CLS will be called Cytion
Fastest deliveries on the market
> 800 well characterized cell lines
Worldwide service – one hand, one partner
Visit cytion.com for your cell line needs

MCF10A-Zelllinie

Die MCF10A-Zelllinie ist ein zentrales Instrument in der Brustkrebsforschung, da sie ein immortalisiertes, aber nicht-tumorigenes menschliches Brustepithelzellmodell darstellt. Diese Zelllinie wird ausgiebig genutzt, um die Feinheiten der normalen Brustzellfunktion, Transformationsprozesse und die der Brustbiologie zugrunde liegenden Mechanismen zu erforschen, einschließlich zellulärer Verhaltensweisen, Signalwege und Genexpressionsmuster. Darüber hinaus dienen MCF10A-Zellen als wichtige Ressource, um die Entwicklung von Brusttumoren zu erforschen, ihr Fortschreiten zu verstehen und potenzielle therapeutische Strategien zu evaluieren.

Herkunft und allgemeine Merkmale von MCF10A-Zellen

Bei der Erforschung der MCF10A-Zelllinie ist es den Forschern besonders wichtig, ihren Ursprung und ihre besonderen Merkmale zu verstehen, die Aufschluss über ihre Anwendung und ihren Nutzen in der Forschung geben. Die MCF10A-Zelllinie, die 1984 aus der Brustdrüse einer 36-jährigen kaukasischen Frau mit fibrozystischer Brusterkrankung gewonnen wurde, ist für ihr nicht-tumorigenes Profil bekannt, was sie zu einem beispielhaften Modell für die Untersuchung von normalem menschlichem Brustgewebe in vitro macht.

Zu den wichtigsten Merkmalen der MCF10A-Zelllinie gehören:

  • Epitheliale Morphologie: MCF10A-Zellen wachsen in der Regel in Monolayern, können aber auch kuppelartige Strukturen in konfluenten Kulturen bilden, was ihre dynamischen Wachstumsmuster verdeutlicht.
  • Zellgröße: Die Größe der MCF10A-Zellen variiert zwischen 14,5 μm und 26,2 μm, was eine Reihe von Versuchsaufbauten ermöglicht.
  • Karyotyp: MCF10A-Zellen weisen einen Karyotyp mit 47 Chromosomen auf, der Einblicke in genetische Studien und Chromosomenforschung an Brustepithelzellen bietet.

MCF10AT1: Ein prä-malignes Derivat

Die Zelllinie MCF10AT1, die durch Transfektion von MCF10A-Zellen mit dem HRAS-Gen entwickelt wurde, stellt ein prämalignes Stadium dar, das in der Lage ist, duktale Strukturen und Läsionen zu bilden, die der atypischen duktalen Hyperplasie (ADH) und dem duktalen Karzinom in situ (DCIS) ähneln, wenn sie in immungeschwächte Mäuse eingebracht werden. Diese Transformation unterstreicht den Nutzen der Zelllinie für die Modellierung von Brustkrebsentwicklungen im Frühstadium und die Untersuchung des Übergangs von gutartigen zu bösartigen Zuständen.

Arzt prüft Mammographie-Röntgenbild. Mammographie-Diagnose für die Prävention von Brustkrebs.

MCF10A-Zellen: Informationen zur Zellkultur

MCF10A, eine in der Brustkrebsforschung weit verbreitete Zelllinie, erfordert eine präzise Handhabung und Pflege, um ihre Lebensfähigkeit und Nützlichkeit in experimentellen Umgebungen zu gewährleisten. In diesem Leitfaden werden die wesentlichen Überlegungen zur effektiven Kultivierung von MCF10A-Zellen dargelegt. Dabei wird auf die Verdopplungszeit, die bevorzugten Medien, die Aussaatdichte und die Adhärenz-Eigenschaften eingegangen.

Wichtige Punkte für die Kultivierung von MCF10A-Zellen

  • Verdopplungszeit der Population: Die MCF10A-Zelllinie hat in der Regel eine Verdopplungszeit von etwa 20 Stunden, was auf ihre robuste Wachstumsrate unter optimalen Bedingungen hindeutet.

