MG-63 sejtvonal: Részletes útmutató az MG-63 sejtekhez az osteosarcoma-kutatásban
Az MG-63 sejtek fibroblaszt-szerű humán osteosarcoma sejtek, amelyek széles körű kutatási alkalmazási lehetőségeket kínálnak az orvostudományi területen. Ide tartozhatnak a csontokkal kapcsolatos folyamatok, például a csontfejlődés és a differenciálódás vizsgálata stb. Ezen felül az MG-63 sejtvonal megfelelő in vitro modellként szolgál a csontsejtek életképességének, szaporodásának és adhéziójának tanulmányozásához.
Az MG-63 sejtvonal általános jellemzői és eredete
A cikk ezen szakasza az MG-63 sejtvonal eredetét és általános jellemzőit tárgyalja. Megtudhatja: Mi az MG-63 sejtvonal? Mi az MG-63 sejtvonal eredete? Milyen az MG-63 sejtek morfológiája? Mekkora az MG-63 sejtek mérete?
- Az MG-63 egy osteoblast sejtvonal, amely egy 14 éves, osteosarcomában szenvedő férfi (kaukázusi) csontjából származik. A. Billiau és munkatársai 1977-ben letétbe helyezték ezt a sejtvonalat.
- Az MG-63 sejtvonal fibroblasztsejtekhez hasonló morfológiával rendelkezik.
- Az emberi osteosarcoma-sejtek (MG-63) hipotriploidiát mutatnak. E sejtek modális kromoszómaszáma 66, amely a sejtpopuláció körülbelül 44%-ában fordul elő. A sejtpopuláció közel 2%-ában magasabb ploiditásról is beszámoltak. Ezen felül minden sejtben bőségesen jelen vannak 18–19 marker kromoszómák.
Az MG-63 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
A sejtvonal tenyésztési követelményeivel kapcsolatos fontos információk megkönnyíthetik a munkáját. A cikk ezen szakasza felsorolja az MG-63 sejtek tenyésztéséhez és fenntartásához elengedhetetlen összes kulcsfontosságú szempontot. Itt megtudhatja: Mennyi az MG-63 sejtek duplázódási ideje? Milyen tenyésztőközeget használnak az MG-63 sejtekhez? Mekkora az MG-63 sejtek beültetési sűrűsége?
Az MG-63 sejtek tenyésztésének legfontosabb pontjai
Duplázódási idő
Az MG-63 sejtek populációjának duplázódási ideje a tenyésztési körülményektől függően 28–38 óra között mozog.
Növekedési tulajdonságok
Az MG-63 egy adhezív sejtvonal.
Beültetési sűrűség
Az MG-63 sejtek esetében 1 x 104 sejt/cm2 sejtsűrűség ajánlott. Az adhezív sejteket magnézium- és kalciummentes 1 x foszfátpuffer-sóoldattal (PBS) mossuk le. Ezeket a sejteket ezután disszociációs oldattal (Accutase) inkubáljuk, friss táptalajt adunk hozzájuk, majd centrifugáljuk. A leülepített sejtpelletet friss tápközegben reszuszpendáljuk, majd a növekedéshez új lombikba adagoljuk.
Növekedési tápközeg
Az MG-63 sejtek tenyésztéséhez DMEM vagy Ham’s F12 táptalajt használnak. Ezeket a táptalajokat az optimális sejtnövekedés érdekében 5% borjúszérummal (FBS), 3,0 g/l glükózzal, 2,5 mM L-glutaminnal és 1,2 g/l NaHCO3-mal lehet kiegészíteni. A táptalajt hetente 2–3 alkalommal kell cserélni.
Növekedési feltételek
Az MG-63 sejtek tenyésztéséhez 37 °C hőmérsékletű, párásított inkubátor és 5%-os CO₂-ellátás szükséges.
Tárolás
Ezek az oszteoblaszt-szerű sejtek a sejtek életképességének megőrzése érdekében folyékony nitrogén gőzfázisában vagy -150 °C alatti hőmérsékleten tárolhatók.
