תאי HBL-100

Freeze Medium CM-1 של Cytion הוא מדיום שימור בקירור מתקדם, שנועד להבטיח את הרמה הגבוהה ביותר של חיוניות ותפקודיות התאים לאחר ההפשרה. מדיום רב-תכליתי זה מתאים למגוון רחב של סוגי תאים, כולל תאים אנושיים ותאי בעלי חיים, מה שהופך אותו לכלי חיוני ליישומים מחקריים מגוונים. Freeze Medium CM-1, שנוסחה על בסיס שילוב מאוזן בקפדנות של חומרים להגנה מפני הקפאה וחומרים מזינים חיוניים, ממזערת את היווצרות גבישי הקרח ואת הלחץ התאי במהלך תהליך ההקפאה, ובכך משמרת את שלמות התאים.
התכונות העיקריות של Freeze Medium CM-1 כוללות:

תאימות רחבה: יעיל למגוון רחב של סוגי תאים, כולל תאים ראשוניים, תאי גזע וקווי תאים מבוססים.
חיוניות גבוהה: מותאם למקסום התאוששות התאים וחיוניותם לאחר ההפשרה, ומבטיח תוצאות ניסוי אמינות.
מוכן לשימוש: מוכן וסטרילי לשימוש מיידי, מקצר את זמן ההכנה ומפחית את הסיכון לזיהום.
יציבות משופרת: שומר על ביצועים עקביים בתנאי שימור בקירור סטנדרטיים, ומבטיח תוצאות ניתנות לשחזור.
אורך חיי מדף ארוך: CM-1 הוא מדיום שימור בקירור המכיל סרום ומוכן לשימוש, שניתן לאחסן במקרר עד שנה.


שימוש ב-CM-1 להקפאת תאים

כדי להשתמש ב-CM-1 להקפאת תאים נצמדים ותאים מרחפים, בצעו את השלבים הבאים

לתאים דבקים, יש לשטוף אותם ולהפריד אותם ממצע התרבית. לתאים בתמיסה, יש להמשיך ישירות לשלב הבא.
ספרו את התאים כדי לוודא שהם בריכוז הנכון.
סובבו את התאים בצנטריפוגה כדי להפריד אותם, ואז השרו אותם מחדש במדיום הקפאה CM-1.
העבר את התאים המושעים מחדש למבחנות קריו.
השתמש בשיטת הקפאה איטית לפני העברת התאים לאחסון לטווח ארוך





שיטה
תיאור
שלבים





❄️
הקפאה ידנית

שיטה שלב אחר שלב הכוללת הפחתה הדרגתית של הטמפרטורה כדי להבטיח את חיוניות התאים

1️⃣ הכניסו את התאים למדיום הקפאה במקפיא בטמפרטורה של 4°C למשך 40 דקות.
2️⃣ העבירו למקפיא בטמפרטורה של -80°C למשך 24 שעות.
3️⃣ אחסן את התאים בחנקן נוזלי לשמירה לטווח ארוך



❄️
שימוש ב-Mr. Frosty

מכשיר נוח המאפשר בקרת קצב ההקפאה ללא צורך בחשמל.


1️⃣ הכן את התאים בבקבוקונים קריוגניים עם חומר הקפאה.
2️⃣ הכניסו את מבחנות הקריו למכל Mr. Frosty.
3️⃣ אחסנו בטמפרטורה של -80°C למשך 24 שעות לפני העברתם לחנקן נוזלי



❄️
מקפיא בקרת קצב


מקפיא בעל דיוק גבוה מתוצרת Thermo Fisher או יצרנים אחרים, המיועד להפחתת טמפרטורה מבוקרת.


1️⃣ תכנת את המכשיר להורדת הטמפרטורה בהדרגה.
2️⃣ הכניסו את התאים המוכנים למקפיא.
3️⃣ לאחר מחזור ההקפאה, העבירו את התאים לחנקן נוזלי









אחסן את הקריובילים בטמפרטורות מתחת ל-130°C או בחנקן נוזלי לשמירה לטווח ארוך.


מרכיבים

מכיל FBS, DMSO, גלוקוז, מלחים
יכולת חיץ: pH = 7.2 עד 7.6


מדיום ההקפאה CM-1 של Cytion מציע פתרון אמין לשימור בקירור, המבטיח חיוניות ותפקודיות גבוהים של התאים לאחר ההפשרה למגוון רחב של יישומים מחקריים.