  • Adhärenz-Eigenschaften: Diese Zellen weisen ein adhärentes Wachstumsmuster auf und benötigen ein festes Substrat zur Anheftung und Vermehrung.

  • Subkultivierungsverfahren: Für die Subkultivierung wird ein Splitverhältnis von 1:2 bis 1:4 empfohlen. Das Protokoll sieht vor, die Zellen mit PBS zu waschen, sie mit Accutase abzulösen und sie nach Zentrifugation und Resuspension in frischem Medium in einen neuen Kolben zu überführen. Es ist ratsam, das Nährmedium zwei- bis dreimal pro Woche aufzufrischen, um ein gesundes Wachstum zu unterstützen.

  • Wachstumsmedium: MCF10A-Zellen gedeihen in MEGM, einem Spezialmedium, das zur Optimierung von Zellwachstum und -funktion mit 100 ng/ml Choleratoxin angereichert werden sollte.

  • Optimale Wachstumsbedingungen: Die Kulturen sollten in einem befeuchteten Inkubator bei 37°C und einer 5%igen CO2-Atmosphäre gehalten werden, um die physiologischen Bedingungen genau nachzubilden.

  • Richtlinien für die Lagerung: Für eine langfristige Lagerung sollten die Zellen in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder bei Temperaturen unter -150°C in einem Ultratiefkühlschrank aufbewahrt werden.

  • Einfrier- und Auftauprozeduren: Das empfohlene Einfriermedium für MCF10A-Zellen ist entweder CM-1 oder CM-ACF. Verwenden Sie eine langsame Einfriertechnik, um den Temperaturschock zu minimieren. Das Auftauen sollte behutsam in einem 37 °C warmen Wasserbad erfolgen, bis ein kleiner Eisklumpen zurückbleibt. Anschließend sollten die Zellen mit frischem Kulturmedium gemischt, zentrifugiert und das Zellpellet in neuem Medium resuspendiert werden, bevor es in eine Kulturflasche überführt wird.

  • Biosicherheitsüberlegungen: MCF10A-Zellkulturen können in Labors der Biologischen Schutzstufe 1 sicher gehandhabt werden, wobei eine unkomplizierte Pflege und die Einhaltung der Sicherheitsstandards gewährleistet sind.

Die Einhaltung dieser Richtlinien erleichtert die erfolgreiche Kultivierung von MCF10A-Zellen, so dass sie weiterhin zum Fortschritt der Brustkrebsforschung beitragen können.

MCF10A-Zellen, die in adhärenten Clustern bei 20- und 10-facher Vergrößerung wachsen.

Vorteile und Beschränkungen der MCF10A-Zelllinie

Die Erforschung der MCF10A-Zelllinie ermöglicht ein differenziertes Verständnis sowohl ihrer vorteilhaften Eigenschaften als auch der ihr innewohnenden Beschränkungen, die für ihre effektive Anwendung in der Brustkrebsforschung entscheidend sind.

Vorteile

  • Nicht-tumorigene Natur: Ein Markenzeichen der MCF10A-Zellen ist ihre nicht-tumorigene Eigenschaft, die es Forschern ermöglicht, das Verhalten und die Biologie normaler Brustzellen zu untersuchen, ohne die Komplikationen der Tumorbildung in immundefizienten Mäusen.

  • bildung von 3D-Strukturen: MCF10A-Zellen besitzen die einzigartige Fähigkeit, dreidimensionale azinäre Strukturen zu bilden, die normalem Brustepithel ähneln, wenn sie in speziellen Medien wie Kollagen kultiviert werden. Diese Fähigkeit ist entscheidend für die Untersuchung der Organisation und des Verhaltens von Brustzellen in einem 3D-Kontext und bietet Einblicke, die den Bedingungen in vivo näher kommen.