Fagyasztási eljárás és táptalaj
Az MG-63 sejtek fagyasztásához CM-1 vagy CM-ACF táptalajt használnak. Általában lassú fagyasztási eljárást javasolnak, hogy megelőzzék a sejtek sokkját és megőrizzék életképességüket.
Felolvasztási folyamat
A fagyasztott sejteket 40–60 másodpercig előmelegített vízfürdőben (37 °C) inkubálják. A sejteket friss tenyészközegben reszuszpendálják, majd új lombikba öntik. 24 órás inkubáció után a tenyészközeget kicserélik, hogy eltávolítsák a fagyasztó közeg összetevőit.
Biológiai biztonsági szint
Az MG-63-tenyészetek kezeléséhez és fenntartásához első szintű biológiai biztonsági laboratóriumi körülmények szükségesek.
- MG-63 sejtvonal: Előnyök és hátrányok
- Az MG-63 sejtvonal tenyésztésével kapcsolatos információk
- Rendelje meg még ma az MG-63 sejtjeit
- Az MG-63 sejtek alkalmazási területei
- Az MG-63 sejteket bemutató kutatási publikációk
- Források az MG-63 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyebek
- GYIK az MG-63 sejtekről
- Hivatkozások
- Gyakran feltett kérdések
MG-63 sejtvonal: előnyök és hátrányok
Az MG-63 egy széles körben használt osteoblast sejtvonal. Számos előnye és hátránya van. Az alábbiakban felsoroljuk az MG-63 sejtvonal néhány főbb előnyét és hátrányát.
Előnyök
Az MG-63 sejtek előnyei a következők:
-
Osteoblaszt-szerű tulajdonságok
Az MG-63 sejtvonal osteoblast-szerű jellemzőket mutat, így alkalmas a csontokkal kapcsolatos folyamatok és betegségek tanulmányozására. Használható továbbá a sejtek titánfelületeken történő adhéziójának, proliferációjának és életképességének vizsgálatára is [1].
-
Transzfekcióra való alkalmasság
Az MG-63 sejteket széles körben használják transzfekciós vizsgálatokban, lehetővé téve a génexpresszió, a génfunkciók és a sejtes folyamatok kutatását.
-
Magas szintű interferontermelés
Az MG-63 sejtek képesek magas szintű interferontermelésre. Cikloheximid, poliinozin-policitidil-sav és aktinomicin indukálása esetén cm²-enként 3,7-szer nagyobb interferonhozamot eredményeznek, mint a diploid fibroblasztok [2].
Hátrányok
Az MG-63 B-sejtekkel kapcsolatos hátrányok a következők:
-
Heterogenitás
Az MG-63 sejtek a sejtpopuláción belül heterogenitást mutatnak, ami befolyásolhatja a reprodukálhatóságot.
-
Daganatos sejtvonal
Az MG-63 egy rákos sejtvonal, és előfordulhat, hogy nem tükrözi teljes mértékben a normál sejtek viselkedését és fiziológiáját, ami korlátozza alkalmazhatóságát bizonyos laboratóriumi kísérletekben.
Rendelje meg még ma az MG-63 sejtjeit!
Az MG-63 sejtek alkalmazásai
Az MG-63 sejtek kiváló kutatási eszközök. Számos ígéretes alkalmazási lehetőséget kínálnak a kutatás területén. Az MG-63 sejtek néhány főbb kutatási alkalmazását az alábbiakban soroljuk fel.
- Csonttal kapcsolatos folyamatok/betegségek vizsgálata: Az MG-63 sejtek osteoblast-szerű (csontképző) sejtek. Ezért ezeket a sejteket széles körben használják csontbetegségek és sejtes folyamatok – többek között a fejlődés, a differenciálódás és a mineralizáció – vizsgálatára. Ezenkívül a sejteket széles körben alkalmazzák a csontgyógyulást elősegítő gyógyszerek szűrésére is. Egy kutatásban MG-63 sejteket használtak a Scutellaria baicalensis-ből zöld szintézissel előállított cink-oxid nanorészecskék terápiás potenciáljának vizsgálatára a csontsejtek proliferációja, mineralizációja és differenciálódása tekintetében [3].
