: A lidokain és a ropivakain hatása az elsődleges (SW480) és a metasztatikus (SW620) vastagbélrákos sejtvonalakra. Oncol Lett, 2019. 18(1): 395–401. o.
- Hewitt, R.E. és munkatársai: A vastagbélrák progressziójának modelljének validálása. J Pathol, 2000. 192(4): 446–54. o.
- Thangaiyan, R. és munkatársai: A Kras-mutáció altípusai eltérő módon befolyásolják a kolorektális ráksejtek érzékenységét az FL118-ra, a survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 és MdmX új gátlójára. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): 7458. o.
- Petrocelli, G. és munkatársai: A növényi illóolajokban jelen lévő molekulák a vastagbélrák (CRC) megelőzésében és kezelésében. Molecules, 2021. 26(4): 885. o.
- Yang, Z. és munkatársai: A GRHL2 gátolja a kolorektális rák progresszióját és metasztázisát az epiteliális-mezenchimális átalakulás gátlása révén. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): 1195–1205. o.