Beschränkungen

  • Phänotypische Plastizität: Trotz ihrer Vorteile weisen MCF10A-Zellen unter verschiedenen Kulturbedingungen eine Variabilität in Phänotyp und Verhalten auf, was die Konsistenz und Reproduzierbarkeit der Versuchsergebnisse beeinträchtigen kann.

Forschungsanwendungen der MCF10A-Zelllinie

MCF10A-Zellen finden in verschiedenen Forschungsbereichen breite Anwendung, darunter:

  • Biologie der normalen Brust: Als In-vitro-Modell erleichtern MCF10A-Zellen die Untersuchung der Funktionen normaler Brustepithelzellen, wie z. B. Adhäsion, Morphogenese und Signalübertragungswege. Vergleichende Studien mit krebsartigen Zelllinien wie MCF7 zeigen jedoch, dass die in klinischen Proben beobachteten krebsbedingten Prozesse nicht vollständig nachgeahmt werden können.

  • Medikamenten-Screening: Die MCF10A-Zelllinie ist von zentraler Bedeutung für das Wirkstoffscreening, da sie die Bewertung der Zytotoxizität und Wirksamkeit neuer Therapien gegen Brustkrebs ermöglicht. Die Forschung, die diese Zellen zur Bewertung der Wirkungen von Naturstoffen wie Senna alata-Extrakten einsetzt, veranschaulicht deren Nutzen für die Therapieentwicklung.

  • Studien zur Tumorigenese: Obwohl MCF10A-Zellen von Natur aus nicht tumorerzeugend sind, sind sie für die Tumorentstehungsforschung wertvoll. Sie können neben Krebszelllinien verwendet oder genetisch verändert werden, um die genetischen Grundlagen und Signalwege zu untersuchen, die mit der Entwicklung und dem Fortschreiten von Brustkrebs in Verbindung stehen. So hat beispielsweise die Manipulation des PHLDA1-Gens in MCF10A-Zellen Aufschluss über seine potenzielle Rolle bei der Förderung von Zellmigration und -invasion gegeben, was seine Bedeutung als therapeutisches Ziel unterstreicht.

MCF10A-Zellen mit ihren besonderen Eigenschaften und vielseitigen Verwendungsmöglichkeiten sind weiterhin ein Eckpfeiler für den Fortschritt in der Brustkrebsforschung und bieten entscheidende Einblicke in die komplexe Biologie von Brustepithelzellen.

Erschließen Sie das Potenzial Ihrer Forschung mit unseren MCF10A-Zellen

MCF10A-Zellen: Forschungspublikationen

Hier sind einige der bemerkenswertesten und am häufigsten zitierten Forschungsstudien aufgeführt, in denen die MCF10A-Zelllinie verwendet wurde und die einen wichtigen Beitrag zur Brustkrebsforschung geleistet haben.

  • Einblicke in den TGF-β-Signalweg: Eine entscheidende Studie, die im International Journal of Oncology (2004 ) veröffentlicht wurde , befasste sich mit dem TGF-β-Signalweg in MCF10A-Zellen und zeigte, dass eine TGF-β-Behandlung migratorische und invasive Phänotypen hervorrufen kann, was die Komplexität der zellulären Reaktionen auf TGF-β unterstreicht.

  • Studie zum Giftsack-Extrakt: Die in Toxin Reviews (2023) vorgestellte Forschung untersuchte die Auswirkungen des Hornissengiftsack-Extrakts Vespa orientalis auf MCF10A-Zellen und untersuchte seine zytotoxischen, nekrotischen, apoptotischen und autophagischen Eigenschaften, was neue Wege zum Verständnis der Zellreaktion auf natürliche Toxine eröffnet.

  • Die Rolle von Leptin bei der Invasion von Zellen: Eine in Cells (2019) veröffentlichte Studie zeigt, dass Leptin, ein bekanntes Adipokin, die Expression von EMT-bezogenen Transkriptionsfaktoren fördert und die Invasion in MCF10A-Zellen über einen von Src und FAK abhängigen Weg verstärkt, was das komplexe Zusammenspiel zwischen Adipokinen und dem Verhalten von Krebszellen verdeutlicht.

