תאי imWilms1
800.00 €*
המוצרים נשלחים קפואים בקרח יבש בתוך צינורות קריוגניים. כל צינור קריוגני מכיל בדרך כלל 3 × 10 6 תאים עבור קווי תאים נצמדים או 5 × 106 תאים עבור קווי תאים בתמיסה (לפרטים נוספים, עיין בתעודת ה-CoA של האצווה).
מידע כללי
| תיאור | קו התאים Wilms1 נגזר במקור מגידול Wilms ראשוני, שהושג מחולה שאובחן עם גידולים גדולים בשתי הכליות, תופעה אופיינית לגידול Wilms (נפרובלסטומה). קו תאים זה נושא מוטציה הומוזיגוטית חסרת משמעות בגן WT1 (c.149 C>A, p.S50X), המובילה לייצור חלבון WT1 מקוצר ולא תפקודי. WT1 הוא גן קריטי בהתפתחות הכליות, והמוטציה בו קשורה קשר הדוק לפתוגנזה של גידול וילמס, במיוחד בגידולים המפגינים הבחנה סטרומלית. תאי Wilms1 מציגים קריוטיפ יציב ללא חריגות כרומוזומליות משמעותיות, והם מאופיינים בפנוטיפ מזנכימלי, המבטא וימנטין תוך היעדר סמנים אפיתלליים כמו ציטוקראטין. הקו מציג יכולת מוגבלת אך משמעותית להבחנה מזנכמלית, כולל פוטנציאל להבחנה לתאים דמויי שריר בתנאים ספציפיים, מה שהופך אותו למודל חיוני לחקר ההשלכות המולקולריות של מוטציות WT1. כדי להתגבר על תוחלת החיים המוגבלת של תאי Wilms1 הראשוניים, שושלת התאים imWilms1 הוקמה על ידי החדרת אנטיגן T גדול SV40 משולש מוטציה (U19dl89-97tsA58) לתאי הגידול המקוריים, מה שמקל על הנצחתם. שינוי זה מאפשר לתאי imWilms1 להתרבות ללא הגבלת זמן תוך שמירה על יציבות כרומוזומלית, ובכך מספק מודל אמין למחקרים ארוכי טווח. תאי imWilms1 המונצחים ממשיכים להפגין את אותה מוטציה WT1 ושומרים על המאפיינים המזנכימליים של קו Wilms1 ההורי. בנוסף לתכונות הגנטיות והפנוטיפיות שלו, קו התאים imWilms1 נותח בהרחבה על פעילות מסלולי האיתות שלו. מחקרים פרוטאומיים חשפו את הזרחון וההפעלה של מספר קולטני טירוזין קינאז (RTK), כולל EGFR, PDGFRβ ו-AXL, עם הפעלה במורד הזרם של מסלולי האיתות MAPK. הפעלתם העקבית של מסלולים אלה בתאי imWilms1 מדגישה את הרלוונטיות שלהם לחקר אסטרטגיות טיפוליות ממוקדות בגידול וילמס. בסך הכל, imWilms1 משמש מודל יציב וארוך טווח לחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס התפתחות והתקדמות גידול וילמס, במיוחד אלה המונעים על ידי מוטציות WT1 ומסלולי איתות חריגים. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | כליה |
| מחלה | גידול וילמס |
| מילים נרדפות | IM-WT-1 |
מאפיינים
| גיל | 10 חודשים |
|---|---|
| מגדר | נקבה |
| מוצא אתני | קווקזי |
| מורפולוגיה | בצורת ציר |
| סוג התא | תאי וילמס |
| תכונות צמיחה | דבק |
נתונים רגולטוריים
| ציטוט | imWilms1 (מספר קטלוגי Cytion 300412) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_A5SN |
| סטטוס GMO | GMO-S1: קו תאי הגידול Wilms האנושי imWilms1 מכיל קלטת אנטיגן T SV40 משולשת מוטציה המאפשרת הנצחה מותנית למחקר בנושא נפרובלסטומה. סיווג זה חל רק בגרמניה ועשוי להיות שונה במקומות אחרים. |
נתונים ביו-מולקולריים
| פרופיל מוטציוני | סטטוס מוטציה WT1: הומוזיגוטי c. 149 C>A, p.S50x, LOH: 11p11-11pter, סטטוס מוטציה CTNNB1: הטרוזיגוטי TCT>TTT, p.S45F |
