RKO-AS45-1-Zellen


Allgemeine Informationen
Beschreibung | Die Zelllinie RKO-AS45-1 wurde aus der Kolonkarzinom-Zelllinie RKO durch Transfektion mit den offenen Leserasterabschnitten menschlicher cDNAs für GADD45, die in den Expressionsvektor pCMV kloniert wurden, erzeugt. |
---|---|
Organismus | Menschen |
Gewebe | Doppelpunkt |
Krankheit | Kolonkarzinom |
Synonyme | RKO-AS-45-1, RKOAS451, RKO_AS45 |
Merkmale
Morphologie | Epithelial |
---|---|
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | RKO-AS45-1 (Cytion-Katalognummer 305146) |
---|---|
Biosicherheitsstufe | 2 |
Expression / Mutation
Handhabung
Nährboden | EMEM, w: 2 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM Natriumpyruvat, w: NEAA (Cytion-Artikelnummer 820100c) |
---|---|
Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:5 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
|
Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
---|---|
STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 8,11
D13S317: 8,11
D16S539: 12.1,13
D5S818: 11,13
D7S820: 8,1
TH01: 6,1
TPOX: 10,11
vWA: 16,24
D3S1358: 15,16,18
D21S11: 28,3
D18S51: 11,12
Penta E: 11,13
Penta D: 10,11.1
D8S1179: 9,13,14
FGA: 20,22
D6S1043: 14.1,20
D2S1338: 16
D12S391: 15,2
D19S433: 14
|