תאי HaCaT
עובדות חיוניות על תאי Hacat
| תיאור | תאי HaCaT הם מודל מרכזי במחקר דרמטולוגי, המספק תובנות על המנגנונים המורכבים של ביולוגיה ופתולוגיה של העור. קו התאים HaCaT, שהפך לאלמותי באופן ספונטני, נגזר מתאי אפידרמיס אנושיים בוגרים ושומר על היכולת להתרבות ולעבור התמיינות, בדומה לקרטינוציטים בסיסיים in vivo. תאי HaCaT משמשים כפלטפורמה איתנה לחקר תהליך ההתמיינות האפידרמיס וללימוד סמני ההתמיינות האפידרמיס החיוניים לשמירה על שלמות העור. הרגישות של תאי HaCaT לאפופטוזיס והרגישות שלהם לחומרים המשרים אפופטוזיס נחקרים בהרחבה, במיוחד בהקשר של חומרים ציטוטוקסיים כמו RIPL. חוקרים מעריכים את הציטוטוקסיות של חומרים אלה ואת מידת הציטוטוקסיות באמצעות תאי HaCaT, תוך שימוש בטכניקות כגון מיקרוסקופיה פלואורסצנטית כדי להמחיש את השינויים התאיים. חוקרים השתמשו בתאי HaCaT כדי לבחון את ההשפעות של חומרים שונים, כולל מצעים אנטי-מיקרוביאליים והשפעתם על חיוניות התאים. תאים אלה מהווים מצע מצוין לבדיקת חומרים ביולוגיים אנטי-מיקרוביאליים ומצעים אנטי-מיקרוביאליים של אטלו-קולגן, החיוניים לתיקון העור וליישומים רפואיים. קו האפידרמיס HaCaT ממלא תפקיד מכריע גם בחקר הזדקנות תאים, ציטוקינים ופרופילי ביטוי גנים הקשורים להזדקנות ולמחלות כרוניות. פרופילי השעתוק של תאי HaCaT, כולל תפקידם של κB ו-microRNAs, מספקים תובנות על מנגנוני הוויסות ברמה המולקולרית. קו הקרטינוציטים HaCaT, עם מאפייניו כקרטינוציטים אפידרמליים, מציע מערכת נוחה לניתוח האינטראקציה המורכבת בין תאי האפידרמיס למערכת החיסון, ובמיוחד תפקידם של הקרטינוציטים במצבי מחלה. הם מאפשרים לחקור שינויים אפיגנטיים והשפעתם על התמיינות הקרטינוציטים, כולל היווצרות המעטפת הקרנית, תכונה מרכזית בתפקוד המחסום של העור. לסיכום, תאי HaCaT הם מודל חיוני במחקר דרמטולוגי, המאפשר הבנה מעמיקה יותר של ביולוגיה ופתולוגיה של העור בזכות הדמיון שלהם לקרטינוציטים בסיסיים ויכולתם לעבור צמיחה והתמיינות תאים. היישומים שלהם נעים מחקר של התמיינות אפידרמיס והשפעות אנטי-מיקרוביאליות ועד לחקר תגובות תאיות כגון אפופטוזיס, מה שהופך אותם לאבן יסוד בביולוגיה תאית ובמחקר ביו-רפואי. |
|---|---|
| אורגניזם | אדם |
| רקמה | עור |
פרטים
| גיל | 62 שנים |
|---|---|
| מגדר | זכר |
| מוצא אתני | קווקזי |
| סוג התא | קרטינוציטים בקוטר של 20-25 מיקרומטר. |
| תכונות צמיחה | דבק |
תיעוד
| ציטוט | HaCaT (מספר קטלוגי Cytion 300493) |
|---|---|
| רמת בטיחות ביולוגית | 1 |
| NCBI_TaxID | 9606 |
| CellosaurusAccession | CVCL_0038 |
גנטיקה של קו תאי הקרטינוציטים HaCaT
| Tumorigenic | לא |
|---|---|
| קריוטיפ | אנאופלואידי (היפוטטרהפלואידי) |
טיפול בקו התאים Hacat
| תרבית ביניים | DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a) |
|---|---|
| תוספים | הוסף לתווך 10% FBS |
| חומר מפרק | יש להכין את התערובת ביחס של 1:1 בין EDTA (מלאי: 0.05%) וטריפסין (מלאי: 0.1%) בכל פעם לפני ניתוק התאים באמצעות PBS ללא Ca2+ ו-Mg2+ כדי לספק אוסמולריות פיזיולוגית. לא מומלץ להשתמש בתערובות טריפסין/EDTA מוכנות לשימוש, מכיוון שהדבר עלול לגרום להיווצרות גושים של תאים. כחלופה, ניתן להשתמש ב-TrypLE Express (Life Technologies) במקום טריפסין/EDTA. יש לפעול על פי הפרוטוקול של היצרן. |
| זמן הכפלה | זמן הכפלת תאי HaCaT הוא 28 שעות. |
| תת-תרבות |
|
| יחס פיצול | A ratio of 1:5 to 1:10 is recommended |
| צפיפות זריעה | 1 x 104 תאים/סמ"ר |
| חידוש נוזלים | פעמיים בשבוע |
| חומר הקפאה | כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה. |
| הפשרה וגידול תאים |
|
| אטמוספירת דגירה | 37°C, 5%CO2, אווירה לחה. |
| ציפוי בקבוק | לצורך היצמדות וחיוניות מיטביות לאחר ההפשרה, אנו ממליצים להשתמש בבקבוקים או בצלחות מצופים בקולגן. |
| הליך ההקפאה | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי משלוח | שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים. |
| תנאי אחסון | לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי. |
הבטחת איכות
| עקרות | זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה. כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות. |
|---|---|
| פרופיל STR |
אמלוגנין: x,x
CSF1PO: 9,11
D13S317: 10,12
D16S539: 9,12
D5S818: 12
D7S820: 9,11
TH01: 09. Mrz
TPOX: 11,12
vWA: 16,17
D3S1358: 16
D21S11: 28,30.2
D18S51: 12
פנטה E: 7,12
פנטה D: 11,13
D8S1179: 14
FGA: 24
D1S1656: 11,12
D2S1338: 17,25
D12S391: 18,23
D19S433: 13,14
|
| אללים HLA |
A*: '31:01:02
B*: '40:01:02, '51:01:01
C*: 03:04:01, 15:02:01
DRB1*: '04:01:01, '15:01:01
DQA1*: '01:02:01, '03:03:01
DQB1*: '03:01:01, '06:02:01
DPB1*: '03:01:01, '04:01:01
E: 01:03:01, 01:03:02
|
תעודת ניתוח (CoA)
| מספר לוט | סוג התעודה | תאריך | מספר קטלוגי |
|---|---|---|---|
| 300493-250324 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190723 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-190124 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225SF | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-170225 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300493 |
| 300493-040424 | תעודת ניתוח | 23. May. 2025 | 300493 |