|---|
טיפול
| תרבית ביניים | ערכת MSCGM (מבית Lonza) |
|---|---|
| חומר מפרק | אקוטאז |
| תת-תרבות | הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי. |
| חידוש נוזלים | 1 עד 2 פעמים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| ציפוי בקבוק | לצורך היצמדות וחיוניות מיטביות לאחר ההפשרה, אנו ממליצים להשתמש בבקבוקים או בצלחות מצופים בקולגן. |
| הליך ההקפאה | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
בקרת איכות / פרופיל גנטי / HLA
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|---|
| אללים HLA |
A*: '03:01:01, '24:02:01
B*: '35:03:01, '38:01:01
C*: 12:03:01
DRB1*: 07:01:01, 14:54:01
DQA1*: '01:04:01, '02:01:01
DQB1*: '02:02:01, '05:03:01
DPB1*: '02:01:02G, '04:02:01G
E: 01:03:01, 01:03:02
|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 300412-030624 | תעודת ניתוח | 18. Aug. 2025 | 300412 |
| 300412-221 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300412 |
הסכם העברת חומרים
אם בכוונתכם להשתמש בקווי תאים של Cytion אך ורק למחקר פנימי באתר מחקר אחד, אנא מלאו וחתמו על הסכם העברת חומרים (MTA) שלנו והגישו אותו יחד עם הזמנתכם.
לכל יישום מסחרי - כולל, בין היתר, עבודה בתשלום, בדיקות בקרת איכות, שחרור מוצרים, שימוש באבחון או מחקרים רגולטוריים - אנא מלאו את טופס השימוש המיועד כדי שנוכל להכין הסכם מתאים המותאם לפרויקט שלכם.
שימו לב: הסכם MTA חל רק על קווי תאים מסוימים. אם הודעה זו ומסמך MTA מופיעים בדף המוצר, ההסכם חל. עבור קווי תאים שאינם מכוסים על ידי הסכם MTA, לא תופיע כל התייחסות להסכם. הסכם MTA אינו תקף ללקוחות באמריקה, סין או טייוואן. אנא צרו קשר עם הישות האמריקאית שלנו כדי לקבל את ההסכם המתאים.
-
מוצרים נדרשים
מוצרים נדרשים
חומר הקפאה CM-1 - 50 מ"לגרסאות של חומרי שימור בקירור: 50 מ"לFreeze Medium CM-1 של Cytion הוא מדיום שימור בקירור מתקדם, שנועד להבטיח את הרמה הגבוהה ביותר של חיוניות ותפקודיות התאים לאחר ההפשרה. מדיום רב-תכליתי זה מתאים למגוון רחב של סוגי תאים, כולל תאים אנושיים ותאי בעלי חיים, מה שהופך אותו לכלי חיוני ליישומים מחקריים מגוונים. Freeze Medium CM-1, שנוסחה על בסיס שילוב מאוזן בקפדנות של חומרים להגנה מפני הקפאה וחומרים מזינים חיוניים, ממזערת את היווצרות גבישי הקרח ואת הלחץ התאי במהלך תהליך ההקפאה, ובכך משמרת את שלמות התאים.
התכונות העיקריות של Freeze Medium CM-1 כוללות:
תאימות רחבה: יעיל למגוון רחב של סוגי תאים, כולל תאים ראשוניים, תאי גזע וקווי תאים מבוססים.
חיוניות גבוהה: מותאם למקסום התאוששות התאים וחיוניותם לאחר ההפשרה, ומבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
מוכן לשימוש: מוכן וסטרילי לשימוש מיידי, מקצר את זמן ההכנה ומפחית את הסיכון לזיהום.
יציבות משופרת: שומר על ביצועים עקביים בתנאי שימור בקירור סטנדרטיים, ומבטיח תוצאות ניתנות לשחזור.
אורך חיי מדף ארוך: CM-1 הוא מדיום שימור בקירור המכיל סרום ומוכן לשימוש, שניתן לאחסן במקרר עד שנה.