מדיום 5A של McCoy הוא מדיום מומלץ במיוחד המיועד להקל על צמיחה ושכפול של נגיפים בתרבויות תאים ראשוניות. הוא זכה להכרה משמעותית בזכות ביצועיו יוצאי הדופן במגוון יישומים במחקר ביולוגי. אחד היישומים הבולטים של McCoy's 5A Medium הוא השימוש בו בתרבית של קווי תאים של קרצינומה במעי הגס האנושי. באופן ספציפי, הוא שימש במחקר על קולטן G-protein-coupled receptor (LGR5) העשיר בלויסין ותפקידו בגרורות של סרטן המעי הגס. מדיום זה שימש ביעילות בגידול מספר קווי תאים של קרצינומה במעי הגס, כולל HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b ו-TENN, ואפשר לחוקרים להעמיק את המחקר על המנגנונים העומדים בבסיס גרורות סרטן המעי הגס. בנוסף ליישום במחקר הסרטן, McCoy's 5A Medium הוכח כחיוני במחקר של אוסטאובלסטים. חוקרים הבוחנים את תגובתיות היונים של הידרוקסיאפטיט חסר סידן במדיום תרבית תאים סטנדרטי השתמשו במדיום זה לגידול אוסטאובלסטים. יישום זה סייע להבנה טובה יותר של האינטראקציות בין אוסטאובלסטים והידרוקסיאפטיט חסר סידן, ותרם להתקדמות בתחום מחקר העצמות. תמיסת McCoy's 5A פותחה בקפדנות על ידי שינוי חומצות האמינו הנמצאות בתמיסת Basal Medium Eagle, כדי לספק תמיכה מיטבית לתאי גידול בכבד. תרכובת מועשרת זו מאפשרת את התאמתה למגוון רחב של קווי תאים מבוססים, כמו גם לתאים ראשוניים, מה שמגביר עוד יותר את הרבגוניות והיישומים שלה במגוון סביבות מחקר. McCoy's 5A Medium מרחיב את השפעותיו הביוכימיות והפיזיולוגיות מעבר לתאי גידול בכבד. הוא שימש בהצלחה לתמיכה בצמיחה בתרבויות ראשוניות של מח עצם, עור, חניכיים, כליה, אומנטום, יותרת הכליה, ריאה, טחול, עובר חולדה וסוגים אחרים של תאים. מגוון רחב זה של יישומים מעיד על השימושיות הרחבה של McCoy's 5A Medium בתמיכה בצמיחה ובתחזוקה של סוגים שונים של תאים למחקר ביולוגי מקיף. הרכב מדיום McCoy's 5A (משופר) זה מכיל 3.0 גרם/ליטר גלוקוז, גלוטמין יציב, 2.0 מ"מ נתרן פירובט ו-2.2 גרם/ליטר NaHCO3. בקרת איכות pH = 7.2 +/
- 0.02 בטמפרטורה של 20-25°C.  כל אצווה נבדקה על מנת לוודא שהיא סטרילית ונטולת מיקופלסמה וחיידקים. תחזוקה יש לשמור בקירור בטמפרטורה של +2°C עד +8°C במקום חשוך. הקפאה וחימום עד +37°C פוגעים באיכות המוצר.  אין לחמם את התמיסה ליותר מ-37°C או להשתמש במקורות חום בלתי נשלטים (למשל, מכשירי מיקרוגל).  אם יש להשתמש רק בחלק מהמדיום, יש להוציא את הכמות הדרושה מהבקבוק ולחמם אותה בטמפרטורת החדר. אורך חיי המדף של כל המדיום, למעט המדיום הבסיסי, הוא 6 עד 8 שבועות מיום הפתיחה. הרכב מרכיבים מ"ג/ל מלחים אנאורגנייםכלוריד סידן x 2H2O132.00 סולפט מגנזיום97.67 אשלגן כלורי400 נתרן כלורי6,460 דיסודיום הידרוגן פוספט (ללא מים)504 מרכיבים אחריםD(+)-גלוקוז (ללא מים)3,000 גלוטתיון (מופחת)0 פפטון בשר600 מלח נתרן פנול אדום11 חומצות אמינוL-אלנין13 L-ארגינין x HCl42.14 L-אספרגין x H2O45.03 חומצה L-אספרטית19.9 L-ציסטאין x HCl x H2O31.75 L-גלוטמין (יציב)219.15 חומצה L-גלוטמית22 גליצין7 L-היסטידין x HCl x H2O20.9 L-הידרוקסיפרולין19.6 L-איזולאוצין39.3 L-לאוצין39.36 L-ליזין x HCl36.54 L-מתיונין14.92 L-פנילאלנין16.5 L-פרולין17.27 L-סרין26.28 L-תראונין17.87 L-טריפטופן3.06 מלח דיסודיום L-טירוזין26.10 L-ואלין17.57 ויטמיניםחומצה p-אמינובנזואית1 חומצה אסקורבית0.56 D(+)-ביוטין0 D-פנטותנט סידן0.2 כלוריד כולין5 חומצה פולית10 מיו-אינוסיטול36 ניקוטיןאמיד0 חומצה ניקוטינית0.5 פירידוקסל HCl0.5 פירידוקסין HCl0.5 ריבופלבין0.2 תיאמין HCl0. ויטמין B122.0