- Rákkutatás: Az MG-63 sejteket széles körben használják a rákkutatásban. Számos tanulmányban alkalmazták ezeket az osteosarcoma sejteket a rákos jelátviteli útvonalak megértése, valamint a gyógyszerek citotoxikus és terápiás potenciáljának értékelése céljából. Egy 2019-ben végzett tanulmány az MG-63 sejteket felhasználva vizsgálta a Tomentosin nevű természetes vegyület daganatellenes tulajdonságait. Az eredmények azt mutatták, hogy a Tomentosin az intracelluláris reaktív oxigénszármazékok (ROS) termelésének kiváltásával fejt ki rákellenes hatást [4].
Az MG-63 sejteket bemutató kutatási publikációk
Az alábbiakban bemutatunk néhány, az MG-63-at, az osteoblasthoz hasonló sejtvonalat bemutató kutatási publikációt.
A miR-192 fokozza a metotrexát gyógyszer érzékenységét az MG-63 osteosarcoma ráksejtekre
Ez a cikk 2020-ban jelent meg a Pathology – Research and Practice folyóiratban. A kutatás során MG-63 sejteket használtak az osteosarcoma ráksejtek (MG-63) gyógyszerrezisztenciájában szerepet játszó molekuláris mechanizmusok vizsgálatára. Az eredmények rávilágítottak arra, hogy a miRNA-192 hasznos célpont lehet az osteosarcoma metotrexát-rezisztenciájának leküzdésében.
A kutatás a Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020) című folyóiratban jelent meg. A tanulmány a Rehmanniae Radixból zöld szintézissel előállított cink-oxid nanorészecskék (ZnONP-k) rákellenes potenciáljáról számolt be csontdaganatos sejtek (MG-63) ellen.
Ez a kutatási cikk 2021-ben jelent meg a Materials Science and Engineering folyóiratban. A tanulmány a Scutellaria baicalensis növényből bioszintetizált cink-oxid nanorészecskék csontgyógyító tulajdonságait mutatta be az MG-63 sejtvonal felhasználásával.
Ezt a tanulmányt 2021-ben az Onco Targets and Therapy folyóiratban tették közzé. A kutatás a kurkumin vegyület daganatellenes tulajdonságait mutatta be az osteosarcoma sejtekkel szemben. A vegyület ezeket a terápiás hatásokat a p-JAK2/p-STAT3 rákos jelátviteli útvonal inaktiválásával fejtette ki.
Ezt a kutatást 2018-ban publikálták az International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science folyóiratban. A tanulmány megállapította, hogy a bioenergetikusan kezelt D3-vitamin pozitívan befolyásolja a csontsejtek szaporodását, érését és differenciálódását, valamint javítja a csontok egészségi állapotát jellemző paramétereket.
Források az MG-63 sejtvonalhoz: protokollok, videók és egyéb anyagok
Számos forrás áll rendelkezésre az MG-63 sejtvonalról, amelyek részletesen ismertetik a sejtkultiválási és transzfekciós protokollokat.
- MG-63 sejtek transzfekciója: Ez a videó átfogóan elmagyarázza az MG-63 sejtek transzfekciós protokollját.
- Adherens sejtek átültetése: Ez a videó útmutatást nyújt az adherens sejtvonalak szubkultiválásához vagy átültetéséhez. Segítségével elsajátíthatja az alapvető sejtkultúra-protokollokat.
Az alábbi linken megtalálja az MG-63 sejtek tenyésztési protokollját.
- MG-63 sejtek tenyésztése: Ez a weboldal egyszerű és részletes protokollt nyújt az MG-63 sejtvonal szubkultiválásához vagy felosztásához.
Gyakran feltett kérdések az MG-63 sejtekkel kapcsolatban
Az MG-63 sejtek egy humán osteosarcoma sejtvonal, amelyet általában a kutatásban a csontbiológia, a rákbiológia és a gyógyszertesztelés tanulmányozására használnak. Egy 14 éves férfi osteosarcomájából származnak, és az osteoblasztos sejtekre jellemző tulajdonságokkal rendelkeznek.