שימוש ב-CM-1 להקפאת תאים
כדי להשתמש ב-CM-1 להקפאת תאים נצמדים ותאים מרחפים, בצעו את השלבים הבאים
לתאים דבקים, יש לשטוף אותם ולהפריד אותם ממצע התרבית. לתאים בתמיסה, יש להמשיך ישירות לשלב הבא.
ספרו את התאים כדי לוודא שהם בריכוז הנכון.
סובבו את התאים בצנטריפוגה כדי להפריד אותם, ואז השרו אותם מחדש במדיום הקפאה CM-1.
העבר את התאים המושעים מחדש למבחנות קריו.
השתמש בשיטת הקפאה איטית לפני העברת התאים לאחסון לטווח ארוך
שיטה
תיאור
שלבים
❄️
הקפאה ידנית
שיטה שלב אחר שלב הכוללת הפחתה הדרגתית של הטמפרטורה כדי להבטיח את חיוניות התאים
1️⃣ הכניסו את התאים למדיום הקפאה במקפיא בטמפרטורה של 4°C למשך 40 דקות.
2️⃣ העבירו למקפיא בטמפרטורה של -80°C למשך 24 שעות.
3️⃣ אחסן את התאים בחנקן נוזלי לשמירה לטווח ארוך
❄️
שימוש ב-Mr. Frosty
מכשיר נוח המאפשר בקרת קצב ההקפאה ללא צורך בחשמל.
1️⃣ הכן את התאים בבקבוקונים קריוגניים עם חומר הקפאה.
2️⃣ הכניסו את מבחנות הקריו למכל Mr. Frosty.
3️⃣ אחסנו בטמפרטורה של -80°C למשך 24 שעות לפני העברתם לחנקן נוזלי
❄️
מקפיא בקרת קצב
מקפיא בעל דיוק גבוה מתוצרת Thermo Fisher או יצרנים אחרים, המיועד להפחתת טמפרטורה מבוקרת.
1️⃣ תכנת את המכשיר להורדת הטמפרטורה בהדרגה.
2️⃣ הכניסו את התאים המוכנים למקפיא.
3️⃣ לאחר מחזור ההקפאה, העבירו את התאים לחנקן נוזלי
אחסן את הקריובילים בטמפרטורות מתחת ל-130°C או בחנקן נוזלי לשמירה לטווח ארוך.
מרכיבים
מכיל FBS, DMSO, גלוקוז, מלחים
יכולת חיץ: pH = 7.2 עד 7.6
מדיום ההקפאה CM-1 של Cytion מציע פתרון אמין לשימור בקירור, המבטיח חיוניות ותפקודיות גבוהים של התאים לאחר ההפשרה למגוון רחב של יישומים מחקריים.59.00 €*אקוטאזגרסאות: 100 מ"לAccutase Cell Dissociation Reagent
- חלופה עדינה לטריפסין
Accutase הוא תמיסת ניתוק תאים המהפכת את תעשיית תרבית התאים. זוהי תערובת של אנזימים פרוטאוליטיים וקולגןוליטיים המדמה את פעולת הטריפסין והקולגנאז. בניגוד לטריפסין, Accutase אינו מכיל רכיבים ממקור יונקי או חיידקי והוא עדין הרבה יותר לתאים, מה שהופך אותו לפתרון אידיאלי לניתוק שגרתי של תאים מכלי פלסטיק סטנדרטיים לתרבית רקמות וכלי פלסטיק מצופים בהדבקה. בפוסט זה נבחן את היתרונות והשימושים של Accutase וכיצד הוא משנה את כללי המשחק בתרבית תאים.
יתרונות Accutase
ל-Accutase יש מספר יתרונות על פני תמיסות טריפסין מסורתיות. ראשית, ניתן להשתמש בו בכל פעם שיש צורך בהפרדה עדינה ויעילה של כל קו תאים דבקים, מה שהופך אותו לתחליף ישיר לטריפסין. שנית, Accutase פועל היטב על תאי גזע עובריים ועצביים, והוכח כי הוא שומר על חיוניותם של תאים אלה לאחר מעבר. שלישית, Accutase משמר את מרבית האפיטופים לצורך ניתוח ציטומטריה זרימה עוקב, מה שהופך אותו לאידיאלי לניתוח סמנים על פני תאים.