  • Die tumorerzeugenden Eigenschaften von Connexin 32: Die in der Zeitschrift Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Cell Research (2020) veröffentlichte Studie geht davon aus, dass das Connexin-32-Protein MCF10A-Zellen pro-tumorigene Eigenschaften verleihen kann, was auf eine mögliche Rolle von Connexin-32 in den frühen Stadien der Brustkrebsentwicklung hindeutet.

  • Wirkung von Pseudevernia furfuracea-Extrakt: In einem Artikel in Biomolecules (2021) wurden die Auswirkungen des Extrakts von Pseudevernia furfuracea (L.) Zopf und seines Metaboliten Physodinsäure auf die Modulation der Tumormikroumgebung in MCF10A-Zellen untersucht, was Einblicke in die potenziellen therapeutischen Anwendungen von Naturstoffen bei der Modulation von Tumor-Stroma-Interaktionen bietet.

Diese Veröffentlichungen unterstreichen die Vielseitigkeit und Anwendbarkeit der MCF10A-Zelllinie bei der Verbesserung unseres Verständnisses der Brustkrebsbiologie, von der Erforschung zellulärer Signalwege bis hin zur Bewertung der potenziellen therapeutischen Wirkung natürlicher und synthetischer Substanzen.

Ressourcen für die MCF10A-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr

Im Folgenden finden Sie einige Online-Ressourcen für MCF10A-Zellen.

  • MCF10A-Transfektion: Dieser Link enthält ein detailliertes Protokoll für die Transfektion von Plasmid-DNA in MCF10A-Zellen.
  • Zellkulturprotokolle: In diesem Video wird das grundlegende Protokoll für das Passagieren, Einfrieren und Auftauen von adhärenten Zellen erläutert.

Das MCF10A-Zellkulturprotokoll ist hier aufgeführt.

  • MCF10A-Zellkulturprotokoll: Dieses Dokument enthält ein Schritt-für-Schritt-Protokoll für die Passage von MCF10A-Zellen.
  • MCF10A-Zellen subkultivieren: Dieser Link hilft Ihnen, das Protokoll für die Subkultivierung von MCF10A-Brustepithelzellen zu lernen.
  • MCF10A-Zelllinie: Auf dieser Website erfahren Sie alles über das grundlegende MCF10A-Zellkulturprotokoll, einschließlich der Protokolle für die Subkultivierung und die Handhabung von proliferativen und kryokonservierten Kulturen.

Quellenangaben

  1. Qu, Y., et al., Evaluation of MCF10A as a Reliable Model for Normal Mensch Mammary Epithelial Cells. PLoS One, 2015. 10(7): p. e0131285.
  2. Marella, N.V., et al., Cytogenetic and cDNA microarray expression analysis of MCF10 human breast cancer progression cell lines. Cancer Res, 2009. 69(14): p. 5946-53.
  3. So, J.Y., et al., Differential Expression of Key Signaling Proteins in MCF10 Cell Lines, a Mensch Breast Cancer Progression Model. Mol Cell Pharmacol, 2012. 4(1): p. 31-40.
  4. Goh, J.J.H., et al., Transcriptomics indicate nuclear division and cell adhesion not recapitulated in MCF7 and MCF10A compared to luminal A breast tumours. Sci Rep, 2022. 12(1): p. 20902.
  5. Modarresi Chahardehi, A., et al., Geringe Zytotoxizität und antiproliferative Aktivität auf Krebszellen, der Pflanze Senna alata (Fabaceae). Revista de Biología Tropical, 2021. 69.
  6. Bonatto, N., et al., PHLDA1 (pleckstrin homology-like domain, family A, member 1) knockdown fördert Migration und Invasion von MCF10A Brustepithelzellen. Cell Adh Migr, 2018. 12(1): p. 37-46.

Wir haben erkannt, dass Sie sich in einem anderen Land befinden bzw. eine andere Browser Sprache verwenden als Aktuell ausgewählt. Möchten Sie die Vorgeschlagenen Einstellungen übernehmen?

Schließen