תמיסת ניתוק תאים Accutase עם EDTA ופנול אדום – 100 מ"ל

Accutase הוא תמיסת ניתוק תאים מוכנה לשימוש, מסוננת סטרילית, שנועדה לשמש חלופה עדינה לטריפסין/EDTA לניתוק תאי יונקים דבקים מכלי פלסטיק סטנדרטיים לגידול רקמות ומשטחים מצופים בחומר הדבקה. התמיסה משלבת פעילות אנזימטית פרוטאוליטית וקולגןוליטית בתמיסת מלח מאוזנת כדי לספק ניתוק יעיל אך מבוקר, תוך שמירה על חלבוני פני השטח של התאים ותמיכה בכושר הישרדות גבוה לאחר מעבר ובחיבור מחדש מהיר.

הפורמולה של Accutase מבוססת על תמיסת מלח מאוזנת בזרחתית של Dulbecco (DPBS) עם EDTA ופנול אדום כאינדיקטור חזותי ל-pH. האנזימים הם ממקור שאינו יונק ואינו חיידקי, מה שהופך את Accutase למתאים במיוחד למחקר בתאי גזע, לתהליכי עבודה של חיסונים ולכל יישום שבו יש למזער מזהמים שמקורם בבעלי חיים או במיקרואורגניזמים. התמיסה מעכבת את עצמה בטמפרטורה של 37 °C, ולכן אין צורך בחומר מנטרל או במדיום המכיל סרום לאחר ההפרדה – ניתן להעביר את התאים ישירות למדיום טרי.

תכונות עיקריות

נוזל מסונן סטרילי 1x מוכן לשימוש – אין צורך בדילול או בהכנה
פעילות משולבת של אנזימים פרוטאוליטיים וקולגןוליטיים לפירוק עדין
כל אצווה מתוקננת לפעילות ניתוק מוגדרת, להבטחת עקביות בין אצוות
מקור אנזימים שאינו יונקי ואינו חיידקי
עיכוב עצמי בטמפרטורה של 37 °C – אין צורך בתמיסת נטרול
נוסחה ב-PBS של Dulbecco עם EDTA
כולל פנול אדום כאינדיקטור חזותי ל-pH
pH 6.8 – 7.8


יישומים אופייניים
Accutase מפרק בעדינות מגוון רחב של סוגי תאים דבקים ורגישים, כולל תאי גזע עובריים אנושיים (hESCs), תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים אנושיים (iPSCs), תאי גזע עצביים, נוירונים ראשוניים, וקווי תאים דבקים המגודלים באופן שגרתי כגון HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 ו-A549. דוגמאות לשימוש טיפוסי כוללות:

תרביות משנה שגרתיות והעברת תאים דבקים של יונקים
פירוק עדין של תאים בודדים מ-hESCs, iPSCs וקווים רגישים אחרים
הכנת דגימות לניתוח ציטומטריה זרימה ו-FACS
ניתוח סמנים על פני התא כאשר שלמות האפיטופ חשובה
בדיקות נדידת תאים, התרבות ואפופטוזיס
בדיקות רגיעה באמצעות מניעת סרום ומחקרי טרנספקציה של אונקוגנים
בדיקות נדידת תאי גידול ותאי קשת עצבית
הגדלת היקף הייצור בתהליכי עבודה של ביו-ריאקטורים

לעבודה שגרתית, יש למרוח כ-10 מ"ל של Accutase לכל 75 סמ"ר של משטח תרבית ולדגיר במשך 5–10 דקות בטמפרטורת החדר. יש לקבוע את זמן הדגירה האופטימלי עבור כל קו תאים, והוא לא יעלה על שעה אחת. לפני ההוספה, יש לשטוף את שכבת התאים בתמיסת מלח נטולת Ca2+/Mg2+, כגון DPBS ללא סידן ומגנזיום, כדי להסיר שאריות סרום וקטיונים דו-ערכיים.