בנוסף, אין צורך לנטרל את Accutase בעת העברת תאים דבוקים. תוספת של מדיום לאחר פיצול התאים מדללת את Accutase, כך שהוא אינו מסוגל עוד לנתק תאים. הדבר מבטל את הצורך בשלב איון ומחסוך זמן לטכנאי תרבית תאים. לבסוף, אין צורך לחלק את Accutase למנות, ובקבוק אחד נשמר במקרר למשך חודשיים.
יישומים של Accutase
Accutase מהווה תחליף ישיר לתמיסת טריפסין וניתן להשתמש בו להעברת קווי תאים. בנוסף, Accutase מתפקד היטב בעת ניתוק תאים לצורך ניתוח של סמנים רבים על פני התא באמצעות ציטומטריה זרימה ולצורך מיון תאים. יישומים נוספים של טיפול ב-Accutase כוללים ניתוח סמנים על פני התא, בדיקת צמיחת נגיפים, התרבות תאים, בדיקות נדידת תאי גידול, העברת תאים שגרתית, הגדלת היקף הייצור (ביו-ריאקטור) וציטומטריה זרימה.
הרכב Accutase
Accutase אינו מכיל רכיבים ממקור יונקי או חיידקי, והוא תערובת אנזימים טבעית עם פעילות אנזימטית פרוטאוליטית וקולגנוליטית. הוא מנוסח בריכוז נמוך בהרבה מזה של טריפסין וקולגנאז, מה שהופך אותו לפחות רעיל ועדין יותר, אך לא פחות יעיל.
יעילות Accutase
Accutase הוכח כיעיל בהפרדת תאים ראשוניים ותאי גזע ובשמירה על חיוניות תאים גבוהה בהשוואה לאנזימים ממקור חייתי כגון טריפסין. 100% מהתאים משוחזרים לאחר 10 דקות, ואין כל נזק בהשארת תאים ב-Accutase למשך עד 45 דקות, הודות לעיכול עצמי של Accutase.
לסיכום
לסיכום, Accutase הוא פתרון עוצמתי שמשנה את כללי המשחק בתרבית תאים. בזכות אופיו העדין, יעילותו ורב-תכליתיותו, Accutase הוא החלופה האידיאלית לטריפסין. אם אתם מחפשים פתרון אמין ויעיל להפרדת תאים, Accutase הוא הפתרון עבורכם.75.00 €*תמיסת אנטיביוטיקה/אנטימיקוטית (100x)סקירת המוצר
נפח: 100 מ"ל
אחסון: ≤-15°C
סטריליות: מסונן סטרילי
תמיסת אנטיביוטיקה/אנטימיקוטית (100x) היא תמיסה סטרילית, מוכנה לשימוש, שנועדה להפחית את הסיכונים לזיהום מיקרוביאלי בתרבית תאים וביישומים מעבדתיים נלווים. תמיסה זו, המרוכזת פי 100, מכילה שילוב מוכח של פניצילין, סטרפטומיצין ואמפותריצין B, המספק פעילות אנטימיקרוביאלית רחבת טווח נגד חיידקים גראם-חיוביים וגראם-שליליים, שמרים ופטריות פילמנטריות. התכשיר מתאים לשימוש בתרבויות תאים אוקריוטיות, במדיות חיידקים ובמערכות רגישות לזיהום אחרות, ותומך בפעילות מעבדה נקייה ועקבית.
יישום ויתרונות תמיסה זו, המותאמת לפרוטוקולי מחקר שגרתיים, נמצאת בשימוש נרחב לשמירה על תנאים סטריליים בתהליכי עבודה של תרבית תאים. היא מציעה ביצועים אמינים בסביבות רגישות לזיהום, ומסייעת לחוקרים להפחית את הסיכון לצמיחת יתר של מיקרואורגניזמים מבלי לפגוע בבריאות התאים או ביכולת לשחזר את הניסויים. התכשיר המסונן בסטריליות מבטל את הצורך בשלבי המסה נוספים, תומך בהכנת מצעים יעילה ומפחית את השונות בהליכים המעבדתיים היומיומיים.