Az MG-63 sejtek emberi csontrákból, a csontrák egyik típusából származnak. Pontosabban egy emberi beteg rosszindulatú csontszövetéből származnak.
Az MG-63 sejtek megduplázódási ideje jellemzően 24 és 36 óra között van, a tenyésztési körülményektől és a használt táptalajtól függően.
Az MG-63 sejtek abnormális kariotípust mutatnak, több kromoszóma-rendellenességgel. Ez magában foglalja a rákos sejtekre jellemző numerikus és strukturális aberrációkat is.
Míg az MG-63 sejtek osteosarcoma sejtek, addig a humán fibroblasztok kötőszövetből származnak, és részt vesznek a sebgyógyulásban és az extracelluláris mátrixképzésben. Mindkét sejttípust használják a sejtek kölcsönhatásainak vizsgálatára, különösen a csont- és szövetmérnöki tevékenységgel összefüggésben.
Az MG-63 sejtek robusztus sejtmegkötő tulajdonságokkal rendelkeznek, így alkalmasak a sejtek adhézióját, terjedését és a különböző biomaterialokkal való kölcsönhatását vizsgáló vizsgálatokra. Ezek a tulajdonságok kulcsfontosságúak az oszteoblasztok működésének megértéséhez és a csontimplantátumok optimalizálásához.
Az MG-63 sejteket az adenozin csontanyagcserében betöltött szerepének vizsgálatára használják a kutatásban. Az e sejteken található adenozinreceptorok különböző funkciókat közvetítenek, beleértve a csontképződést és -felszívódást, így értékesnek bizonyulnak a csontanyagcsere molekuláris mechanizmusainak tanulmányozásában.
Az amelogenin, a fogak zománcképződéséhez nélkülözhetetlen fehérje, szintén tanulmányozható MG-63 sejtek segítségével, hogy feltárjuk a csontsejtekre gyakorolt hatását és a csontszövet-építésben és -regenerációban betöltött lehetséges szerepét.
Az MG-63 sejtek fontos szerepet játszanak az oszteointegráció optimalizálásának tanulmányozásában, amely a csontszövet és az implantátumok integrálódásának folyamata. A kutatók ezeket a sejteket olyan új anyagok és felületi módosítások tesztelésére használják, amelyek javíthatják az implantátumok integrációját és stabilitását.
A fenotípusos stabilitás a sejtjellemzők időbeli és többszöri átjáráson keresztüli állandóságára utal. Az MG-63 sejtek esetében a fenotípusos stabilitás fenntartása elengedhetetlen a megbízható és reprodukálható eredmények biztosításához a kísérletekben.
Az MG-63 sejtek modellként szolgálnak az oszteoblasztok funkcióinak, köztük a csontképződésnek és a mineralizációnak, valamint az oszteoszarkóma patofiziológiájának tanulmányozására, betekintést nyújtva a rák progressziójába és a lehetséges terápiás célpontokba.
Igen, az MG-63 sejtek felhasználhatók a humán interferonok csontráksejtekre gyakorolt hatásainak vizsgálatára, beleértve azok vírusellenes, antiproliferatív és immunmoduláló tulajdonságait, hozzájárulva a rák immunterápiájának megértéséhez.
Hivatkozások
- Wandiyanto, J.V. és munkatársai: Az osteoblast-szerű MG-63 sejtek sorsa előzetesen fertőzött, baktericid nanostruktúrájú titánfelületeken. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A. és munkatársai, Emberi interferon: tömegtermelés egy újonnan létrehozott sejtvonalban, az MG-63-ban. Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): 11–5. o.
- Tang, Y. és munkatársai: A Scutellaria baicalensis-ből származó cink-oxid nanorészecskék osteogén differenciálódási és mineralizációs potenciálja humán osteoblast-szerű MG-63 sejtekben. Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: 111656. o.
- Lee, C.M. és munkatársai: A tomentosin intracelluláris reaktív oxigénszármazékok indukcióján keresztül rákellenes hatást fejt ki emberi osteosarcoma MG-63 sejtekben. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): 1508. o.