טיפול ואחסון
יש לאחסן את הבקבוק הסגור בהקפאה בטמפרטורה של -15 °C ומטה. יש להפשיר בטמפרטורת החדר או במשך הלילה בטמפרטורה של +2 °C עד +8 °C. אין להפשיר את Accutase באמבט מים בטמפרטורה של 37 °C, שכן טמפרטורות גבוהות מפחיתות את פעילות האנזים. לאחר ההפשרה, ניתן לאחסן את התמיסה עד חודשיים בטמפרטורה של +2 °C עד +8 °C; אין לאחסן בטמפרטורת החדר. אין לחמם את הריאגנט מראש ל-37 °C לפני השימוש – יש להוסיף אותו ישירות לתאים שטופים בטמפרטורת החדר. לשמירה על חיי מדף ארוכים, מומלץ לחלק את התמיסה למנות חד-פעמיות כדי למנוע מחזורי הפשרה חוזרים. יש לעבוד תמיד בתנאים סטריליים.

איכות
מיוצר תחת תקני איכות מחמירים. כל אצווה של Accutase מסוננת בסטריליות ונבדקת על מנת לוודא סטריליות, pH, מראה ופעילות דיסוציאציה, כדי להבטיח ביצועים עקביים וניתנים לשחזור מאצווה לאצווה.

מפרט המוצר



מפרט
פרטים



סוג המוצרריאגנט לניתוק/דיסוציאציה של תאים
פורמטנוזל מסונן סטרילי, מוכן לשימוש
נפח100 מ"ל
ריכוז עבודה1x (מוכן לשימוש)
פעילות אנזימטיתפרוטאוליטית וקולגןוליטית משולבת
מקור האנזיםלא-יונקי ולא-בקטריאלי
מערכת חיץPBS של דולבקו עם EDTA
אינדיקטור pHפנול אדום
טווח pH6.8 – 7.8
מראהתמיסה צלולה, בצבע אדום בהיר עד כתום
טמפרטורת אחסון-15 °C או פחות
יציבות לאחר הפשרהעד 2 חודשים בטמפרטורה שבין +2 °C ל-+8 °C
נפח שימוש מומלץ~10 מ"ל לכל 75 סמ"ר משטח תרבית
זמן דגירה אופייני5 – 10 דקות בטמפרטורת החדר
תנאי משלוחמוקפא על קרח יבש
שימוש מיועדלשימוש במחקר וייצור בלבד



הרכב (הרכב לליטר)



מרכיב
ריכוז (מ"ג/ל')




מלחים אנאורגניים

נתרן כלורי (NaCl)8000.00
הידרוגן פוספט דיסודיום (Na2HPO4)1150.00
אשלגן כלורי (KCl)200.00
די-הידרוגן פוספט אשלגן (KH2PO4)200.00

מרכיבים אחרים

EDTA · 4Na (EDTA טטרסודיום)220.00
פנול אדום3.00
תערובת אנזימים קניינית (פעילות פרוטאוליטית וקולגןוליטית)1x



Accutase הוא סימן מסחרי רשום של Innovative Cell Technologies, Inc.

סקירת המוצר
נפח: 100 מ"ל
אחסון: ≤-15°C
סטריליות: מסונן סטרילי
תמיסת אנטיביוטיקה/אנטימיקוטית (100x) היא תמיסה סטרילית, מוכנה לשימוש, שנועדה להפחית את הסיכונים לזיהום מיקרוביאלי בתרבית תאים וביישומים מעבדתיים נלווים. תמיסה זו, המרוכזת פי 100, מכילה שילוב מוכח של פניצילין, סטרפטומיצין ואמפותריצין B, המספק פעילות אנטימיקרוביאלית רחבת טווח נגד חיידקים גראם-חיוביים וגראם-שליליים, שמרים ופטריות פילמנטריות. התכשיר מתאים לשימוש בתרבויות תאים אוקריוטיות, במדיות חיידקים ובמערכות רגישות לזיהום אחרות, ותומך בפעילות מעבדה נקייה ועקבית.
יישום ויתרונות תמיסה זו, המותאמת לפרוטוקולי מחקר שגרתיים, נמצאת בשימוש נרחב לשמירה על תנאים סטריליים בתהליכי עבודה של תרבית תאים. היא מציעה ביצועים אמינים בסביבות רגישות לזיהום, ומסייעת לחוקרים להפחית את הסיכון לצמיחת יתר של מיקרואורגניזמים מבלי לפגוע בבריאות התאים או ביכולת לשחזר את הניסויים. התכשיר המסונן בסטריליות מבטל את הצורך בשלבי המסה נוספים, תומך בהכנת מצעים יעילה ומפחית את השונות בהליכים המעבדתיים היומיומיים.
שימוש ותאימות כדי להשיג ריכוזים סטנדרטיים לעבודה, יש לדלל את התמיסה ביחס של 1:100 בתווך התרבית המלא. המוצר תואם למגוון רחב של קווי תאים של יונקים ותווך בסיסי. בזכות זמינות מלאי עקבית, החוקרים נהנים מהמשכיות אספקה אמינה ותכנון לוגיסטי פשוט. יש לאחסן את התמיסה בטמפרטורה של ≤ –15 °C ולהגן עליה מפני מחזורי הקפאה והפשרה חוזרים ונשנים כדי לשמור על יציבותה. לשימוש במחקר בלבד. לא לשימוש בהליכים אבחוניים או טיפוליים. לא לשימוש בבני אדם או בבעלי חיים.