שימוש ותאימות כדי להשיג ריכוזים סטנדרטיים לעבודה, יש לדלל את התמיסה ביחס של 1:100 בתווך התרבית המלא. המוצר תואם למגוון רחב של קווי תאים של יונקים ותווך בסיסי. בזכות זמינות מלאי עקבית, החוקרים נהנים מהמשכיות אספקה אמינה ותכנון לוגיסטי פשוט. יש לאחסן את התמיסה בטמפרטורה של ≤ –15 °C ולהגן עליה מפני מחזורי הקפאה והפשרה חוזרים ונשנים כדי לשמור על יציבותה. לשימוש במחקר בלבד. לא לשימוש בהליכים אבחוניים או טיפוליים. לא לשימוש בבני אדם או בבעלי חיים.45.00 €*PBSתמיסת מלח מאוזנת פוספט (PBS)
תמיסת מלח מאוזנת פוספט (PBS) היא תמיסת חיץ נפוצה במחקר ביולוגי וכימי. היא ממלאת תפקיד מכריע בשמירה על איזון ה-pH והאוסמולריות במהלך הליכים ניסויים שונים, כולל עיבוד רקמות ותרבית תאים. תמיסת ה-PBS שלנו מנוסחת בקפדנות מרכיבים בעלי טוהר גבוה כדי להבטיח יציבות ואמינות בכל ניסוי. האוסמולריות וריכוזי היונים ב-PBS שלנו מדמים באופן הדוק את אלה של גוף האדם, מה שהופך אותו לאיזוטוני ולא רעיל לרוב התאים.
הרכב תמיסת ה-PBS שלנו
תמיסת PBS שלנו היא תערובת של חומרי חיץ פוספט ברמת טוהר גבוהה ותמיסות מלח, המותאמת ל-pH. בריכוז עבודה של 1X, היא מכילה:
8000 מ"ג/ל' נתרן כלורי (NaCl)
200 מ"ג/ל' אשלגן כלורי (KCl)
1150 מ"ג/ל' נתרן פוספט דו-בסיסי נטול מים (Na2HPO4)
200 מ"ג/ל' אשלגן פוספט חד-בסיסי נטול מים (KH2PO4)
הרכב זה מבטיח pH ואיזון יוני אופטימליים, המתאימים למגוון רחב של יישומים ביולוגיים.
יישומים של תמיסת PBS שלנו
תמיסת PBS שלנו אידיאלית ליישומים שונים במחקר ביולוגי. תכונותיה האיזוטוניות והלא רעילות הופכות אותה למתאימה לדילול חומרים ושטיפת מיכלים לתאים. תמיסות PBS המכילות EDTA יעילות לניתוק תאים דבוקים ומאוגדים. עם זאת, אין להוסיף מתכות דו-ערכיות כגון אבץ ל-PBS, מכיוון שהדבר עלול לגרום לשקיעה. במקרים כאלה, מומלץ להשתמש במאגרים של Good. בנוסף, תמיסת PBS שלנו מהווה חלופה מקובלת למדיום הובלה נגיפי להובלה ואחסון של נגיפי RNA, כולל SARS-CoV-2.
בקרת איכות
מסונן סטרילי
אחסון ותוקף
יש לאחסן בטמפרטורה של +2°C עד +25°C, הרחק מאור.
לאחר הפתיחה, יש לאחסן בטמפרטורה של 2°C עד 25°C ולהשתמש תוך 24 חודשים.
תנאי משלוח
טמפרטורת הסביבה
תחזוקה
יש לאחסן בקירור בטמפרטורה של +2°C עד +8°C במקום חשוך. יש להימנע מהקפאה ומחימום תכוף ל-+37°C, מכיוון שהדבר פוגע באיכות המוצר.
אין לחמם את המדיום מעבר ל-37°C או להשתמש במקורות חום בלתי מבוקרים כגון מכשירי מיקרוגל.
אם יש להשתמש רק בחלק מהמדיום, יש להוציא את הכמות הנדרשת ולחמם אותה לטמפרטורת החדר לפני השימוש.
הרכב
קטגוריה
מרכיבים
ריכוז (מ"ג/ל')
מלחים
אשלגן כלורי
200
אשלגן פוספט חד-בסיסי נטול מים
20
נתרן כלורי
800
נתרן פוספט דו-בסיסי נטול מים
11520.00 €*