תמיסת מלח מאוזנת פוספט (PBS)
תמיסת מלח מאוזנת פוספט (PBS) היא תמיסת חיץ נפוצה במחקר ביולוגי וכימי. היא ממלאת תפקיד מכריע בשמירה על איזון ה-pH והאוסמולריות במהלך הליכים ניסויים שונים, כולל עיבוד רקמות ותרבית תאים. תמיסת ה-PBS שלנו מנוסחת בקפדנות מרכיבים בעלי טוהר גבוה כדי להבטיח יציבות ואמינות בכל ניסוי. האוסמולריות וריכוזי היונים ב-PBS שלנו מדמים באופן הדוק את אלה של גוף האדם, מה שהופך אותו לאיזוטוני ולא רעיל לרוב התאים.

הרכב תמיסת ה-PBS שלנו
תמיסת PBS שלנו היא תערובת של חומרי חיץ פוספט ברמת טוהר גבוהה ותמיסות מלח, המותאמת ל-pH. בריכוז עבודה של 1X, היא מכילה:

8000 מ"ג/ל' נתרן כלורי (NaCl)
200 מ"ג/ל' אשלגן כלורי (KCl)
1150 מ"ג/ל' נתרן פוספט דו-בסיסי נטול מים (Na2HPO4)
200 מ"ג/ל' אשלגן פוספט חד-בסיסי נטול מים (KH2PO4)

הרכב זה מבטיח pH ואיזון יוני אופטימליים, המתאימים למגוון רחב של יישומים ביולוגיים.

יישומים של תמיסת PBS שלנו
תמיסת PBS שלנו אידיאלית ליישומים שונים במחקר ביולוגי. תכונותיה האיזוטוניות והלא רעילות הופכות אותה למתאימה לדילול חומרים ושטיפת מיכלים לתאים. תמיסות PBS המכילות EDTA יעילות לניתוק תאים דבוקים ומאוגדים. עם זאת, אין להוסיף מתכות דו-ערכיות כגון אבץ ל-PBS, מכיוון שהדבר עלול לגרום לשקיעה. במקרים כאלה, מומלץ להשתמש במאגרים של Good. בנוסף, תמיסת PBS שלנו מהווה חלופה מקובלת למדיום הובלה נגיפי להובלה ואחסון של נגיפי RNA, כולל SARS-CoV-2.

בקרת איכות

מסונן סטרילי


אחסון ותוקף

יש לאחסן בטמפרטורה של +2°C עד +25°C, הרחק מאור.
לאחר הפתיחה, יש לאחסן בטמפרטורה של 2°C עד 25°C ולהשתמש תוך 24 חודשים.


תנאי משלוח

טמפרטורת הסביבה


תחזוקה

יש לאחסן בקירור בטמפרטורה של +2°C עד +8°C במקום חשוך. יש להימנע מהקפאה ומחימום תכוף ל-+37°C, מכיוון שהדבר פוגע באיכות המוצר.
אין לחמם את המדיום מעבר ל-37°C או להשתמש במקורות חום בלתי מבוקרים כגון מכשירי מיקרוגל.
אם יש להשתמש רק בחלק מהמדיום, יש להוציא את הכמות הנדרשת ולחמם אותה לטמפרטורת החדר לפני השימוש.

הרכב



קטגוריה
מרכיבים
ריכוז (מ"ג/ל')


מלחים
אשלגן כלורי
200



אשלגן פוספט חד-בסיסי נטול מים
20



נתרן כלורי
800



נתרן פוספט דו-בסיסי נטול מים
115